| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 第一章 文献研究 | 第12-24页 |
| 1 广地龙相关研究概况 | 第12-14页 |
| 1.1 广地龙的化学成分及药理作用 | 第12-13页 |
| 1.2 广地龙药材资源和药材品质现状 | 第13-14页 |
| 1.3 广地龙物种鉴定的依据和方法 | 第14页 |
| 2 高特异性PCR技术在动物类中药品种鉴定中的应用 | 第14-19页 |
| 2.1 动物类中药材鉴定现状 | 第14-15页 |
| 2.2 基于通用引物的DNA分子标记技术 | 第15-16页 |
| 2.3 基于特异引物的DNA分子标记技术 | 第16-18页 |
| 2.4 高特异性PCR技术的前景与展望 | 第18-19页 |
| 3 动物线粒体DNA (mitochondrial DNA,mtDNA)研究概况 | 第19-21页 |
| 3.1 线粒体DNA (mtDNA)的特点 | 第19-20页 |
| 3.2 线粒体DNA (mtDNA)在动物分子系统学中的应用 | 第20页 |
| 3.3 线粒体DNA的应用前景 | 第20-21页 |
| 4 文献研究小结 | 第21-24页 |
| 4.1 本研究工作的立题依据 | 第21页 |
| 4.2 本研究工作的研究目的及意义 | 第21-22页 |
| 4.3 本研究的研究思路及方案 | 第22-24页 |
| 第二章 地龙样品的物种鉴定 | 第24-38页 |
| 1 引言 | 第24页 |
| 2 实验材料 | 第24页 |
| 2.1 样品采集 | 第24页 |
| 2.2 试剂与仪器 | 第24页 |
| 3 实验方法 | 第24-25页 |
| 3.1 样品的保存 | 第25页 |
| 3.2 蚯蚓物种的形态鉴定方法 | 第25页 |
| 4 实验结果 | 第25-35页 |
| 5 小结与讨论 | 第35-38页 |
| 第三章 参环毛蚓高特异性PCR方法的建立 | 第38-58页 |
| 1 引言 | 第38页 |
| 2 实验材料 | 第38-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 2.2 试剂与仪器 | 第39-40页 |
| 3 实验方法 | 第40-45页 |
| 3.1 基因组DNA提取 | 第40-41页 |
| 3.2 通用引物的设计与合成 | 第41-42页 |
| 3.3 COI、16SrRNA和12SrRNAPCR反应的优化 | 第42-43页 |
| 3.4 COI、16SrRNA和12SrRNAPCR扩增与测序 | 第43-44页 |
| 3.5 特异性引物设计与筛选 | 第44页 |
| 3.6 参环毛蚓高特异性PCR方法的建立 | 第44-45页 |
| 3.7 个体差异对鉴定结果影响的研究 | 第45页 |
| 3.8 参环毛蚓高特异性PCR方法的稳定性检验 | 第45页 |
| 4 实验结果 | 第45-57页 |
| 4.1 基因组DNA的提取质量检测 | 第45-46页 |
| 4.2 COI、16SrRNA和12SrRNA基因片段PCR反应条件优化 | 第46-51页 |
| 4.3 COI、16SrRNA和12SrRNA基因片段的PCR扩增与测序 | 第51-52页 |
| 4.4 数据分析 | 第52-53页 |
| 4.5 参环毛蚓特异性引物的设计与筛选 | 第53-55页 |
| 4.6 高特异性PCR方法的建立 | 第55-56页 |
| 4.7 个体差异研究 | 第56页 |
| 4.8 参环毛蚓高特异性PCR方法的稳定性检验 | 第56-57页 |
| 5 小结与讨论 | 第57-58页 |
| 第四章 高特异性PCR在广地龙药材及粉末鉴定中的应用 | 第58-68页 |
| 1 引言 | 第58页 |
| 2 实验材料 | 第58-59页 |
| 2.1 实验材料 | 第58-59页 |
| 2.2 试剂与仪器 | 第59页 |
| 3 实验方法 | 第59-60页 |
| 3.1 广地龙药材的形态鉴别 | 第59页 |
| 3.2 地龙药材的高特异性PCR鉴别研究 | 第59-60页 |
| 3.3 地龙药材粉末的高特异性PCR鉴别 | 第60页 |
| 4 实验结果 | 第60-65页 |
| 4.1 广地龙药材的形态鉴别 | 第60-64页 |
| 4.2 地龙药材及粉末的高特异性PCR鉴别研究 | 第64-65页 |
| 5 小结与讨论 | 第65-68页 |
| 第五章 全文总结 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 附录 | 第75-88页 |
| 附录1 地龙样品12SrRNA、16SrRNA及COI测序峰图 | 第75-87页 |
| 附录2 缩略词说明 | 第87-88页 |
| 在校期间发表文章 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
