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M.suis ENO1和MSG1蛋白分析及单味中药对其mRNA表达的影响

摘要第7-8页
前言第8-15页
    1 M.suis特性第8-9页
        1.1 分类第8页
        1.2 形态结构第8-9页
        1.3 理化特性第9页
        1.4 培养特性第9页
    2 猪嗜血支原体病的危害第9-10页
        2.1 流行范围第9-10页
        2.2 危害程度第10页
    3 致病机理第10-13页
        3.1 损伤红细胞第10-11页
        3.2 组织器官损伤第11页
        3.3 能量损耗第11页
        3.4 对免疫系统的影响第11-12页
        3.5 黏附蛋白研究进展第12-13页
    4 研究的目的与意义第13-15页
试验材料与方法第15-29页
    1 试验材料第15-19页
        1.1 血液来源第15页
        1.2 主要设备第15-16页
        1.3 主要试剂及耗材第16-17页
        1.4 主要溶液的配制第17-19页
    2 方法第19-29页
        2.1 M.suis的初步鉴定第19页
        2.2 M. suis ENO1和MSG1完整CDS区测定及生物信息学分析第19-23页
            2.2.1 M. suis ENO1和MSG1引物设计及合成第19-20页
            2.2.2 M.suis总RNA的提取第20页
            2.2.3 RNA的检测第20页
            2.2.4 反转录及PCR扩增第20-21页
            2.2.5 PCR扩增产物纯化与回收第21-22页
            2.2.6 目的片段和pEASY-T1载体连接第22页
            2.2.7 重组质粒的转化第22页
            2.2.8 测序第22页
            2.2.9 M.suis ENO1和MSG 1基因生物信息学分析第22-23页
        2.3 中药作用对M.suis ENO1和MSG1表达特性的影响第23-28页
            2.3.1 M.suis ENO1和MSG1引物设计第23页
            2.3.2 血液初步处理第23-24页
            2.3.3 中药培养基的制备第24-25页
            2.3.4 不同浓度药物下M. suis的体外培养第25页
            2.3.5 培养物总RNA的提取第25页
            2.3.6 反转录及PCR扩增第25-26页
            2.3.7 ENO1和MSG1 mRNA qRT-PCR检测第26-27页
            2.3.8 ENO1和MSG1蛋白Western Blot检测第27-28页
        2.4 数据处理第28-29页
结果第29-47页
    1 M.suis鉴定结果第29页
    2 RT-PCR扩增ENO1和MSG1完整CDS区第29-32页
        2.1 菌液PCR产物电泳结果第29-30页
        2.2 测序结果第30-32页
    3 M.suis ENO1和MSG1蛋白生物信息学分析第32-41页
        3.1 ENO1和MSG1蛋白的理化性质预测第32-35页
        3.2 ENO1和MSG1蛋白的疏水性预测第35-36页
        3.3 ENO1和MSG1蛋白的信号肽预测第36-37页
        3.4 ENO1和MSG1蛋白的二级结构分析第37-38页
        3.5 ENO1和MSG1蛋白的跨膜结构预测第38-39页
        3.6 ENO1和MSG1蛋白糖基化位点预测第39页
        3.7 ENO1和MSG1蛋白磷酸化位点预测第39-40页
        3.8 ENO1和MSG1进化分析第40-41页
    4 不同药物浓度作用M.suis ENO1和MSG1 mRNA表达检测第41-45页
        4.1 M. suis ENO1和MSG1 mRNA标准曲线建立第41-43页
        4.2 不同药物浓度作用M.suis ENO1和MSG1 mRNA表达第43-45页
    5 不同药物作用M.suis ENO1和MSG1蛋白表达水平检测第45-47页
讨论第47-50页
    1 培养时间的选择第47页
    2 中药的选择第47-48页
    3 中药对M.suis MSG1和ENO1 mRNA作用的分析第48页
    4 中药对ENO1和MSG1蛋白作用的分析第48-49页
    5 其他可能作用机制分析第49-50页
结论第50-51页
参考文献第51-57页
Abstract第57-58页
致谢第59页

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