| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 第一章 实验材料 | 第11-13页 |
| ·药物及试剂 | 第11-12页 |
| ·主要仪器 | 第12页 |
| ·实验细胞和菌株 | 第12-13页 |
| 第二章 实验方法 | 第13-30页 |
| ·含有TNF-α基因的pGC-FU-TNF-α质粒的构建 | 第13-19页 |
| ·逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第13-15页 |
| ·目的基因TNF-α PCR产物及慢病毒载体的DNA质粒载体的AgeⅠ酶切 | 第15页 |
| ·TNF-αcDNA与质粒载体pGC-FU-EGFP的连接 | 第15-16页 |
| ·连接产物导入大肠杆菌 | 第16-17页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第17-18页 |
| ·重组质粒抽提 | 第18-19页 |
| ·慢病毒包装以及滴度检测 | 第19-26页 |
| ·病毒包装细胞293T的培养 | 第19-20页 |
| ·细胞转染 | 第20页 |
| ·重组慢病毒的收获及浓缩 | 第20-21页 |
| ·Westernblot检测目的基因TNF-α的表达 | 第21-24页 |
| ·慢病毒滴度测定 | 第24-26页 |
| ·慢病毒感染脐血间质干细胞 | 第26-27页 |
| ·脐血间质干细胞培养 | 第26页 |
| ·慢病毒感染脐血间质干细胞预实验 | 第26-27页 |
| ·慢病毒感染脐血间质干细胞 | 第27页 |
| ·检测脐血间质干细胞中TNF-α的表达情况 | 第27-29页 |
| ·Elisa检测细胞上清中TNF-α含量 | 第27-28页 |
| ·RT-PCR检测脐血间质干细胞TNF-α mRNA的表达情况 | 第28-29页 |
| ·统计学方法 | 第29-30页 |
| 第三章 实验结果 | 第30-33页 |
| ·慢病毒载体表达质粒pGC-FU-TNF-α构建 | 第30页 |
| ·目的基因TNF-α获得 | 第30页 |
| ·成纤维细胞的形态学观察 | 第30页 |
| ·三质粒共转染293T细胞EGFP的表达 | 第30页 |
| ·westernblot检测慢病毒转染293T细胞的TNF-α含量 | 第30页 |
| ·重组慢病毒的包装和病毒滴度 | 第30-31页 |
| ·慢病毒感染人脐血间质干细胞表达情况 | 第31页 |
| ·Elisa检测上清液中TNF-α含量 | 第31-32页 |
| ·RT-PCR检测脐血间质干细胞中TNF-α mRNA表达 | 第32-33页 |
| 讨论 | 第33-35页 |
| 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-38页 |
| 附图 | 第38-44页 |
| 综述 | 第44-58页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第58-59页 |
| 中英文对照 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-62页 |
