内容提要 | 第1-9页 |
第一章 前言 | 第9-20页 |
·乙型肝炎的简介 | 第9-13页 |
·当前乙型肝炎的流行性状况 | 第9页 |
·乙型肝炎病(HBV)的分子生物学特征 | 第9-11页 |
·乙型肝炎的治疗现状 | 第11-13页 |
·乙型肝炎治疗性疫苗的研究 | 第13-17页 |
·治疗性HBV 疫苗的研究历史 | 第13-15页 |
·MVA 载体疫苗的研究进展 | 第15页 |
·prime-boost 策略的应用 | 第15-16页 |
·不同细胞因子免疫佐剂的应用 | 第16-17页 |
·HBV C 基因及其编码的核心蛋白的概述 | 第17-19页 |
·HBV C 基因及其编码蛋白 | 第17-18页 |
·核心蛋白在机体免疫调节中的作用 | 第18-19页 |
·本研究的设计方案和思路 | 第19-20页 |
·目的抗原的选择 | 第19页 |
·设计思路 | 第19-20页 |
第二章 重组MVA 载体疫苗的构建 | 第20-36页 |
·实验材料 | 第21-23页 |
·载体、引物 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21-22页 |
·主要溶液 | 第22页 |
·主要仪器 | 第22-23页 |
·实验方法 | 第23-30页 |
·测序质粒T-E4 的构建 | 第23-24页 |
·穿梭质粒PSC11-E4 的构建 | 第24-26页 |
·质粒的大量提取 | 第26-27页 |
·鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备 | 第27页 |
·重组MVA 病毒的构建及筛选纯化 | 第27-29页 |
·阳性重组MVA 病毒鉴定 | 第29-30页 |
·试验结果 | 第30-35页 |
·测序质粒的构建结果 | 第30-32页 |
·穿梭质粒的构建结果 | 第32-34页 |
·重组病毒rMVA-E4 纯度的鉴定 | 第34-35页 |
·本章小结 | 第35-36页 |
第三章 重组MVA 病毒滴定及抗原性鉴定 | 第36-47页 |
·实验材料 | 第36-38页 |
·病毒株、细胞株 | 第36页 |
·主要试剂 | 第36-37页 |
·主要实验溶液的配置 | 第37-38页 |
·主要实验仪器 | 第38页 |
·实验方法 | 第38-41页 |
·重组病毒的提纯及滴定 | 第38-39页 |
·电镜负染观察病毒形态 | 第39页 |
·间接荧光免疫染色法鉴定目的抗原的表达位置 | 第39页 |
·重组病毒在COS-7 细胞系中的抗原表达 | 第39-40页 |
·Western-blot 检测重组病毒的蛋白表达 | 第40-41页 |
·实验结果 | 第41-46页 |
·重组MVA 病毒载体疫苗滴度测定 | 第41-42页 |
·电镜负染观察病毒形态 | 第42-43页 |
·间接免疫荧光染色法鉴定目的抗原表达结果 | 第43-44页 |
·重组病毒表达目的蛋白的抗原性鉴定 | 第44-45页 |
·Western-blot 检测结果 | 第45-46页 |
·本章小结 | 第46-47页 |
第四章 重组MVA 载体疫苗免疫效果初步研究 | 第47-60页 |
·实验材料 | 第47-48页 |
·免疫动物疫苗及佐剂 | 第47-48页 |
·主要试剂及仪器 | 第48页 |
·抗原刺激肽 | 第48页 |
·实验动物 | 第48页 |
·实验方法 | 第48-54页 |
·MVA 载体疫苗采用不同免疫策略的比较 | 第48-53页 |
·动物实验设计 | 第48-49页 |
·体液抗体水平检测 | 第49页 |
·CTL 实验 | 第49-51页 |
·ELISPOT 实验 | 第51-53页 |
·不同细胞因子对治疗性HBV 疫苗的增强作用 | 第53-54页 |
·动物实验设计 | 第53-54页 |
·体液抗体水平检测 | 第54页 |
·CTL 试验 | 第54页 |
·ELISPOT 试验 | 第54页 |
·试验结果 | 第54-59页 |
·体液免疫结果 | 第54-56页 |
·采用不同免疫策略时的体液免疫结果 | 第54-56页 |
·细胞因子联合免疫组体液免疫结果 | 第56页 |
·细胞免疫结果 | 第56-59页 |
·采用不同免疫策略时的细胞免疫分析 | 第56-58页 |
·ELISPOT 结果分析 | 第56-57页 |
·CTL 结果试验 | 第57-58页 |
·细胞因子联合免疫组细胞免疫分析 | 第58-59页 |
·ELISPOT 结果分析 | 第58页 |
·CTL 结果试验 | 第58-59页 |
·本章小结 | 第59-60页 |
第五章 结论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-67页 |
附录 | 第67-68页 |
中文摘要 | 第68-71页 |
ABSTRACT | 第71-74页 |
致谢 | 第74页 |