| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-26页 |
| 1.1 miRNA | 第12-16页 |
| 1.1.1 miRNA概述 | 第12页 |
| 1.1.2 miRNA的生物合成与作用机制 | 第12-14页 |
| 1.1.3 miRNA与疾病 | 第14-16页 |
| 1.2 NF-κB及其信号通路 | 第16-19页 |
| 1.2.1 NF-κB概述 | 第16页 |
| 1.2.2 NF-κB激活途径 | 第16-18页 |
| 1.2.3 NF-κB与疾病 | 第18-19页 |
| 1.3 Treg/Th17与类风湿性关节炎(RA) | 第19-23页 |
| 1.3.1 Treg/Th17概述 | 第19-21页 |
| 1.3.2 类风湿性关节炎(RA) | 第21-22页 |
| 1.3.3 类风湿性关节炎与Treg/Th | 第22-23页 |
| 1.4 本研究的目的、内容、方法、实验设计以及意义 | 第23-26页 |
| 1.4.1 研究目的 | 第23页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第23-24页 |
| 1.4.3 研究方法 | 第24页 |
| 1.4.4 实验方案 | 第24-25页 |
| 1.4.5 研究意义 | 第25-26页 |
| 第二章 miR-34a对Foxp3的表达调控 | 第26-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-29页 |
| 2.1.1 主要试剂、仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.2 主要溶液的配制 | 第27-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-32页 |
| 2.2.1 小鼠淋巴瘤细胞(EL-4)的准备 | 第29页 |
| 2.2.2 EL-4细胞转染agomiR-34a和antagomiR-34a | 第29-30页 |
| 2.2.3 不同炎症微环境培养转染后的EL-4细胞 | 第30-31页 |
| 2.2.4 Immunoblot技术检测Foxp3的蛋白水平 | 第31-32页 |
| 2.3 实验结果 | 第32-34页 |
| 2.3.1 miR-34a的模拟物能够抑制Foxp3的蛋白水平 | 第32-33页 |
| 2.3.2 miR-34a的抑制物能够促进Foxp3蛋白的表达 | 第33-34页 |
| 2.4 小结 | 第34-35页 |
| 第三章 NF-κB参与miR-34a对Foxp3的表达调控 | 第35-43页 |
| 3.1 实验材料 | 第35-37页 |
| 3.1.1 主要试剂、仪器与相关引物 | 第35-37页 |
| 3.1.2 主要溶液的配制 | 第37页 |
| 3.1.3 实验动物 | 第37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-40页 |
| 3.2.1 Na?veT细胞的分选及诱导 | 第37-38页 |
| 3.2.2 NF-κB抑制剂对miR-34a的影响以及对Foxp3的调节作用 | 第38页 |
| 3.2.3 qPCR检测miR-34a的mRNA水平 | 第38-40页 |
| 3.2.4 Immunoblot技术检测Foxp3的蛋白水平 | 第40页 |
| 3.2.5 统计学处理 | 第40页 |
| 3.3 实验结果 | 第40-42页 |
| 3.3.1 NF-κB参与CD4~+T中IL-6/TNF-α对miR-34a的表达调控 | 第40-41页 |
| 3.3.2 NF-κB抑制剂能够逆转CD4~+T中IL-6/TNF-α对Foxp3的抑制作用 | 第41-42页 |
| 3.4 小结 | 第42-43页 |
| 第四章 miR-34a对CIA模型鼠中Treg/Th17平衡的影响 | 第43-61页 |
| 4.1 实验材料 | 第43-45页 |
| 4.1.1 主要试剂、仪器 | 第43-44页 |
| 4.1.2 主要溶液的配制 | 第44-45页 |
| 4.1.3 实验动物 | 第45页 |
| 4.2 实验方法 | 第45-50页 |
| 4.2.1 类风湿性关节炎小鼠模型(CIA)的建立 | 第45页 |
| 4.2.2 小鼠模型的分组及处理 | 第45-46页 |
| 4.2.3 小鼠模型的观察指标及肿胀评分标准 | 第46页 |
| 4.2.4 影像学检查 | 第46页 |
| 4.2.5 模型鼠脾脏以及腘窝、腹股沟、腋窝淋巴结的分离 | 第46-47页 |
| 4.2.6 脾脏细胞和淋巴结细胞的CD4~+T细胞的分选 | 第47-48页 |
| 4.2.7 Treg细胞染色 | 第48页 |
| 4.2.8 Th17细胞胞内因子染色 | 第48-49页 |
| 4.2.9 HE染色观察小鼠关节病理损伤情况 | 第49-50页 |
| 4.2.10 统计学处理 | 第50页 |
| 4.3 实验结果 | 第50-60页 |
| 4.3.1 miR-34a过表达能够加重CIA模型鼠疾病的严重程度, | 第50-55页 |
| 4.3.2 小鼠脾脏和淋巴结的Treg/Th17占CD4~+T细胞的比例 | 第55-58页 |
| 4.3.3 小鼠关节病理学检查 | 第58-59页 |
| 4.3.4 小鼠关节影像学检查 | 第59-60页 |
| 4.4 小结 | 第60-61页 |
| 第五章 miR-34a转基因鼠对胶原诱导性关节炎易感性研究 | 第61-72页 |
| 5.1 实验材料 | 第61页 |
| 5.1.1 主要试剂、仪器 | 第61页 |
| 5.1.2 主要溶液的配制 | 第61页 |
| 5.1.3 实验动物 | 第61页 |
| 5.2 实验方法 | 第61-63页 |
| 5.2.1 miR-34a转基因小鼠CIA模型的建立及分组 | 第61-62页 |
| 5.2.2 小鼠模型的观察指标及肿胀评分 | 第62页 |
| 5.2.3 影像学检查 | 第62页 |
| 5.2.4 模型鼠腘窝,腹股沟、腋窝淋巴结以及脾脏的分离 | 第62页 |
| 5.2.5 Treg细胞染色 | 第62页 |
| 5.2.7 Th17细胞胞内因子染色 | 第62页 |
| 5.2.8 HE染色检测小鼠关节病理损伤情况 | 第62-63页 |
| 5.2.9 统计学处理 | 第63页 |
| 5.3 实验结果 | 第63-71页 |
| 5.3.1 miR-34a转基因鼠的CIA病情加重 | 第63-67页 |
| 5.3.2 小鼠脾脏和淋巴结的Treg/Th17细胞占全部细胞的比例 | 第67-70页 |
| 5.3.3 小鼠关节病理学检查 | 第70-71页 |
| 5.3.4 小鼠关节影像学检查 | 第71页 |
| 5.4 小结 | 第71-72页 |
| 第六章 ：主要结论及展望 | 第72-74页 |
| 6.1 本课题的主要结论 | 第72页 |
| 6.2 讨论及展望 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-84页 |
| 综述：Treg/Th17细胞的平衡与类风湿性关节炎的研究进展 | 第84-91页 |
| 综述参考文献 | 第88-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章及参加的会议 | 第92页 |
