| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 英文缩略词表 | 第12-14页 |
| 绪论 | 第14-25页 |
| 1 引言 | 第14页 |
| 2 食管癌 | 第14-17页 |
| 2.1 食管癌症状及发病机制 | 第15-16页 |
| 2.2 食管癌的预防及治疗 | 第16-17页 |
| 3 肿瘤中针对 PI3K/Akt/mTOR 通路的靶向治疗 | 第17-21页 |
| 3.1 PI3K/Akt/mTOR 生物学功能 | 第17-18页 |
| 3.2 PTEN 在癌症中的作用 | 第18页 |
| 3.3 Akt 中的分子靶标 | 第18-19页 |
| 3.4 mTOR 在癌症中的作用 | 第19-21页 |
| 3.5 PI3K/Akt/mTOR 通路抑制剂应用前景及展望 | 第21页 |
| 4 本文研究内容 | 第21-22页 |
| 参考文献 | 第22-25页 |
| 第一章 雷帕霉素对食管鳞癌细胞增殖及 Akt 表达影响 | 第25-42页 |
| 引言 | 第25页 |
| 1 材料与方法 | 第25-34页 |
| 1.1 实验材料 | 第25-29页 |
| 1.1.1 实验试剂 | 第25-27页 |
| 1.1.2 实验仪器 | 第27-28页 |
| 1.1.3 试剂配制 | 第28-29页 |
| 1.1.4 细胞株 | 第29页 |
| 1.2 实验方法 | 第29-34页 |
| 1.2.1 细胞培养 | 第29-30页 |
| 1.2.2 细胞增殖抑制试验 | 第30页 |
| 1.2.3 Western blot 实验 | 第30-33页 |
| 1.2.4 细胞 siRNA 转染实验 | 第33页 |
| 1.2.5 裸鼠移植瘤实验 | 第33-34页 |
| 1.2.6 统计学分析 | 第34页 |
| 2 结果 | 第34-40页 |
| 2.1 Rapa 对食管鳞癌细胞株的增殖抑制 | 第34-35页 |
| 2.2 食管鳞癌细胞中 PI3K/Akt/mTOR 通路蛋白表达情况 | 第35-36页 |
| 2.3 Rapa 对食管鳞癌细胞中 p-Akt(Ser473)表达的影响 | 第36-38页 |
| 2.4 p70S6K siRNA 对 EC9706 细胞中 p-Akt(Ser473)表达的影响 | 第38-40页 |
| 3 讨论 | 第40-42页 |
| 第二章 野生型PTEN在食管鳞癌中的表达及其对Akt/mTOR信号通路的影响 | 第42-56页 |
| 引言 | 第42页 |
| 1 材料与方法 | 第42-48页 |
| 1.1 实验材料 | 第42-44页 |
| 1.1.1 载体与宿主菌 | 第42-43页 |
| 1.1.2 酶和试剂 | 第43页 |
| 1.1.3 实验仪器 | 第43页 |
| 1.1.4 试剂配制 | 第43-44页 |
| 1.2 实验方法 | 第44-48页 |
| 1.2.1 DH5α大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第44页 |
| 1.2.2 细菌的转化 | 第44-45页 |
| 1.2.3 克隆酶切鉴定 | 第45页 |
| 1.2.4 pcDNA3.1-PTEN 的扩增 | 第45-46页 |
| 1.2.5 细胞转染并筛选稳定表达株 | 第46-47页 |
| 1.2.6 生长曲线绘制 | 第47页 |
| 1.2.7 细胞增殖抑制实验 | 第47页 |
| 1.2.8 裸鼠移植瘤实验 | 第47-48页 |
| 1.2.9 Western blot 实验 | 第48页 |
| 1.2.10 统计学分析 | 第48页 |
| 2 结果 | 第48-53页 |
| 2.1 不同食管鳞癌细胞中 PTEN mRNA 和蛋白的表达情况 | 第48-49页 |
| 2.2 阳性克隆酶切及转染结果 | 第49-50页 |
| 2.3 生长曲线 | 第50页 |
| 2.4 PTEN 对细胞增殖的影响 | 第50-51页 |
| 2.5 PTEN 和 Rapa 对 p-Akt(Ser473)蛋白表达的影响 | 第51-52页 |
| 2.6 PTEN 和 Rapa 对裸鼠移植瘤的增殖抑制作用 | 第52-53页 |
| 2.6.1 不同治疗组中裸鼠移植瘤的生长情况 | 第52-53页 |
| 2.6.2 裸鼠移植瘤中 PTEN 及 p-Akt(Ser473)表达情况 | 第53页 |
| 3 讨论 | 第53-56页 |
| 第三章 OP16 通过 PI3K/Akt 通路抑制食管鳞癌细胞增殖 | 第56-70页 |
| 引言 | 第56页 |
| 1 材料与方法 | 第56-59页 |
| 1.1 实验材料 | 第56-58页 |
| 1.1.1 实验试剂 | 第56-57页 |
| 1.1.2 实验仪器 | 第57页 |
| 1.1.3 试剂配制 | 第57-58页 |
| 1.1.4 细胞株 | 第58页 |
| 1.2 实验方法 | 第58-59页 |
| 1.2.1 细胞增殖抑制实验 | 第58页 |
| 1.2.2 药物联用效果评价 | 第58页 |
| 1.2.3 Western blot 实验 | 第58-59页 |
| 1.2.4 统计学分析 | 第59页 |
| 2 结果 | 第59-67页 |
| 2.1 OP16 对食管鳞癌细胞株的增殖抑制作用 | 第59-60页 |
| 2.2 OP16 对食管鳞癌细胞中 p-Akt 表达的影响 | 第60-62页 |
| 2.3 OP16 对食管鳞癌细胞中 p-p70S6K 表达的影响 | 第62-63页 |
| 2.4 Rapa 联合 OP16 对 TE-1 细胞株的形态学影响 | 第63-64页 |
| 2.5 Rapa 联合 OP16 对食管鳞癌细胞增殖抑制作用 | 第64-65页 |
| 2.6 两药联用对 ESCC 细胞中相关蛋白表达影响 | 第65-67页 |
| 3 讨论 | 第67-70页 |
| 全文总结 | 第70页 |
| 本研究展望 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-74页 |
| 致谢 | 第74-76页 |
| 个人简历 | 第76页 |
| 教育背景 | 第76页 |
| 硕士期间发表及待发表的论文 | 第76页 |
