| 摘要 | 第10-11页 |
| ABSTRACT | 第11页 |
| 第一章 前言 | 第12-31页 |
| 1.1 白介素11(Inteleukin 11,IL11) | 第12-20页 |
| 1.1.1 白介素11的发现及分子结构 | 第12-13页 |
| 1.1.2 白介素11的功能 | 第13-14页 |
| 1.1.3 白介素11信号通路 | 第14-16页 |
| 1.1.4 白介素11的生物学功能 | 第16-19页 |
| 1.1.4.1 白介素11在免疫中的作用 | 第16-18页 |
| 1.1.4.2 IL11肿瘤发生中的作用 | 第18页 |
| 1.1.4.3 JAK-STAT3信号通路与肿瘤发生 | 第18-19页 |
| 1.1.4.4 PI3K-AKT-mTORC1信号通路与肿瘤发生 | 第19页 |
| 1.1.5 IL11在临床上的应用 | 第19-20页 |
| 1.2 肿瘤耐药性 | 第20-29页 |
| 1.2.1 药物的运输和代谢 | 第21-24页 |
| 1.2.1.1 药物外排 | 第21-22页 |
| 1.2.1.2 药物的激活和失活 | 第22-23页 |
| 1.2.1.3 药物靶标的改变 | 第23页 |
| 1.2.1.4 DNA损伤的修复 | 第23-24页 |
| 1.2.2 下游耐药机制 | 第24-26页 |
| 1.2.2.1 细胞凋亡失调 | 第25-26页 |
| 1.2.2.2 自噬 | 第26页 |
| 1.2.3 耐药促进的适应性应答 | 第26-28页 |
| 1.2.3.1 激活促生存信号 | 第26-27页 |
| 1.2.3.2 致癌旁路和途径冗余 | 第27-28页 |
| 1.2.3.3 上皮间质转化(EMT) | 第28页 |
| 1.2.4 肿瘤微环境 | 第28-29页 |
| 1.2.4.1 整合素(Integrins) | 第28-29页 |
| 1.2.4.2 细胞因子和生长因子 | 第29页 |
| 1.3 立题背景 | 第29-31页 |
| 第二章 材料和方法 | 第31-50页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-34页 |
| 2.1.1 主要试剂和药品 | 第31-32页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第32-33页 |
| 2.1.3 菌株、质粒、细胞和小鼠 | 第33-34页 |
| 2.1.3.1 菌株 | 第33页 |
| 2.1.3.2 质粒 | 第33-34页 |
| 2.1.3.3 细胞 | 第34页 |
| 2.1.3.4 小鼠 | 第34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-49页 |
| 2.2.1 分子克隆及相关实验方法 | 第34-39页 |
| 2.2.1.1 大肠杆菌感受态的制备 | 第34-35页 |
| 2.2.1.2 质粒构建 | 第35-37页 |
| 2.2.1.3 质粒提取 | 第37-39页 |
| 2.2.2 RNA相关实验方法 | 第39-40页 |
| 2.2.2.1 RNA的提取 | 第39页 |
| 2.2.2.2 RNA的逆转录(TOYOBO试剂盒) | 第39-40页 |
| 2.2.2.3 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第40页 |
| 2.2.3 蛋白免疫印迹(Western Blot)相关实验 | 第40-43页 |
| 2.2.3.0 蛋白的提取 | 第40-41页 |
| 2.2.3.1 BCA法测定蛋白浓度 | 第41页 |
| 2.2.3.2 SDS-PAGE电泳和免疫印迹杂交 | 第41-43页 |
| 2.2.4 细胞培养相关实验 | 第43-44页 |
| 2.2.4.1 细胞的培养和传代 | 第43页 |
| 2.2.4.2 细胞的冻存 | 第43页 |
| 2.2.4.3 细胞的复苏 | 第43页 |
| 2.2.4.4 细胞转染及稳定细胞株的建立 | 第43-44页 |
| 2.2.5 MTT Assay | 第44-45页 |
| 2.2.5.1 药物对细胞毒性的检测 | 第44-45页 |
| 2.2.5.2 细胞生长实验 | 第45页 |
| 2.2.6 细胞死亡的检测 | 第45-46页 |
| 2.2.7 克隆形成实验 | 第46页 |
| 2.2.8 细胞侵袭实验(Transwell法) | 第46页 |
| 2.2.9 Elisa检测细胞因子 | 第46-47页 |
| 2.2.10 小鼠肺转移模型 | 第47-48页 |
| 2.2.11 小鼠成瘤模型 | 第48页 |
| 2.2.12 石蜡切片与H&E染色 | 第48-49页 |
| 2.3 数据统计 | 第49-50页 |
| 第三章 结果与分析 | 第50-67页 |
| 3.1 IL11在肿瘤样本中普遍高表达 | 第50-51页 |
| 3.2 IL11对结直肠癌和肝癌细胞表型的影响 | 第51-58页 |
| 3.2.1 IL11稳定过表达结直肠癌和肝癌细胞株的建立 | 第51-53页 |
| 3.2.2 稳定过表达IL11对细胞生长的影响 | 第53-54页 |
| 3.2.3 稳定过表达IL11可以促进CT26和Hep1-6的克隆形成能力 | 第54-55页 |
| 3.2.4 过表达IL11促进CT26细胞移植瘤的大小 | 第55-56页 |
| 3.2.5 稳定过表达IL11对CT26细胞伤口愈合能力的影响 | 第56-57页 |
| 3.2.6 稳定过表达IL11对促进CT26细胞的侵袭能力 | 第57页 |
| 3.2.7 过表达IL11增强CT26细胞的肺转移能力 | 第57-58页 |
| 3.3 稳定过表达IL11对CT26和Hep1-6细胞耐药性的影响 | 第58-67页 |
| 3.3.1 药物毒性对过表达IL11细胞系存活率的影响 | 第58-61页 |
| 3.3.2 过表达IL11降低Tamoxifen对细胞的克隆形成能力的抑制 | 第61-62页 |
| 3.3.3 过表达IL11可以降低Tamoxifen所诱导的细胞死亡 | 第62-63页 |
| 3.3.4 Tamoxifen处理后对IL11相关信号通路的影响 | 第63-64页 |
| 3.3.5 重组小鼠IL11 (rIL11)处理增强CT26细胞对Tamoxifen的耐药性 | 第64-65页 |
| 3.3.6 过表达IL6不会影响细胞对Tamoxifen的敏感性 | 第65-67页 |
| 第四章 讨论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
