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花生油脂代谢关键基因在酵母和聚球藻中表达及功能验证

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
第1章 绪论第13-30页
    1.1 课题来源及目的意义第13-14页
    1.2 课题背景第14页
    1.3 国际化生产业现状及发展前景第14-16页
        1.3.1 国际花生产业发展现状第14-15页
        1.3.2 我国花生产业发展现状与优势第15页
        1.3.3 我国花生产业发展存在的问题及发展方向第15-16页
    1.4 植物油脂生物合成的途径第16-17页
    1.5 植物脂肪酸的研究进展第17-25页
        1.5.1 脂肪酸的分类第17-18页
        1.5.2 脂肪酸的功能第18-20页
        1.5.3 脂肪酸去饱和酶及编码基因的研究第20-21页
        1.5.4 不饱和脂肪酸合成过程中关键去饱和酶的研究第21-25页
    1.6 三酰甘油合成酶—DGTA 的研究进展第25-28页
        1.6.1 DGAT 的分类及结构特点第25-26页
        1.6.2 DGAT 蛋白的亚细胞定位及结构特点第26-27页
        1.6.3 DGAT 的功能第27-28页
    1.7 主要研究内容第28-30页
第2章 花生总脂和脂肪酸含量的分析第30-37页
    2.1 实验材料与试剂第30-31页
        2.1.1 试剂第30页
        2.1.2 材料第30-31页
    2.2 方法第31-32页
        2.2.1 脂肪酸甲脂的制备第31页
        2.2.2 油脂的提取第31页
        2.2.3 气相色谱分析第31页
        2.2.4 数据分析第31-32页
    2.3 结果与分析第32-34页
        2.3.1. 不同花生品种(系)总脂含量和脂肪酸组成的研究第32-33页
        2.3.2 花生种子发育过程中油脂和脂肪酸累积模式研究第33-34页
    2.4 讨论第34-35页
    2.5 本章小结第35-37页
第3章 AhFAD6、AhDGAT1-1、AhDGAT1-2 和 AhDGAT3-3 基因的表达特性研究第37-73页
    3.1 试验材料与试剂第38-39页
        3.1.1 植物材料第38页
        3.1.2 试剂第38页
        3.1.3 常用培养基第38-39页
    3.2 方法第39-45页
        3.2.1 基因的克隆第39-42页
        3.2.2 DNA 片段的胶回收第42页
        3.2.3 DNA 回收产物与克隆载体的连接第42-43页
        3.2.4 大肠杆菌的转化第43页
        3.2.5 转化子质粒的提取第43-44页
        3.2.6 转化子质粒的双酶切验证第44页
        3.2.7 基因序列的生物信息学分析第44页
        3.2.8 实时荧光 RT-PCR第44-45页
    3.3 结果与分析第45-68页
        3.3.1 基因克隆的结果第45-47页
        3.3.2 AhFAD6、AhDGAT1-1、AhDGAT1-2、AhDGAT3-3 基因的生物信息学分析结果第47-63页
        3.3.3 AhFAD6、AhDGAT1-1、AhDGAT1-2、AhDGAT3-3 基因的表达特性分析结果第63-68页
    3.4 讨论第68-71页
        3.4.1 基因的克隆第68-69页
        3.4.2 基因的表达特性第69-71页
    3.5 本章小结第71-73页
第4章 AhFAD6 基因在聚球藻 PCC7942 中的表达第73-84页
    4.1 实验材料与试剂第73-75页
        4.1.1 藻种和质粒第73页
        4.1.2 主要试剂第73-74页
        4.1.3 常用培养基第74页
        4.1.4 主要仪器设备第74-75页
    4.2 方法第75-79页
        4.2.1 pSyn_1 表达载体的构建第75-76页
        4.2.2 聚球藻 PCC7962 转化及鉴定第76-78页
        4.2.3 转化子的富集培养及产物制备第78页
        4.2.4 气象色谱分析第78-79页
    4.3 结果与分析第79-83页
        4.3.1 pSyn_1 表达载体构建的结果第79-80页
        4.3.2 聚球藻转化结果第80-83页
    4.4 讨论第83页
    4.5 本章小结第83-84页
第五章 :AhDGAT1-1、AhDGAT1-2、AhDGAT3-3 基因在酿酒酵母中的表达第84-98页
    5.1 实验材料与试剂第84-86页
        5.1.1 菌种和质粒第84页
        5.1.2 常用培养基第84-85页
        5.1.3 主要试剂第85页
        5.1.4 主要仪器设备第85-86页
    5.2 方法第86-89页
        5.2.1 pYES2 表达载体的构建第86页
        5.2.2 酿酒酵母感受态的制备和转化第86-87页
        5.2.3 酿酒酵母转化子的鉴定第87页
        5.2.4 转基因酵母的诱导培养及菌体收集第87-88页
        5.2.5 酿酒酵母转化产物的分析第88-89页
    5.3 结果与分析第89-96页
        5.3.1 pYES2-1、pYES2-2、pYES2-3 表达载体构建结果第89-91页
        5.3.2 酵母转化结果第91-94页
        5.3.3 转化产物的分析结果第94-96页
    5.4 讨论第96-97页
    5.5 本章小结第97-98页
结论第98-100页
参考文献第100-116页
致谢第116页

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