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血红密孔菌在四溴双酚A和六价铬复合污染胁迫下的生理响应和分子机制研究

摘要第5-7页
abstract第7-9页
第一章 绪论第15-30页
    1.1 四溴双酚A与重金属复合污染现状及其微生物修复第15-20页
        1.1.1 四溴双酚A的特性第15-16页
        1.1.2 四溴双酚A与重金属复合污染的现状第16-17页
        1.1.3 四溴双酚A的微生物降解和转化第17-19页
        1.1.4 重金属对四溴双酚A微生物降解和转化的影响第19-20页
    1.2 白腐真菌及其在微生物修复中的应用第20-25页
        1.2.1 白腐真菌对有机物的降解和转化第21-22页
        1.2.2 白腐真菌对重金属的吸附和转化第22-23页
        1.2.3 金属离子对白腐真菌生物降解和转化有机物的影响第23-25页
    1.3 环境污染微生物修复的蛋白组学研究第25-26页
    1.4 本论文的研究工作第26-30页
        1.4.1 研究的目的及意义第26-27页
        1.4.2 本研究的主要内容第27-29页
        1.4.3 技术路线第29页
        1.4.4 创新点第29-30页
第二章 P.sanguineus对TBBPA和Cr(VI)复合污染的去除第30-47页
    2.1 材料与设备第30-32页
        2.1.1 实验药品第30页
        2.1.2 主要实验试剂的配制第30-31页
        2.1.3 实验设备第31页
        2.1.4 实验菌种与培养基第31-32页
    2.2 实验方法第32-36页
        2.2.1 P.sanguineus孢子液的制备以及菌体的培养第32页
        2.2.2 pH对P.sanguineus去除TBBPA和Cr(VI)复合污染的影响第32-33页
        2.2.3 接种量对P.sanguineus去除TBBPA和Cr(VI)复合污染的影响第33页
        2.2.4 污染物初始浓度对P.sanguineus去除TBBPA和Cr(VI)复合污染的影响第33页
        2.2.5 胞外酶对TBBPA的降解以及Cr(VI)对胞外酶降解TBBPA的影响第33-34页
        2.2.6 P450酶抑制剂对TBBPA降解的影响第34页
        2.2.7 TBBPA的分析和测定第34页
        2.2.8 Cr(VI)的测定方法第34-35页
        2.2.9 菌体胞外木质素降解酶活性的变化以及Cr(VI)对木质素降解酶活性的影响第35-36页
        2.2.10 统计分析第36页
    2.3 结果与讨论第36-45页
        2.3.1 体系pH对P.sanguineus去除TBBPA和Cr(VI)复合污染的影响第36-37页
        2.3.2 接种量对P.sanguineus去除TBBPA和Cr(VI)复合污染的影响第37-38页
        2.3.3 Cr(VI)初始浓度对P.sanguineus去除TBBPA和Cr(VI)复合污染的影响第38-40页
        2.3.4 TBBPA初始浓度对P.sanguineus去除TBBPA和Cr(VI)复合污染的影响第40-41页
        2.3.5 胞外木质素降解酶活性的变化及胞外酶对TBBPA的降解第41-43页
        2.3.6 Cr(VI)对胞外木质素降解酶活性以及胞外酶降解TBBPA的影响第43-44页
        2.3.7 P450酶抑制剂对P.sanguineus去除TBBPA的影响第44-45页
    2.4 本章小结第45-47页
第三章 TBBPA和Cr(VI)复合污染去除过程中P.sanguineus细胞特性的变化第47-66页
    3.1 材料与设备第47-49页
        3.1.1 试剂盒第47页
        3.1.2 实验药品第47-48页
        3.1.3 主要实验试剂的配制第48页
        3.1.4 实验设备第48页
        3.1.5 实验菌株和培养基第48-49页
    3.2 实验步骤第49-51页
        3.2.1 P.sanguineus的培养和污染物的投加第49页
        3.2.2 体系pH的测定第49页
        3.2.3 菌体生物量的测定第49页
        3.2.4 胞内蛋白含量的测定第49-50页
        3.2.5 细胞活性的测定第50页
        3.2.6 ATP酶(ATPase)活性的测定第50页
        3.2.7 细胞质膜完整性的测定第50-51页
        3.2.8 扫描电镜观察第51页
        3.2.9 透射电镜观察第51页
        3.2.10 统计分析第51页
    3.3 结果与讨论第51-64页
        3.3.1 TBBPA和Cr(VI)复合污染去除过程中体系pH的变化第51-53页
        3.3.2 TBBPA-Cr(VI)复合污染对P.sanguineus生长的影响第53-54页
        3.3.3 TBBPA-Cr(VI)复合污染对P.sanguineus胞内蛋白的影响第54-56页
        3.3.4 TBBPA-Cr(VI)复合污染对P.sanguineus细胞活性的影响第56-57页
        3.3.5 TBBPA-Cr(VI)复合污染对P.sanguineusATPase活性的影响第57-61页
        3.3.6 TBBPA-Cr(VI)复合污染对P.sanguineus质膜完整性的影响第61-62页
        3.3.7 不同污染体系中P.sanguineus细胞的SEM和TEM观察第62-64页
    3.4 本章小结第64-66页
第四章 Cr(VI)诱导P.sanguineus氧化应激及凋亡的机制研究第66-90页
    4.1 材料与设备第66-68页
        4.1.1 试剂盒第66页
        4.1.2 实验药品第66-67页
        4.1.3 主要的实验试剂的配制第67-68页
        4.1.4 实验设备第68页
        4.1.5 实验菌株和培养基第68页
    4.2 实验方法第68-74页
        4.2.1 P.sanguineus的培养以及污染物的投加第68页
        4.2.2 SOD、CAT活性以及GSH、MDA含量的测定第68-69页
        4.2.3 胞内活性氧簇含量的测定第69-70页
        4.2.4 线粒体特性的检测第70-71页
        4.2.5 DNA断裂以及细胞核形态观察第71-72页
        4.2.6 细胞凋亡情况的观察第72页
        4.2.7 胞内Metacaspase活性测定第72页
        4.2.8 胞质中Ca2+和线粒体中Ca2+含量的测定第72-73页
        4.2.9 胞外K+流速测定第73-74页
        4.2.10 统计分析第74页
    4.3 结果与讨论第74-89页
        4.3.1 Cr(VI)胁迫下P.sanguineus胞内ROS含量的变化第74-76页
        4.3.2 Cr(VI)胁迫下P.sanguineus胞内SOD、CAT活性以及GSH含量的变化第76-79页
        4.3.3 Cr(VI)胁迫下P.sanguineus胞内MDA含量的变化第79页
        4.3.4 Cr(VI)胁迫下P.sanguineus细胞的凋亡特征第79-81页
        4.3.5 Cr(VI)胁迫下P.sanguineus线粒体特性的变化第81-83页
        4.3.6 Cr(VI)胁迫下P.sanguineus胞内Metacaspase的激活第83-84页
        4.3.7 Cr(VI)胁迫下P.sanguineus细胞DNA断裂以及细胞核变化第84-86页
        4.3.8 Cr(VI)胁迫下P.sanguineus胞质和线粒体中Ca2+含量的变化第86-88页
        4.3.9 Cr(VI)胁迫下P.sanguineus胞外K+流速的变化第88-89页
    4.4 本章小结第89-90页
第五章 P.sanguineus在TBBPA-Cr(VI)胁迫下差异蛋白功能分析第90-111页
    5.1 材料与设备第90-91页
        5.1.1 实验试剂盒及药品第90页
        5.1.2 主要实验试剂的成分第90-91页
        5.1.3 实验设备第91页
    5.2 实验步骤第91-95页
        5.2.1 P.sanguineus的培养以及污染物的投加第91页
        5.2.2 菌体的研磨第91-92页
        5.2.3 蛋白质的提取及纯化第92页
        5.2.4 蛋白质的定量第92页
        5.2.5 蛋白酶解以及iTRAQ试剂标记第92-93页
        5.2.6 第一维高pH-RP液相分离第93-94页
        5.2.7 第二维反相液质联用RPLC-MS分析第94页
        5.2.8 数据检索第94-95页
    5.3 结果与讨论第95-109页
        5.3.1 TBBPA-Cr(VI)单一和复合污染体系中菌体细胞的全蛋白表达第95-96页
        5.3.2 TBBPA-Cr(VI)单一和复合污染体系中菌体细胞差异蛋白功能分类第96-98页
        5.3.3 TBBPA-Cr(VI)单一和复合污染体系中菌体细胞差异蛋白功能分析第98-109页
    5.4 本章小结第109-111页
结论与展望第111-114页
    一、结论第111-112页
    二、展望第112-114页
参考文献第114-133页
攻读博士学位期间取得的研究成果第133-136页
致谢第136-137页
附件第137页

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