摘要 | 第7-8页 |
前言 | 第8-15页 |
1 M.suis特性 | 第8-9页 |
1.1 分类 | 第8页 |
1.2 形态结构 | 第8-9页 |
1.3 理化特性 | 第9页 |
1.4 培养特性 | 第9页 |
2 猪嗜血支原体病的危害 | 第9-10页 |
2.1 流行范围 | 第9-10页 |
2.2 危害程度 | 第10页 |
3 致病机理 | 第10-13页 |
3.1 损伤红细胞 | 第10-11页 |
3.2 组织器官损伤 | 第11页 |
3.3 能量损耗 | 第11页 |
3.4 对免疫系统的影响 | 第11-12页 |
3.5 黏附蛋白研究进展 | 第12-13页 |
4 研究的目的与意义 | 第13-15页 |
试验材料与方法 | 第15-29页 |
1 试验材料 | 第15-19页 |
1.1 血液来源 | 第15页 |
1.2 主要设备 | 第15-16页 |
1.3 主要试剂及耗材 | 第16-17页 |
1.4 主要溶液的配制 | 第17-19页 |
2 方法 | 第19-29页 |
2.1 M.suis的初步鉴定 | 第19页 |
2.2 M. suis ENO1和MSG1完整CDS区测定及生物信息学分析 | 第19-23页 |
2.2.1 M. suis ENO1和MSG1引物设计及合成 | 第19-20页 |
2.2.2 M.suis总RNA的提取 | 第20页 |
2.2.3 RNA的检测 | 第20页 |
2.2.4 反转录及PCR扩增 | 第20-21页 |
2.2.5 PCR扩增产物纯化与回收 | 第21-22页 |
2.2.6 目的片段和pEASY-T1载体连接 | 第22页 |
2.2.7 重组质粒的转化 | 第22页 |
2.2.8 测序 | 第22页 |
2.2.9 M.suis ENO1和MSG 1基因生物信息学分析 | 第22-23页 |
2.3 中药作用对M.suis ENO1和MSG1表达特性的影响 | 第23-28页 |
2.3.1 M.suis ENO1和MSG1引物设计 | 第23页 |
2.3.2 血液初步处理 | 第23-24页 |
2.3.3 中药培养基的制备 | 第24-25页 |
2.3.4 不同浓度药物下M. suis的体外培养 | 第25页 |
2.3.5 培养物总RNA的提取 | 第25页 |
2.3.6 反转录及PCR扩增 | 第25-26页 |
2.3.7 ENO1和MSG1 mRNA qRT-PCR检测 | 第26-27页 |
2.3.8 ENO1和MSG1蛋白Western Blot检测 | 第27-28页 |
2.4 数据处理 | 第28-29页 |
结果 | 第29-47页 |
1 M.suis鉴定结果 | 第29页 |
2 RT-PCR扩增ENO1和MSG1完整CDS区 | 第29-32页 |
2.1 菌液PCR产物电泳结果 | 第29-30页 |
2.2 测序结果 | 第30-32页 |
3 M.suis ENO1和MSG1蛋白生物信息学分析 | 第32-41页 |
3.1 ENO1和MSG1蛋白的理化性质预测 | 第32-35页 |
3.2 ENO1和MSG1蛋白的疏水性预测 | 第35-36页 |
3.3 ENO1和MSG1蛋白的信号肽预测 | 第36-37页 |
3.4 ENO1和MSG1蛋白的二级结构分析 | 第37-38页 |
3.5 ENO1和MSG1蛋白的跨膜结构预测 | 第38-39页 |
3.6 ENO1和MSG1蛋白糖基化位点预测 | 第39页 |
3.7 ENO1和MSG1蛋白磷酸化位点预测 | 第39-40页 |
3.8 ENO1和MSG1进化分析 | 第40-41页 |
4 不同药物浓度作用M.suis ENO1和MSG1 mRNA表达检测 | 第41-45页 |
4.1 M. suis ENO1和MSG1 mRNA标准曲线建立 | 第41-43页 |
4.2 不同药物浓度作用M.suis ENO1和MSG1 mRNA表达 | 第43-45页 |
5 不同药物作用M.suis ENO1和MSG1蛋白表达水平检测 | 第45-47页 |
讨论 | 第47-50页 |
1 培养时间的选择 | 第47页 |
2 中药的选择 | 第47-48页 |
3 中药对M.suis MSG1和ENO1 mRNA作用的分析 | 第48页 |
4 中药对ENO1和MSG1蛋白作用的分析 | 第48-49页 |
5 其他可能作用机制分析 | 第49-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
Abstract | 第57-58页 |
致谢 | 第59页 |