摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-23页 |
1 引言 | 第14页 |
2 LBP和BPI的结构与功能及其研究进展 | 第14-18页 |
·LBP的结构与功能及其研究进展 | 第14-16页 |
·BPI的结构与功能及其研究进展 | 第16-18页 |
3 LBP基因和BPI基因的遗传变异研究现状 | 第18页 |
·人LBP基因和BPI基因的遗传变异研究现状 | 第18页 |
·猪LBP基因和BPI基因的遗传变异研究现状 | 第18页 |
4 重组蛋白的表达方式及纯化复性 | 第18-22页 |
·重组蛋白的表达方式 | 第19-20页 |
·重组蛋白的回收纯化 | 第20-22页 |
5 本研究目的意义 | 第22-23页 |
第二章 BPI和LBP基因遗传变异及其与猪生长性状相关性研究 | 第23-38页 |
1 材料与方法 | 第23-28页 |
·材料与仪器 | 第23-25页 |
·方法 | 第25-28页 |
2 结果 | 第28-36页 |
·猪DNA基因组的提取和检测 | 第28-29页 |
·PCR扩增及电泳检测 | 第29-30页 |
·序列分析 | 第30-32页 |
·遗传标记的建立 | 第32-33页 |
·群体中基因频率及基因型频率和多态杂合度 | 第33-35页 |
·黔邵花猪基因多态与生长性状的相关分析 | 第35-36页 |
3 讨论 | 第36-37页 |
4 结论 | 第37-38页 |
第三章 猪BPI和LBP基因cDNA克隆及蛋白质序列分析 | 第38-58页 |
1 材料与方法 | 第38-42页 |
·材料与仪器 | 第38-39页 |
·方法 | 第39-42页 |
2 结果 | 第42-56页 |
·猪总RNA的浓度和纯度 | 第42页 |
·RNA及RT-PCR产物的电泳检测结果 | 第42-43页 |
·重组质粒的PCR鉴定 | 第43-44页 |
·克隆序列测定及分析 | 第44页 |
·猪BPI推导氨基酸序列的基本特征 | 第44-50页 |
·猪LBP推导氨基酸序列的基本特征 | 第50-55页 |
·不同物种BPI及LBP的序列相似性比较 | 第55-56页 |
3 讨论 | 第56-57页 |
·猪BPI基因的功能分析 | 第56页 |
·猪LBP基因的功能分析 | 第56-57页 |
4 结论 | 第57-58页 |
第四章 猪BPIN端基因片段原核表达载体的构建与鉴定 | 第58-66页 |
1 材料与方法 | 第58-60页 |
·材料与仪器 | 第58页 |
·方法 | 第58-60页 |
2 结果 | 第60-64页 |
·RNA电泳检测 | 第60-61页 |
·猪BPI和LBP基因片段电泳检测 | 第61页 |
·酶切与纯化电泳检测 | 第61-62页 |
·猪BPIN端基因片段测序鉴定 | 第62-63页 |
·重组子的鉴定 | 第63-64页 |
3 讨论 | 第64-65页 |
4 小结 | 第65-66页 |
第五章 猪BPIN端基因片段原核表达及其体外杀菌活性的研究 | 第66-79页 |
1 材料与方法 | 第66-69页 |
·材料 | 第66页 |
·方法 | 第66-69页 |
2 结果 | 第69-76页 |
·猪BPIN端蛋白的表达鉴定 | 第69-70页 |
·重组猪BPIN端蛋白的体外活性检测 | 第70-75页 |
·重组猪BPI肽的基因工程菌 | 第75-76页 |
3 讨论 | 第76-78页 |
·原核表达融合蛋白及其回收纯化 | 第76-77页 |
·重组猪BPI肽的基因工程菌 | 第77-78页 |
·重组猪BPI肽的体外活性 | 第78页 |
4 小结 | 第78-79页 |
第六章 猪LBPN端基因片段真核表达载体构建及表达鉴定与功能初探 | 第79-95页 |
1 材料与方法 | 第79-85页 |
·材料 | 第79-80页 |
·方法 | 第80-85页 |
2 结果 | 第85-93页 |
·猪LBPN端基因片段电泳检测 | 第85-86页 |
·酶切与纯化电泳检测 | 第86页 |
·猪LBPN端基因片段测序鉴定 | 第86-87页 |
·重组子的鉴定 | 第87-88页 |
·重组猪BPIN端基因片段真核表达质粒检测 | 第88页 |
·Vero细胞的复苏和传代培养 | 第88页 |
·重组质粒转染Vero细胞 | 第88-90页 |
·重组质粒真核表达的鉴定 | 第90-91页 |
·重组质粒真核表达的Western blot鉴定 | 第91-92页 |
·免疫后小鼠体温差异比较 | 第92页 |
·免疫后小鼠血液中免疫指标的比较 | 第92-93页 |
3 讨论 | 第93-94页 |
·内毒素对Vero细胞生长及转染的影响 | 第93页 |
·猪LBPN端基因片段真核表达质粒DNA抗炎效果的评价 | 第93-94页 |
4 小结 | 第94-95页 |
结论 | 第95-98页 |
参考文献 | 第98-107页 |
英文缩写索引 | 第107-109页 |
实验用主要试剂的配制 | 第109-113页 |
实验用到的载体图谱 | 第113-115页 |
部分测序波峰图 | 第115-120页 |
致谢 | 第120-121页 |
作者简历 | 第121-122页 |
在读期间发表的论文及主持的科研项目 | 第122页 |