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人工肽适体抑制香蕉枯萎病尖孢镰刀菌的研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 引言第10-17页
    1.1 香蕉枯萎病研究进展第10-13页
        1.1.1 香蕉产业现状第10页
        1.1.2 香蕉枯萎病的危害第10-11页
        1.1.3 尖孢镰刀菌概述第11页
        1.1.4 尖孢镰刀菌致病机理研究第11-12页
        1.1.5 尖孢镰刀菌现有防治手段第12-13页
    1.2 人工肽适体第13-14页
        1.2.1 人工肽适体概述第13-14页
        1.2.2 人工肽适体的应用第14页
    1.3 研究内容、目的及意义第14-16页
    1.4 技术路线第16-17页
2 材料与方法第17-27页
    2.1 实验材料第17-20页
        2.1.1 供试菌株和病原菌第17页
        2.1.2 质粒第17页
        2.1.3 引物第17页
        2.1.4 生物操作常用酶第17页
        2.1.5 常用试剂盒第17-18页
        2.1.6 常用药品第18页
        2.1.7 常用试剂配方第18-19页
        2.1.8 培养基配方第19页
        2.1.9 抗生素及其他试剂第19-20页
        2.1.10 仪器及设备第20页
    2.2 实验方法第20-27页
        2.2.1 尖孢镰刀菌孢子悬液的制备第20页
        2.2.2 肽适体文库筛选第20-22页
        2.2.3 功能性肽适体的原核表达与抑菌能力评估第22-24页
        2.2.4 功能性肽适体抑制尖孢镰刀菌的作用机理研究第24-26页
        2.2.5 互作机理的生物信息学分析第26-27页
3 结果与分析第27-48页
    3.1 肽适体文库筛选第27-29页
        3.1.1 肽适体文库的转化与PCR验证第27-28页
        3.1.2 抑菌实验筛选肽适体结果第28页
        3.1.3 肽适体序列的测定及分析第28-29页
    3.2 肽适体的原核表达载体构建第29-33页
        3.2.1 原核表达载体构建第29-30页
        3.2.2 原核表达载体的序列比对分析第30-33页
    3.3 原核表达及纯化功能性肽适体第33-36页
        3.3.1 功能性肽适体的原核表达条件探索第33-35页
        3.3.2 功能性肽适体的纯化第35-36页
    3.4 原核表达功能性肽适体的抑菌能力评估第36-39页
        3.4.1 功能性肽适体的全蛋白提取液抑菌实验第36-37页
        3.4.2 纯化功能性肽适体抑菌实验第37-38页
        3.4.3 纯化功能性肽适体平板实验第38-39页
    3.5 功能性肽适体抑制尖孢镰刀菌的作用机理研究第39-43页
        3.5.1 PI染色检测病原孢子外膜受损状况第39-41页
        3.5.2 SNP-孢子全蛋白Pull-down实验筛选互作蛋白第41-43页
        3.5.3 Q Exactive质谱鉴定第43页
    3.6 功能性肽适体与尖孢镰刀菌互作机理的生物信息学分析第43-48页
        3.6.1 卷积神经网络方法预测互作蛋白第43-44页
        3.6.2 功能性肽适体及互作蛋白的三维建模第44页
        3.6.3 互作蛋白活性位点分析第44-45页
        3.6.4 分子对接第45-48页
4 讨论第48-53页
    4.1 肽适体文库筛选第48页
    4.2 功能性肽适体SNP-D4蛋白的原核表达第48-49页
    4.3 功能性肽适体的抑菌能力评估第49-50页
    4.4 功能性肽适体抑制尖孢镰刀菌的作用机理研究第50-51页
    4.5 功能性肽适体与尖孢镰刀菌互作机理的生物信息学分析第51-53页
5 结论第53-55页
参考文献第55-59页
附录第59-60页
基金项目资助第60-61页
攻读硕士期间主持项目与发表文章第61-62页
致谢第62页

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