| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 1 绪论 | 第12-21页 |
| 1.1 氯代有机物(COCs)的来源与危害 | 第12-13页 |
| 1.2 COCs脱氯技术 | 第13-19页 |
| 1.2.1 催化加氢脱氯 | 第13-14页 |
| 1.2.2 电化学脱氯 | 第14-15页 |
| 1.2.3 生物脱氯 | 第15-16页 |
| 1.2.4 电生物脱氯 | 第16-19页 |
| 1.3 研究目的和意义 | 第19页 |
| 1.4 研究内容 | 第19-20页 |
| 1.5 研究路线 | 第20-21页 |
| 2 DCM脱氯酶基因的克隆与重组菌的构建 | 第21-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 实验药品 | 第21-22页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第22页 |
| 2.1.3 菌种、质粒及培养基 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 M.rhodesianumH13的培养与全基因组的提取 | 第23-24页 |
| 2.2.2 PCR扩增目的片段并回收扩增产物 | 第24-26页 |
| 2.2.3 重组质粒的构建与转化 | 第26-27页 |
| 2.2.4 重组质粒的鉴定 | 第27-29页 |
| 2.2.5 重组质粒转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞 | 第29页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第29-35页 |
| 2.3.1 提取的细菌基因组浓度 | 第29-30页 |
| 2.3.2 PCR扩增dcm基因 | 第30-31页 |
| 2.3.3 重组质粒的构建与鉴定 | 第31-32页 |
| 2.3.4 目的基因的鉴定 | 第32-35页 |
| 2.4 小结 | 第35-36页 |
| 3 DCM脱氯酶生物信息学分析 | 第36-47页 |
| 3.1 材料与方法 | 第36-38页 |
| 3.1.1 分析方法 | 第36-37页 |
| 3.1.2 序列来源 | 第37-38页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第38-45页 |
| 3.2.1 DCM脱氯酶理化性质分析与亲疏水性预测 | 第38页 |
| 3.2.2 DCM脱氯酶信号肽、跨膜结构和亚细胞定位的预测 | 第38-40页 |
| 3.2.3 DCM脱氯酶二级结构、磷酸化位点和功能域分析 | 第40-42页 |
| 3.2.4 DCM脱氯酶三级结构预测与催化通道分析 | 第42-43页 |
| 3.2.5 遗传进化树构建与序列同源性分析 | 第43-45页 |
| 3.3 小结 | 第45-47页 |
| 4 DCM脱氯酶基因在E.coilBL21(DE3)中表达与纯化 | 第47-57页 |
| 4.1 实验材料 | 第47-49页 |
| 4.1.1 实验药品 | 第47-48页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第48页 |
| 4.1.3 菌种及试剂的配制 | 第48-49页 |
| 4.2 实验方法 | 第49-52页 |
| 4.2.1 重组菌的培养与诱导表达 | 第49-50页 |
| 4.2.2 粗酶液的提取 | 第50页 |
| 4.2.3 Ni柱亲和层析纯化 | 第50页 |
| 4.2.4 超滤离心纯化 | 第50页 |
| 4.2.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测 | 第50-51页 |
| 4.2.6 蛋白质浓度的测定 | 第51-52页 |
| 4.2.7 酶活力的检测 | 第52页 |
| 4.3 实验结果 | 第52-56页 |
| 4.3.1 粗酶液的表达检测 | 第52-53页 |
| 4.3.2 粗酶液的纯化 | 第53-54页 |
| 4.3.3 酶活力检测 | 第54-56页 |
| 4.4 小结 | 第56-57页 |
| 5 脱氯酶负载碳纳米管修饰电极还原脱氯DCM的降解 | 第57-67页 |
| 5.1 实验材料 | 第57-58页 |
| 5.1.1 实验药品 | 第57-58页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第58页 |
| 5.2 实验方法 | 第58-62页 |
| 5.2.1 溶液的配制 | 第58-59页 |
| 5.2.2 碳纳米管的酸化与表征 | 第59页 |
| 5.2.3 修饰电极的制备 | 第59-60页 |
| 5.2.4 电解装置 | 第60页 |
| 5.2.5 分析方法 | 第60-62页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第62-65页 |
| 5.3.1 酸化后碳纳米管的表征 | 第62-63页 |
| 5.3.2 修饰电极电生物还原脱氯反应产物定量分析 | 第63-65页 |
| 5.3.3 降解途径探讨 | 第65页 |
| 5.4 结论 | 第65-67页 |
| 6 结论与展望 | 第67-69页 |
| 6.1 结论 | 第67页 |
| 6.2 创新点 | 第67-68页 |
| 6.3 展望 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 攻读硕士学位期间取得的主要成果 | 第78页 |
