摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
符号说明 | 第10-11页 |
第一章: 文献综述 | 第11-22页 |
1.1 体细胞核移植的发展历史 | 第11-13页 |
1.2 体细胞核移植的研究进展 | 第13-17页 |
1.2.1 Piezo | 第13-14页 |
1.2.2 电融合 | 第14页 |
1.2.3 连续NT | 第14页 |
1.2.4 四倍体嵌合实验 | 第14-15页 |
1.2.5 孤雌激活 | 第15-16页 |
1.2.6 孤雄胚胎 | 第16-17页 |
1.3 SCNT的关键问题 | 第17-20页 |
1.3.1 核重塑 | 第17-18页 |
1.3.2 X染色体的失活 | 第18页 |
1.3.3 端粒酶的长度 | 第18-19页 |
1.3.4 克隆胚胎的甲基化 | 第19-20页 |
1.4 iSCNT的意义 | 第20-21页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第21-22页 |
第二章: 水牛-猪异种体细胞核移植 | 第22-44页 |
2.1 材料与方法 | 第23-29页 |
2.1.1 药品 | 第23页 |
2.1.2 试剂的配制 | 第23-24页 |
2.1.3 主要的仪器和设备 | 第24页 |
2.1.4 水牛原代细胞的培养 | 第24-25页 |
2.1.5 水牛细胞的传代 | 第25页 |
2.1.6 水牛细胞的冻存与复苏 | 第25页 |
2.1.7 水牛细胞的鉴定 | 第25-26页 |
2.1.8 水牛细胞的转染 | 第26页 |
2.1.9 猪卵母细胞的获取和体外成熟 | 第26-27页 |
2.1.10 猪卵母细胞的准备 | 第27页 |
2.1.11 水牛供体细胞的准备 | 第27页 |
2.1.12 5'-Aza对水牛供体细胞的抑制处理 | 第27页 |
2.1.13 异种核移植 | 第27-28页 |
2.1.14 核移植胚胎的核染色 | 第28页 |
2.1.15 RNA的抽提 | 第28页 |
2.1.16 实时定量PCR | 第28页 |
2.1.17 统计分析 | 第28-29页 |
2.2 结果与分析 | 第29-40页 |
2.2.1 iSCNT胚胎的发育及鉴定 | 第29-37页 |
2.2.2 iSCNT胚胎培养体系的优化 | 第37页 |
2.2.3 供体细胞经过5'-Azacytidine抑制后对iSCNT胚胎的影响 | 第37-40页 |
2.3 讨论 | 第40-44页 |
结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-52页 |
附录一 | 第52-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第56页 |