| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-25页 |
| ·兔病毒性出血症的流行现状 | 第12-13页 |
| ·兔病毒出血症病原学分类及主要生物学特征 | 第13-14页 |
| ·病毒基因组结构与功能 | 第14-15页 |
| ·RHDV的结构蛋白与非结构蛋白 | 第15-16页 |
| ·结构蛋白 | 第15-16页 |
| ·非结构蛋白 | 第16页 |
| ·兔病毒性出血症疫苗研究进展 | 第16-19页 |
| ·兔病毒性出血症灭活疫苗研究进展 | 第16-17页 |
| ·不同载体表达兔出血症病毒VP60蛋白研究进展 | 第17-19页 |
| ·乳酸菌概述 | 第19-23页 |
| ·乳酸菌的益生作用 | 第19页 |
| ·乳酸菌的抑菌作用 | 第19-20页 |
| ·乳酸菌的表达系统 | 第20-21页 |
| ·乳酸菌与黏膜免疫 | 第21-22页 |
| ·乳酸菌作为口服疫苗载体研究进展 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-41页 |
| ·试验材料 | 第25-28页 |
| ·病料、菌株 | 第25页 |
| ·抗体与检测制剂 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·试验动物 | 第25页 |
| ·培养基及溶液的配制 | 第25-26页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)主要试剂 | 第26页 |
| ·间接ELISA检测抗体主要试剂 | 第26-27页 |
| ·免疫印迹(Western-blot)主要试剂 | 第27页 |
| ·主要实验仪器与设备 | 第27页 |
| ·引物合成 | 第27-28页 |
| ·试验方法 | 第28-41页 |
| ·病料的处理及动物感染 | 第28-29页 |
| ·VP60基因的克隆及序列测定 | 第29-31页 |
| ·目的基因VP60的亚克隆与鉴定 | 第31-35页 |
| ·重组干酪乳杆菌的构建 | 第35-38页 |
| ·重组干酪乳杆菌的诱导及表达蛋白的鉴定 | 第38-39页 |
| ·口服重组干酪乳杆菌免疫学指标的测定 | 第39-40页 |
| ·免疫兔攻RHDV保护性试验 | 第40-41页 |
| 3 实验结果 | 第41-55页 |
| ·RHDV的鉴定 | 第41页 |
| ·敏感兔接种试验 | 第41页 |
| ·HA和HI试验 | 第41页 |
| ·病毒VP60基因的RT-PCR | 第41页 |
| ·VP60基因的序列测定及生物信息学分析 | 第41-42页 |
| ·重组质粒pMD18-T-VP60的鉴定结果 | 第42页 |
| ·重组乳酸菌表达载体的鉴定 | 第42-46页 |
| ·表面表达型重组载体pPG-1-VP60的鉴定结果 | 第42-46页 |
| ·分泌表达型重组载体pPG-2-VP60的鉴定结果 | 第46页 |
| ·重组干酪乳杆菌的诱导及表达蛋白的鉴定 | 第46-50页 |
| ·细胞表面表达型重组干酪乳杆菌的诱导表达鉴定结果 | 第46-48页 |
| ·分泌表达型重组干酪乳杆菌的诱导表达鉴定结果 | 第48-50页 |
| ·重组乳酸菌口服免疫兔免疫学指标的测定 | 第50-55页 |
| ·ELISA方法检测免疫兔血清中抗RHDV-VP60特异性抗体IgG测定 | 第50-51页 |
| ·应用血凝抑制试验检测免疫兔的血清效价 | 第51页 |
| ·家兔粪便中抗RHDV-VP60特异性sIgA检测结果 | 第51页 |
| ·家兔鼻洗液中抗RHDV-VP60特异性sIgA检测结果 | 第51页 |
| ·免疫兔攻RHDV保护性试验 | 第51-55页 |
| 4 讨论 | 第55-60页 |
| ·兔病毒性出血症病毒09-SD株衣壳蛋白的遗传变异分析 | 第55-56页 |
| ·口服重组干酪乳杆菌诱导的体液免疫应答 | 第56-57页 |
| ·口服重组干酪乳杆菌诱导的免疫保护作用 | 第57-58页 |
| ·表面表达和分泌表达诱导免疫应答的差异分析 | 第58-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 附录 | 第69-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第70页 |
