| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1.1 延伸因子研究进展 | 第11-12页 |
| 1.1.1 EF1a的生理作用 | 第11页 |
| 1.1.2 EF1a的其他功能 | 第11-12页 |
| 1.1.3 植物EF1a基因及其分子生物学研究 | 第12页 |
| 1.2 植物蛋白激酶的研究进展 | 第12-16页 |
| 1.2.1 蛋白激酶参与逆境响应 | 第12-13页 |
| 1.2.2 植物蛋白激酶的分类 | 第13-14页 |
| 1.2.3 分裂原激活蛋白激酶 | 第14-15页 |
| 1.2.4 钙依赖和钙调素不依赖的蛋白激酶 | 第15-16页 |
| 1.2.5 受体蛋白激酶 | 第16页 |
| 1.3 卫矛凝集素在植物逆境胁迫中的作用 | 第16-17页 |
| 1.4 植物抗旱生理 | 第17-18页 |
| 1.4.1 干旱对植物生理生化的影响主要表现为以下四个方面 | 第18页 |
| 1.5 植物耐盐生理 | 第18-19页 |
| 1.6 研究目的和意义与技术路线 | 第19-21页 |
| 1.6.1 研究目的和意义 | 第19页 |
| 1.6.2 技术路线 | 第19-21页 |
| 第二章 大豆延伸因子GMEF13的分离和功能鉴定 | 第21-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.1 大豆品种 | 第21页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第21页 |
| 2.2 实验试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.1 限制性内切酶和T4-DNA连接酶 | 第21页 |
| 2.2.2 核酸操作试剂盒 | 第21-22页 |
| 2.2.3 PCR试剂 | 第22页 |
| 2.2.4 生化试剂 | 第22页 |
| 2.3 试验方法 | 第22-32页 |
| 2.3.1 大豆材料的处理及RNA提取 | 第22-23页 |
| 2.3.2 GmEF13基因的扩增及纯化 | 第23-24页 |
| 2.3.3 目的片段的连接 | 第24页 |
| 2.3.4 重组质粒的转化 | 第24-25页 |
| 2.3.5 菌落PCR鉴定阳性克隆 | 第25页 |
| 2.3.6 质粒提取 | 第25-26页 |
| 2.3.7 启动子分析 | 第26页 |
| 2.3.8 亚细胞定位分析 | 第26-28页 |
| 2.3.9 蛋白质的互作验证 | 第28-30页 |
| 2.3.10 表达模式分析 | 第30-31页 |
| 2.3.11 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第31-32页 |
| 2.3.12 转基因拟南芥根长实验 | 第32页 |
| 2.4 结果和分析 | 第32-42页 |
| 2.4.1 大豆RNA的提取 | 第32-33页 |
| 2.4.2 GmEF13基因的克隆 | 第33页 |
| 2.4.3 GmEF13基因的序列分析 | 第33-35页 |
| 2.4.4 大豆GmEF13启动子分析 | 第35页 |
| 2.4.5 GmEF13的亚细胞定位 | 第35-36页 |
| 2.4.6 GmEF13和GmPK12的互作验证 | 第36-38页 |
| 2.4.7 GmEF13受干旱和高温胁迫诱导表达 | 第38-39页 |
| 2.4.8 GmEF13提高了拟南芥的抗旱性 | 第39-42页 |
| 2.5 讨论 | 第42页 |
| 2.6 结论 | 第42-44页 |
| 第三章 大豆GMAPK1基因的克隆与功能鉴定 | 第44-59页 |
| 3.1 实验材料和方法 | 第44-49页 |
| 3.1.1 植物材料及处理 | 第44页 |
| 3.1.2 RNA的提取和反转录 | 第44页 |
| 3.1.3 大豆GmAPK1的序列克隆 | 第44-45页 |
| 3.1.4 亚细胞定位分析 | 第45页 |
| 3.1.5 酵母验证蛋白互作 | 第45页 |
| 3.1.6 BiFC验证互作 | 第45-46页 |
| 3.1.7 Pull-down验证互作 | 第46-48页 |
| 3.1.8 GmAPK1的自磷酸化实验 | 第48页 |
| 3.1.9 Real-time PCR分析GmAPK1基因的表达模式 | 第48-49页 |
| 3.1.10 根长实验 | 第49页 |
| 3.2 实验结果和分析 | 第49-57页 |
| 3.2.1 GmAPK1基因的克隆 | 第49页 |
| 3.2.2 GmAPK1基因的序列分析 | 第49-51页 |
| 3.2.3 GmAPK1的亚细胞定位 | 第51-52页 |
| 3.2.4 GmAPK1和GmPK12的互作验证 | 第52-54页 |
| 3.2.5 GmAPK1具有丝氨酸,苏氨酸,酪氨酸自磷酸化活性 | 第54页 |
| 3.2.6 不同处理条件下GmAPK1的表达模式 | 第54-55页 |
| 3.2.7 GmAPK1受干旱和MeJA处理诱导表达 | 第55-57页 |
| 3.3 讨论 | 第57-58页 |
| 3.4 结论 | 第58-59页 |
| 第四章 小麦盐胁迫响应基因TASRP的克隆及功能鉴定 | 第59-68页 |
| 4.1 材料与方法 | 第59-61页 |
| 4.1.1 小麦盐处理转录组测序及TaSRP的克隆 | 第59页 |
| 4.1.2 植物材料及胁迫处理 | 第59-60页 |
| 4.1.3 同源性分析 | 第60页 |
| 4.1.4 RNA提取和实时定量分析 | 第60页 |
| 4.1.5 16318hGFP-TaSRP融合表达载体的构建与亚细胞定位分析 | 第60页 |
| 4.1.6 农杆菌侵染拟南芥 | 第60页 |
| 4.1.7 转基因植株的耐盐性鉴定 | 第60-61页 |
| 4.2 结果 | 第61-66页 |
| 4.2.1 TaSRP的克隆 | 第61-63页 |
| 4.2.2 TaSRP启动子的克隆与分析 | 第63页 |
| 4.2.3 TaSRP的表达模式分析 | 第63-64页 |
| 4.2.4 TaSRP的亚细胞定位分析 | 第64-65页 |
| 4.2.5 转TaSRP拟南芥植株的耐盐性鉴定 | 第65-66页 |
| 4.3 讨论 | 第66-67页 |
| 4.4 结论 | 第67-68页 |
| 第五章 全文结论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 缩略表 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简介 | 第77页 |
