| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-29页 |
| 1.1 抗肿瘤肽与癌症 | 第15-16页 |
| 1.2 抗肿瘤肽的结构特点 | 第16-17页 |
| 1.3 抗肿瘤肽对肿瘤细胞的选择性 | 第17-18页 |
| 1.4 抗肿瘤肽的作用机制 | 第18-25页 |
| 1.4.1 细胞膜裂解机制 | 第19-23页 |
| 1.4.2 细胞器膜裂解机制 | 第23-24页 |
| 1.4.3 非膜裂解机制 | 第24-25页 |
| 1.5 检测多肽抗肿瘤活性及膜裂解能力的常用方法 | 第25-26页 |
| 1.5.1 MTT实验 | 第25页 |
| 1.5.2 乳酸脱氢酶释放实验 | 第25页 |
| 1.5.3 死活细胞染色实验 | 第25-26页 |
| 1.5.4 钙黄绿素释放实验 | 第26页 |
| 1.5.5 多肽引起的膜表面张力变化 | 第26页 |
| 1.6 检测细胞凋亡及凋亡机制的常用方法 | 第26-28页 |
| 1.6.1 Annexin V/PI法检测细胞凋亡 | 第26-27页 |
| 1.6.2 Western blot法检测Caspase-3的活性 | 第27页 |
| 1.6.3 Caspase-3活性试剂盒检测Caspase-3的活性 | 第27页 |
| 1.6.4 线粒体电势的检测 | 第27-28页 |
| 1.7 论文选题意义及目的 | 第28-29页 |
| 第二章 实验部分 | 第29-45页 |
| 2.1 实验仪器及材料 | 第29-31页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第29-30页 |
| 2.1.2 实验药品 | 第30-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-45页 |
| 2.2.1 合成和纯化目标多肽 | 第31-33页 |
| 2.2.2 多肽Zeta电位,粒径测定及二级结构观察 | 第33页 |
| 2.2.3 细胞培养与传代 | 第33-35页 |
| 2.2.4 肿瘤细胞增殖抑制(MTT)实验 | 第35页 |
| 2.2.5 乳酸脱氢酶释放实验 | 第35-36页 |
| 2.2.6 死/活细胞染色实验 | 第36页 |
| 2.2.7 多肽对模拟膜裂解能力检测 | 第36-37页 |
| 2.2.8 多肽引起的膜表面张力变化 | 第37-38页 |
| 2.2.9 Annexin V/PI法检测细胞凋亡 | 第38-39页 |
| 2.2.10 利用Western blot检测Caspase-3 | 第39-41页 |
| 2.2.11 利用分光光度法检测Caspase-3活性 | 第41页 |
| 2.2.12 多肽ZXR-1穿膜现象的观察及机理研究 | 第41-42页 |
| 2.2.13 线粒体跨膜电位检测 | 第42-45页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第45-65页 |
| 3.1 抗肿瘤肽多肽ZXR-1和ZXR-2的合成与纯化 | 第45-48页 |
| 3.1.1 多肽的合成 | 第45页 |
| 3.1.2 多肽的分析纯化 | 第45-46页 |
| 3.1.3 多肽分子量鉴定 | 第46-47页 |
| 3.1.4 多肽的大量制备 | 第47-48页 |
| 3.2 多肽的粒径、电位及二级结构的观察 | 第48-50页 |
| 3.3 多肽对肿瘤细胞的增殖抑制能力 | 第50-52页 |
| 3.4 多肽对细胞膜裂解能力的观察 | 第52-54页 |
| 3.4.1 乳酸脱氢酶实验 | 第52-53页 |
| 3.4.2 多肽引起的细胞形态的变化 | 第53-54页 |
| 3.5 多肽对模拟膜裂解能力的观察 | 第54-57页 |
| 3.5.1 钙黄绿素释放实验 | 第54-55页 |
| 3.5.2 多肽导致的模拟膜表面压力的变化 | 第55-57页 |
| 3.6 多肽导致细胞凋亡的检测 | 第57-60页 |
| 3.6.1 Annexin V/PI法检测细胞凋亡 | 第57-58页 |
| 3.6.2 Western blot法检测细胞凋亡 | 第58-59页 |
| 3.6.3 Caspase-3活性试剂盒检测细胞凋亡 | 第59-60页 |
| 3.7 多肽导致细胞凋亡的机制研究 | 第60-65页 |
| 3.7.1 ZXR-1穿膜能力的检测 | 第60-62页 |
| 3.7.2 ZXR-1引起的细胞线粒体电势的变化 | 第62-63页 |
| 3.7.3 ZXR-1穿膜行为的温度依赖性 | 第63-65页 |
| 第四章 结论与展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 致谢 | 第71-73页 |
| 研究成果及发表论文 | 第73-75页 |
| 作者和导师介绍 | 第75-76页 |
| 硕士研究生学位论文答辩委员会决议书 | 第76-77页 |
