| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一篇 文献综述 | 第7-14页 |
| 1 猪繁殖与呼吸综合征简述 | 第7页 |
| 2 病原学 | 第7-8页 |
| 2.1 生物学特性 | 第7-8页 |
| 2.2 PRRSV基因类型及遗传变异 | 第8页 |
| 2.3 NSP2结构 | 第8页 |
| 2.4 毒力变异 | 第8页 |
| 3 流行病学 | 第8-9页 |
| 4 致病机理 | 第9页 |
| 5 临床症状 | 第9-10页 |
| 5.1 急性型 | 第9-10页 |
| 5.2 慢性型 | 第10页 |
| 5.3 亚临诊型 | 第10页 |
| 6 病理剖检 | 第10页 |
| 7 国内PRRSV疫苗研究进展 | 第10-11页 |
| 7.1 灭活疫苗 | 第10页 |
| 7.2 经典毒株弱毒疫苗 | 第10-11页 |
| 7.3 高致病毒株弱毒疫苗 | 第11页 |
| 7.4 基因缺失弱毒疫苗 | 第11页 |
| 8 PRRS诊断方法研究进展 | 第11-13页 |
| 8.1 病毒分离鉴定 | 第11页 |
| 8.2 聚合酶链式反应 | 第11-12页 |
| 8.3 酶联免疫吸附实验 | 第12页 |
| 8.4 环介导逆转录等温扩增技术 | 第12页 |
| 8.5 胶体金技术 | 第12-13页 |
| 8.6 血清中和实验 | 第13页 |
| 9 目的和意义 | 第13-14页 |
| 第二篇 研究内容 | 第14-39页 |
| 1 实验材料 | 第14-15页 |
| 1.1 主要仪器 | 第14-15页 |
| 1.2 实验试剂及溶液配制 | 第15页 |
| 1.3 毒株与疫苗 | 第15页 |
| 1.4 病料 | 第15页 |
| 2 实验方法 | 第15-24页 |
| 2.1 疫苗毒株参比品的制备 | 第15-16页 |
| 2.2 引物设计与合成 | 第16页 |
| 2.3 病毒RNA提取及第一链cDNA合成 | 第16-18页 |
| 2.3.1 总RNA的提取 | 第16-17页 |
| 2.3.2 第一链cDNA的合成 | 第17-18页 |
| 2.3.3 cDNA浓度的测定 | 第18页 |
| 2.4 引物筛选试验 | 第18-19页 |
| 2.5 PCR产物的鉴定 | 第19-22页 |
| 2.5.1 琼脂糖凝胶电泳 | 第19-22页 |
| 2.6 RT-PCR 反应条件优化 | 第22页 |
| 2.7 方法检验 | 第22-23页 |
| 2.8 病料处理 | 第23页 |
| 2.9 病毒 RNA 的提取 | 第23-24页 |
| 2.10 PCR扩增 | 第24页 |
| 2.11 PCR产物鉴定 | 第24页 |
| 3 实验结果 | 第24-36页 |
| 3.1 病毒含量测定结果 | 第24页 |
| 3.2 cDNA浓度测定结果 | 第24-25页 |
| 3.3 引物筛选 | 第25-26页 |
| 3.4 RT-PCR反应条件优化 | 第26-30页 |
| 3.4.1 退火温度梯度优化结果 | 第26-28页 |
| 3.4.2 引物浓度优化结果 | 第28页 |
| 3.4.3 RT-PCR反应条件酶使用量优化结果 | 第28-29页 |
| 3.4.4 循环数优化试验结果 | 第29-30页 |
| 3.5 方法检验结果 | 第30-31页 |
| 3.6 病料检测结果 | 第31-36页 |
| 4 讨论 | 第36-39页 |
| 4.1 关于PRRSV不同毒株RT-PCR鉴别方法的建立 | 第36-37页 |
| 4.2 关于临床病料的检测 | 第37-39页 |
| 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-44页 |
| 作者简介 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45页 |