摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-16页 |
引言 | 第16-20页 |
第一部分 重组腺病毒载体扩增、鉴定、纯化、滴度测定 | 第20-41页 |
1 材料 | 第21-27页 |
·重组腺病毒基因 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21-22页 |
·仪器设备 | 第22-23页 |
·试剂配制 | 第23-27页 |
2 方法 | 第27-32页 |
·HEK293A细胞复苏、培养、冻存 | 第27-28页 |
·腺病毒介导的人突变型HIF-1α基因的扩增和保存 | 第28页 |
·重组腺病毒纯化 | 第28-29页 |
·重组腺病毒滴度测定 | 第29-30页 |
·重组腺病毒DNA提取和鉴定 | 第30-32页 |
·Ad-LacZ转染HEK293A细胞及X-gal染色 | 第32页 |
3 结果 | 第32-37页 |
·重组腺病毒滴度测定 | 第32-33页 |
·重组腺病毒Ad-HIF-1α_(564/402/803)DNA PCR鉴定 | 第33-34页 |
·重组腺病毒Ad-HIF-1α_(564/402/803)测序结果 | 第34-35页 |
·Ad-LacZ转染HEK293A细胞X-gal染色结果 | 第35-36页 |
·重组腺病毒感染HEK293A细胞 | 第36-37页 |
4 讨论 | 第37-40页 |
5 结论 | 第40-41页 |
第二部分 重组腺病毒三突变型HIF-1α对血管新生的影响 | 第41-58页 |
1 材料 | 第41-43页 |
·主要试剂 | 第41-42页 |
·细胞株和实验动物 | 第42页 |
·主要仪器 | 第42页 |
·主要试剂配制 | 第42-43页 |
2 方法 | 第43-47页 |
·人微血管内皮细胞(hMVECs)的培养 | 第43-44页 |
·重组腺病毒转染染效率的测定 | 第44页 |
·重组腺病毒Ad-HIF-1α_(564/402/803)对血管新生的影响 | 第44-47页 |
3 结果 | 第47-52页 |
·hMVECs免疫荧光组化鉴定结果 | 第47-48页 |
·重组腺病毒转染效率的测定 | 第48-49页 |
·重组腺病毒Ad-HIF-1α_(564/402/803)对血管新生的影响 | 第49-52页 |
4 讨论 | 第52-57页 |
5 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
本研究不足之处 | 第65-66页 |
缩略词表 | 第66-68页 |
致谢 | 第68-70页 |
统计学证明 | 第70页 |