| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 英文缩略词 | 第10-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-23页 |
| 1.1 重金属污染的生物学研究现状 | 第11-12页 |
| 1.1.1 重金属污染的毒理学研究进展 | 第11-12页 |
| 1.1.2 重金属毒理研究的分子生物学及细胞生物学进展 | 第12页 |
| 1.2 扁形动物门涡虫的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2.1 涡虫毒理学研究现状 | 第13-14页 |
| 1.3 细胞自噬研究进展 | 第14-17页 |
| 1.3.1 自噬的分类 | 第14-15页 |
| 1.3.2 自噬的分子机制 | 第15-17页 |
| 1.4 重金属胁迫诱导细胞自噬的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.5 涡虫自噬研究现状 | 第18-19页 |
| 1.6 钙离子对自噬的双重调控 | 第19-20页 |
| 1.7 细胞自噬与凋亡的关系 | 第20-21页 |
| 1.8 本研究的目的及意义 | 第21-23页 |
| 第2章 材料与方法 | 第23-35页 |
| 2.1 日本三角涡虫的采集与饲养 | 第23页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第23-26页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.2.3 主要溶液配制 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-35页 |
| 2.3.1 实验材料处理 | 第26-27页 |
| 2.3.2 总RNA提取与cDNA合成 | 第27-28页 |
| 2.3.3 Q-RT PCR检测 | 第28-29页 |
| 2.3.4 Western-blot实验方法 | 第29-32页 |
| 2.3.5 免疫荧光 | 第32页 |
| 2.3.6 腺病毒感染日本三角涡虫表达融合蛋白GFP-LC3 | 第32页 |
| 2.3.7 透射电镜观察自噬体结构 | 第32-33页 |
| 2.3.8 实验数据分析 | 第33-35页 |
| 第3章 铅胁迫引起日本三角涡虫细胞自噬关键基因及蛋白的表达变化 | 第35-53页 |
| 3.1 实验结果 | 第35-51页 |
| 3.1.1 铅胁迫下日本三角涡虫行为与形态变化 | 第35-36页 |
| 3.1.2 透射电镜观察自噬体 | 第36-37页 |
| 3.1.3 总RNA提取 | 第37页 |
| 3.1.4 铅胁迫对日本三角涡虫LC3 mRNA及LC3蛋白表达水平的影响 | 第37-39页 |
| 3.1.5 免疫荧光检测铅胁迫对日本三角涡虫LC3蛋白表达量的影响 | 第39-44页 |
| 3.1.6 自噬流的检测 | 第44-46页 |
| 3.1.7 铅胁迫对日本三角涡虫ULK1 mRNA及ULK1、p-ULK1蛋白表达量的影响 | 第46-48页 |
| 3.1.8 铅胁迫对日本三角涡虫Beclin1 mRNA及Beclin1蛋白表达量的影响 | 第48-50页 |
| 3.1.9 腺病毒感染表达GFP-LC3 | 第50-51页 |
| 3.2 讨论 | 第51-53页 |
| 第4章 BAPTA-AM对铅胁迫诱导日本三角涡虫细胞自噬的影响 | 第53-63页 |
| 4.1 实验结果 | 第53-62页 |
| 4.1.1 透射电镜观察自噬体 | 第53-54页 |
| 4.1.2 BAPTA-AM对铅胁迫后涡虫细胞内自噬水平的影响 | 第54-59页 |
| 4.1.3 BAPTA-AM对铅胁迫后涡虫细胞ULK1、Beclin1表达的影响 | 第59-62页 |
| 4.2 讨论 | 第62-63页 |
| 第5章 白噬与凋亡 | 第63-67页 |
| 5.1 抑制自噬后,铅胁迫对cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-8蛋白表达量的影响 | 第63-64页 |
| 5.2 讨论 | 第64-67页 |
| 第6章 总结 | 第67-71页 |
| 参考文献 | 第71-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
