致谢 | 第4-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
1 文献综述 | 第11-17页 |
1.1 兰科植物的研究进展 | 第11-13页 |
1.1.1 兰花育种方法 | 第11-12页 |
1.1.2 兰花转基因研究 | 第12-13页 |
1.2 蝴蝶兰的研究进展 | 第13-14页 |
1.3 植物开花时间调控的研究 | 第14-16页 |
1.3.1 控制植物开花时间的研究 | 第14页 |
1.3.2 植物开花调控途径 | 第14页 |
1.3.3 光周期途径 | 第14-15页 |
1.3.4 春化途径 | 第15页 |
1.3.5 自主途径 | 第15页 |
1.3.6 赤霉素途径 | 第15-16页 |
1.4 SOC1基因的研究进展 | 第16-17页 |
1.4.1 SOC1基因的结构功能 | 第16页 |
1.4.2 SOC1与其同源基因的功能 | 第16-17页 |
2 引言 | 第17页 |
3 材料和方法 | 第17-27页 |
3.1 蝴蝶兰花蕾总RNA的提取及c DNA第一链的合成 | 第17-18页 |
3.1.1 试验材料 | 第17页 |
3.1.2 仪器和试剂 | 第17-18页 |
3.1.3 试验中所用引物的序列 | 第18页 |
3.2 试验方法 | 第18-19页 |
3.2.1 蝴蝶兰总RNA提取 | 第18页 |
3.2.2 蝴蝶兰总RNA完整性检测 | 第18-19页 |
3.3 蝴蝶兰SOC1基因片段的克隆 | 第19-20页 |
3.3.1 菌株、质粒与引物 | 第19页 |
3.3.2 主要试剂 | 第19-20页 |
3.3.3 仪器与设备 | 第20页 |
3.4 试验方法 | 第20-22页 |
3.4.1 蝴蝶兰SOC1基因片段PCR扩增 | 第20页 |
3.4.2 目的片段琼脂糖凝胶回收 | 第20-21页 |
3.4.3 大肠杆菌的培养 | 第21页 |
3.4.4 CaCl_2法制备E.coli DH5α 感受态细胞 | 第21页 |
3.4.5 SOC1基因目的片段与p GEM-T Easy载体的连接 | 第21页 |
3.4.6 大肠杆菌的转化及检测 | 第21-22页 |
3.4.7 菌液阳性克隆鉴定 | 第22页 |
3.5 蝴蝶兰SOC1基因植物表达载体p CAMBIA1300-SOC1的构建 | 第22-25页 |
3.5.1 试验材料 | 第22-23页 |
3.5.2 试验方法 | 第23-25页 |
3.6 蝴蝶兰SOC1基因的时空表达分析 | 第25-27页 |
3.6.1 试验材料、试剂及仪器 | 第25页 |
3.6.2 试验方法 | 第25-27页 |
4 结果与分析 | 第27-42页 |
4.1 总RNA的提取与检测结果 | 第27-28页 |
4.1.1 总RNA的电泳结果分析 | 第27-28页 |
4.1.2 RNA浓度检测 | 第28页 |
4.2 蝴蝶兰SOC1基因片段的克隆 | 第28-29页 |
4.3 蝴蝶兰SOC1基因序列生物信息学分析 | 第29-33页 |
4.3.1 蝴蝶兰SOC1基因氨基酸同源性分析 | 第29-31页 |
4.3.2 蝴蝶兰SOC1基因蛋白质理化性质的预测与分析 | 第31-32页 |
4.3.3 蝴蝶兰SOC1基因蛋白质保守区的预测与分析 | 第32页 |
4.3.4 蝴蝶兰SOC1基因蛋白质二级结构预测与分析 | 第32-33页 |
4.4 SOC1基因植物表达载体pCAMBIA1300-SOC1的构建 | 第33-34页 |
4.5 蝴蝶兰SOC1基因的时空表达分析 | 第34-40页 |
4.5.1 RNA提取及完整性检测 | 第34-36页 |
4.5.2 实时荧光定量PCR结果分析 | 第36-40页 |
4.6 蝴蝶兰SOC1基因的遗传转化 | 第40页 |
4.7 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第40-42页 |
5 结论与讨论 | 第42-44页 |
5.1 蝴蝶兰SOC1基因的克隆 | 第42页 |
5.2 蝴蝶兰SOC1基因植物表达载体的构建 | 第42页 |
5.3 蝴蝶兰SOC1基因的时空表达分析 | 第42-43页 |
5.4 蝴蝶兰SOC1基因的遗传转化 | 第43页 |
5.5 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第43页 |
5.6 展望 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-50页 |
英文摘要 | 第50-51页 |