| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第一章 引言 | 第12-22页 |
| 1.1 胚乳发育与稻米品质的关系 | 第12-13页 |
| 1.1.1 胚乳发育与外观品质 | 第12页 |
| 1.1.2 胚乳发育与加工品质 | 第12页 |
| 1.1.3 胚乳发育与蒸煮食味品质 | 第12-13页 |
| 1.1.4 胚乳发育与营养品质 | 第13页 |
| 1.2 胚乳发育与相关基因研究进展 | 第13-18页 |
| 1.2.1 胚乳与外观品质相关基因 | 第13-17页 |
| 1.2.1.1 粒型 | 第13-14页 |
| 1.2.1.2 垩白 | 第14-17页 |
| 1.2.2 胚乳与蒸煮食味品质相关基因 | 第17页 |
| 1.2.3 ISA1基因研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2.4 胚乳与营养品质相关基因研究进展 | 第18页 |
| 1.3 基因编辑技术 | 第18-20页 |
| 1.3.1 ZFNs技术 | 第18-19页 |
| 1.3.2 TALENs技术 | 第19-20页 |
| 1.3.3 CRISPR/Cas9技术 | 第20页 |
| 1.4 本实验研究目的 | 第20-22页 |
| 第二章 载体构建及基因编辑检测 | 第22-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.1 水稻材料 | 第22页 |
| 2.1.2 质粒载体 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-25页 |
| 2.2.1 敲除载体的构建 | 第22-24页 |
| 2.2.1.1 ISA1靶序列的选择与引物设计 | 第22-23页 |
| 2.2.1.2 oligo二聚体插入到载体中 | 第23-24页 |
| 2.2.2 农杆菌介导的转化 | 第24页 |
| 2.2.3 转基因阳性植株验证 | 第24页 |
| 2.2.4 突变植株的基因检测 | 第24-25页 |
| 2.3 结果与分析 | 第25-27页 |
| 2.3.1 靶位点的选择和引物设计 | 第25页 |
| 2.3.2 载体的鉴定 | 第25-26页 |
| 2.3.3 基因编辑结果 | 第26-27页 |
| 2.4 小结 | 第27-28页 |
| 第三章 突变体isa1的表型鉴定及功能分析 | 第28-39页 |
| 3.1 材料与方法 | 第28-32页 |
| 3.1.1 农艺性状的考查 | 第28页 |
| 3.1.2 电镜观察水稻籽粒淀粉颗粒的变化 | 第28-29页 |
| 3.1.3 稻米淀粉含量的测定 | 第29页 |
| 3.1.3.1 总淀粉的测定 | 第29页 |
| 3.1.3.2 直链淀粉的测定 | 第29页 |
| 3.1.4 糊化温度的测定 | 第29-30页 |
| 3.1.5 胶稠度的测定 | 第30页 |
| 3.1.6 链长分布的测定 | 第30页 |
| 3.1.7 碘染水稻横截面 | 第30页 |
| 3.1.8 淀粉合成相关基因的表达水平 | 第30-32页 |
| 3.1.8.1 水稻种子RNA的提取方法 | 第30页 |
| 3.1.8.2 合成CDNA | 第30-31页 |
| 3.1.8.3 Real-timePCR | 第31-32页 |
| 3.2 结果与分析 | 第32-38页 |
| 3.2.1 农艺性状考查 | 第32-33页 |
| 3.2.2 突变体胚乳淀粉颗粒合成异常 | 第33-35页 |
| 3.2.3 胚乳理化指标的检测 | 第35-37页 |
| 3.2.4 淀粉合成相关基因的表达分析 | 第37-38页 |
| 3.3 小结 | 第38-39页 |
| 3.3.1 突变体的农艺性状和胚乳淀粉颗粒发生变化 | 第38页 |
| 3.3.2 突变体胚乳淀粉的理化性质发生显著变化 | 第38页 |
| 3.3.3 淀粉合成相关基因的表达量发生显著性变化 | 第38-39页 |
| 第四章 全文结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-47页 |
| 附录 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简历 | 第49页 |