中文摘要 | 第10-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
第一章 前言 | 第14-30页 |
1.1 结肠癌简介 | 第14-16页 |
1.1.1 结肠癌的发展现状 | 第14页 |
1.1.2 结肠癌的诱因 | 第14-15页 |
1.1.3 结肠癌的发病机制 | 第15-16页 |
1.2 Wnt/β-catenin信号通路 | 第16-18页 |
1.2.1 Wnt基因 | 第16页 |
1.2.2 β-catenin简述 | 第16-17页 |
1.2.3 Wnt/β-catenin信号通路对结直肠癌发生的影响 | 第17-18页 |
1.3 核受体RXRα与结肠癌 | 第18-21页 |
1.3.1 核受体 | 第18-19页 |
1.3.2 RXRα与结肠癌的关系 | 第19-21页 |
1.3.3 靶向RXRα的抗肿瘤药物的研究现状 | 第21页 |
1.4 黄连素 | 第21-27页 |
1.4.1 黄连素简介 | 第21-22页 |
1.4.2 黄连素的抗癌机制 | 第22-26页 |
1.4.3 黄连素的改造现状 | 第26-27页 |
1.5 本课题研究的内容、目标及意义 | 第27-30页 |
第二章 材料与方法 | 第30-55页 |
2.1 实验材料和仪器 | 第30-37页 |
2.1.1 实验细胞系 | 第30页 |
2.1.2 工具酶和抗体 | 第30页 |
2.1.3 主要化学试剂和耗材 | 第30-32页 |
2.1.4 细胞培养试剂和双抗 | 第32页 |
2.1.5 仪器设备 | 第32-33页 |
2.1.6 主要溶液配方 | 第33-37页 |
2.2 实验方法 | 第37-55页 |
2.2.1 细胞培养 | 第37-38页 |
2.2.2 药物处理 | 第38页 |
2.2.3 质粒构建及检测 | 第38-42页 |
2.2.4 细胞转染 | 第42-43页 |
2.2.5 双荧光素酶报告基因测定实验 | 第43-44页 |
2.2.6 MTT比色法测定细胞生长状况 | 第44-45页 |
2.2.7 细胞全蛋白提取及Western Blot检测 | 第45-48页 |
2.2.8 总RNA的提取 | 第48页 |
2.2.9 双链cDNA合成——反转录反应 | 第48-49页 |
2.2.10 实时定量PCR | 第49-51页 |
2.2.11 稳转细胞系的建立 | 第51页 |
2.2.12 EdU细胞增殖检测实验 | 第51-53页 |
2.2.13 HPLC分析结合实验 | 第53页 |
2.2.14 数据处理 | 第53-55页 |
第三章 实验结果 | 第55-83页 |
3.1 黄连素通过RXRα抑制人结肠癌增殖的初步结构学研究结果 | 第55-65页 |
3.1.1 黄连素与RXRα-LBD结合方式的点突变分析 | 第55-61页 |
3.1.2 黄连素通过依赖RXRα影响结肠癌细胞增殖及Wnt通路活性 | 第61-65页 |
3.2 黄连素及其改造衍生物的鉴定 | 第65-82页 |
3.2.1 黄连素衍生物的改造 | 第65-69页 |
3.2.2 第一批黄连素衍生物的鉴定 | 第69-71页 |
3.2.3 第二批黄连素衍生物的鉴定 | 第71-73页 |
3.2.4 第三批黄连素衍生物的鉴定 | 第73-75页 |
3.2.5 第四批黄连素衍生物的鉴定 | 第75-77页 |
3.2.6 第五批黄连素衍生物的鉴定 | 第77-78页 |
3.2.7 黄连素及高效衍生物的效果比较 | 第78-81页 |
3.2.8 黄连素衍生物的初步构效分析 | 第81-82页 |
3.3 结论 | 第82-83页 |
第四章 讨论 | 第83-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-94页 |