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玉米TILLING突变库的构建及高直链淀粉基因ae的筛选

内容提要第1-8页
第一章 前言第8-27页
   ·高直链淀粉玉米第8-9页
   ·高直链淀粉玉米的研究利用现状第9-10页
   ·影响玉米直链淀粉含量的基因ae第10-14页
     ·淀粉分支酶SBEII b的编码基因ae第10页
     ·基因ae的研究利用现状第10-11页
     ·胚乳淀粉修饰突变基因间互作第11-12页
     ·高直链淀粉玉米的变异类型第12-13页
     ·淀粉修饰基因对淀粉物理特性和酶活性的影响第13-14页
   ·高直链淀粉玉米育种存在的问题第14-16页
     ·修饰基因以及遗传背景对基因ae高效表达的作用第14-15页
     ·淀粉总含量的减少第15页
     ·打破基因ae与其它不良性状基因的连锁第15页
     ·直链淀粉测定的可靠性第15-16页
     ·高直链淀粉玉米的研究与应用的局限性第16页
   ·TILLING技术在高直链淀粉玉米研究中的应用第16-25页
     ·TILLING技术的产生第17-18页
     ·TILLING技术路线第18-19页
     ·化学诱变剂EMS第19-20页
     ·TILLING技术中突变体及表型的鉴定第20页
     ·EcoTILLING技术第20-21页
     ·TILLING技术的特点第21-23页
     ·TILLING技术的应用概况第23-25页
     ·TILLING技术的应用前景第25页
   ·本研究的目的和依据第25-27页
第二章 实验材料第27-31页
   ·玉米样品来源第27页
   ·菌种与载体第27页
   ·主要试剂第27页
   ·主要仪器第27-28页
   ·常用溶液配制第28-31页
第三章 实验流程及方法第31-42页
   ·实验流程第31页
   ·实验方法第31-42页
     ·EMS花粉诱变第31-32页
     ·基因组DNA的获得第32-33页
     ·基因ae引物设计第33-34页
     ·基因ae扩增产物特异性分析第34-37页
     ·高分辨率熔解曲线检测(HRM)第37-38页
     ·确定突变的样品第38-39页
     ·直链淀粉含量的测定第39-42页
第四章 实验结果第42-61页
   ·EMS花粉诱变结果第42-49页
     ·EMS对种子结实率的影响第42页
     ·EMS对M_1代的诱变效应第42-45页
     ·EMS对M_2代的诱变效应第45-49页
   ·基因组DNA的提取第49页
     ·基因组DNA浓度的测定第49页
     ·基因组 DNA的电泳检测第49页
   ·基因ae扩增结果第49-51页
     ·基因ae的特异性引物第49-50页
     ·扩增片段验证第50-51页
   ·高分辨率熔解曲线(HRM)检测结果第51-58页
     ·Lightscanner系统第一轮检测结果第51-54页
     ·Lightscanner系统第二轮检测结果第54-55页
     ·突变样品序列分析及生物信息学分析第55-58页
   ·突变籽粒的直链淀粉含量测定第58-61页
     ·波长的选择第58-59页
     ·直链淀粉标准样品的回归方程第59-60页
     ·样品含量计算第60-61页
第五章 讨论第61-65页
   ·EMS花粉诱变处理浓度的确定及其育种价值第61页
   ·基因组DNA的提取第61-62页
   ·PCR反应体系的优化第62-64页
     ·DNA质量对结果的影响第62页
     ·引物设计的一般规则第62-63页
     ·酶质量和浓度对扩增的影响第63页
     ·循环参数第63页
     ·Mg~(2+)、dNTP的浓度对PCR扩增的影响第63-64页
   ·高直链淀粉玉米的研究第64-65页
第六章 结论第65-66页
参考文献第66-70页
致谢第70-71页
中文摘要第71-73页
ABSTRACT第73-74页

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