摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-16页 |
第一章 前言 | 第16-32页 |
·CD44 及其糖基化研究 | 第16-18页 |
·CD44 的功能 | 第16页 |
·CD44 蛋白家族 | 第16-17页 |
·CD44s 的糖基化 | 第17-18页 |
·肝脏和淋巴结窦状上皮细胞C-型凝集素LSECtin | 第18-19页 |
·LSECtin 识别 CD44s 与肿瘤转移 | 第19-20页 |
·蛋白质的糖基化修饰 | 第20-22页 |
·糖蛋白质组学的研究策略 | 第22-30页 |
·糖蛋白/糖肽的分离纯化与富集 | 第22-25页 |
·糖蛋白的Top-down 分析策略 | 第25页 |
·糖蛋白的酶切 | 第25-26页 |
·糖链的切除 | 第26-27页 |
·聚糖的衍生化 | 第27页 |
·聚糖的分析方法 | 第27-29页 |
·糖肽的分析 | 第29-30页 |
·聚糖生物合成的生物示踪 | 第30页 |
·本论文主要研究内容与拟解决的科学问题 | 第30-32页 |
第二章 NS0 细胞系表达的标准型CD44(CD44s)的N-糖基化分析 | 第32-62页 |
·引言 | 第32页 |
·材料和方法 | 第32-36页 |
·主要试剂 | 第32-33页 |
·仪器设备 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-36页 |
·结果与讨论 | 第36-61页 |
·CD44 N-糖基化位点的确认 | 第36-41页 |
·CD44s N-糖的泛甲基化修饰与MALDI-TOF 质谱检测 | 第41-43页 |
·CD44s N-糖的糖苷外切酶酶切与MALDI-TOF 质谱分析 | 第43-47页 |
·CD44s 上各N-聚糖的相对含量分析 | 第47-52页 |
·CD44s 的糖肽分析 | 第52-61页 |
·本章小结 | 第61-62页 |
第三章 LSECtin 识别CD44s 机理的初步探索 | 第62-75页 |
·引言 | 第62页 |
·材料与方法 | 第62-66页 |
·主要试剂 | 第62-63页 |
·仪器设备 | 第63页 |
·实验方法 | 第63-66页 |
·结果与讨论 | 第66-75页 |
·抗体偶联与LSECtin 结合效果的考察 | 第66-67页 |
·LSECtin 识别CD44s 的糖基化位点及糖型的鉴定 | 第67-70页 |
·位点突变验证实验 | 第70页 |
·三维结构与识别位点分析 | 第70-72页 |
·糖链转变验证实验 | 第72-74页 |
·本章小结 | 第74-75页 |
第四章 CHO 细胞系表达的CD44sN-糖基化分析 | 第75-92页 |
·引言 | 第75页 |
·材料和方法 | 第75-79页 |
·主要试剂 | 第75页 |
·仪器设备 | 第75-76页 |
·实验方法 | 第76-79页 |
·结果与讨论 | 第79-90页 |
·抗体纯化条件的优化 | 第79-80页 |
·N-糖基化位点的确认 | 第80-84页 |
·CD44s N-糖的泛甲基化与MALDI-TOF 质谱检测 | 第84-86页 |
·CD44s N-糖的糖苷外切酶酶切与MALDI-TOF 质谱检测 | 第86-89页 |
·NS0 细胞与 CHO 细胞中表达的 CD44s N-糖分布的比较 | 第89-90页 |
·本章小结 | 第90-92页 |
第五章 寡糖衍生化与MALDI-TOF 质谱分析方法研究 | 第92-102页 |
·引言 | 第92页 |
·材料与方法 | 第92-94页 |
·材料 | 第92-93页 |
·溶液的配制 | 第93页 |
·衍生化 | 第93页 |
·MALDI-TOF 质谱分析 | 第93页 |
·去唾液酸化胎球蛋白N-糖的制备 | 第93页 |
·CHO 细胞中重组表达CD44s N-糖的纯化 | 第93-94页 |
·结果与讨论 | 第94-101页 |
·CPH 衍生化反应机理 | 第94-95页 |
·基质的影响 | 第95-96页 |
·衍生化反应条件的优化 | 第96-99页 |
·对葡聚糖的分析 | 第99页 |
·对去唾液酸化胎球蛋白的N-糖链分析 | 第99-100页 |
·对CHO 细胞表达的CD44 的N-糖链分析 | 第100-101页 |
·本章小结 | 第101-102页 |
全文总结 | 第102-103页 |
参考文献 | 第103-117页 |
攻读博士学位期间发表的文章 | 第117-118页 |
个人简历 | 第118-119页 |
致谢 | 第119页 |