| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-24页 |
| ·昆虫的先天性免疫 | 第13-15页 |
| ·细胞免疫 | 第13-14页 |
| ·体液免疫 | 第14-15页 |
| ·黑化反应 | 第14页 |
| ·抗菌肽 | 第14-15页 |
| ·模式识别受体 | 第15页 |
| ·肽聚糖识别蛋白的研究进展 | 第15-23页 |
| ·肽聚糖的结构和类型 | 第16-17页 |
| ·肽聚糖识别蛋白的发现 | 第17页 |
| ·肽聚糖识别蛋白的结构 | 第17-19页 |
| ·昆虫和哺乳动物PGRP的表达分布 | 第19-20页 |
| ·PGRP的功能 | 第20-23页 |
| ·本实验的研究意义以及立题依据 | 第23-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-38页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·实验昆虫 | 第24页 |
| ·实验菌种 | 第24页 |
| ·实验仪器与设备 | 第24-25页 |
| ·酶及试剂 | 第25-26页 |
| ·常规试剂和培养基的配制 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-38页 |
| ·棉铃虫各组织的采集 | 第26-27页 |
| ·棉铃虫各组织RNA的提取 | 第27页 |
| ·棉铃虫PGRP-C基因的克隆 | 第27-29页 |
| ·cDNA第一链的合成以及PCR扩增 | 第27页 |
| ·PCR产物的回收 | 第27-28页 |
| ·回收片段的连接 | 第28-29页 |
| ·连接产物进行转化 | 第29页 |
| ·阳性检测 | 第29页 |
| ·序列分析和系统进化树的构建 | 第29-30页 |
| ·组织特异性表达分析 | 第30-31页 |
| ·荧光定量PCR检测细菌或激素刺激后HaPGRP-C的表达量的变化 | 第31-34页 |
| ·细菌的活化和培养 | 第31页 |
| ·细菌的计数 | 第31页 |
| ·棉铃虫的注射 | 第31-32页 |
| ·对不同时间点的血细胞和脂肪体RNA的提取 | 第32页 |
| ·单链cDNA的合成 | 第32-33页 |
| ·荧光定量PCR | 第33-34页 |
| ·实验数据的分析与处理 | 第34页 |
| ·原核表达 | 第34-37页 |
| ·HaPGRP-C开放读码框的扩增 | 第34页 |
| ·重组质粒PET32a(+)-PGRP-C的构建 | 第34-36页 |
| ·重组质粒PET32a(+)-PGRP-C的试表达 | 第36-37页 |
| ·重组质粒PET32a(+)-PGRP-C的大量表达 | 第37页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第37页 |
| ·重组蛋白和细菌的结合活性 | 第37-38页 |
| 第三章 结果与分析 | 第38-49页 |
| ·棉铃虫肽聚糖识别蛋白基因HaPGRP-C全长的克隆 | 第38页 |
| ·棉铃虫HaPGRP-C基因的序列分析和系统进化树的构建 | 第38-42页 |
| ·棉铃虫HaPGRP-C基因的序列分析 | 第38-40页 |
| ·HaPGRP-C基因的同源性分析以及系统进化树的构建 | 第40-42页 |
| ·HaPGRP-C的组织特异性表达 | 第42页 |
| ·荧光定量PCR分析HaPGRP-C的基因表达量 | 第42-45页 |
| ·注射大肠杆菌和金黄色葡萄球菌对HaPGRP-C在脂肪体中表达量的影响 | 第43页 |
| ·注射大肠杆菌和金黄色葡萄球菌对HaPGRP-C在血淋巴中表达量的影响 | 第43-44页 |
| ·注射不同激素对HaPGRP-C在脂肪体中表达量的影响 | 第44-45页 |
| ·注射不同激素对HaPGRP-C在血淋巴中表达量的影响 | 第45页 |
| ·HaPGRP-C基因的重组表达和蛋白纯化 | 第45-47页 |
| ·HaPGRP-C重组质粒的构建 | 第45-46页 |
| ·HaPGRP-C重组质粒的表达 | 第46-47页 |
| ·HaPGRP-C重组蛋白的纯化 | 第47页 |
| ·重组蛋白与细菌的结合活性 | 第47-49页 |
| 第四章 讨论 | 第49-53页 |
| ·HaPGRP-C的序列分析以及组织特异性表达 | 第49页 |
| ·微生物免疫刺激对HaPGRP-C表达量的影响 | 第49-50页 |
| ·注射不同激素后对HaPGRP-C表达量的影响 | 第50-51页 |
| ·HaPGRP-C的原核表达 | 第51页 |
| ·重组蛋白和细菌的凝集反应 | 第51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| ·展望以及今后的工作 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
