| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩写表 | 第8-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.1 高油酸油菜的意义 | 第12-13页 |
| 1.2 油菜育种概况 | 第13-14页 |
| 1.2.1 我国油菜育种的历史 | 第13页 |
| 1.2.2 高油酸油菜育种现状 | 第13-14页 |
| 1.3 植物油脂简介 | 第14-16页 |
| 1.3.1 饱和脂肪酸合成 | 第14-15页 |
| 1.3.2 三酰甘油的合成 | 第15页 |
| 1.3.3 植物脂肪酸去饱和 | 第15-16页 |
| 1.4 脂肪酸去饱和关键酶 | 第16-17页 |
| 1.5 油酸去饱和酶基因fad2 | 第17-18页 |
| 1.6 高油酸相关基因BnaLCR78 | 第18-19页 |
| 1.7 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-28页 |
| 2.1 材料和试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 菌株及载体 | 第20页 |
| 2.1.4 常用溶液及缓冲液 | 第20-21页 |
| 2.1.5 实验仪器及设备 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-28页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第21页 |
| 2.2.2 油菜基因组DNA提取 | 第21-22页 |
| 2.2.3 油菜总RNA提取 | 第22页 |
| 2.2.4 琼脂糖凝胶电泳检测RNA | 第22页 |
| 2.2.5 cDNA第一条链的合成 | 第22-23页 |
| 2.2.6 目的基因PCR扩增 | 第23-24页 |
| 2.2.7 目的片段的回收纯化 | 第24页 |
| 2.2.8 目的片段与TA克隆 | 第24-25页 |
| 2.2.9 阳性克隆筛选 | 第25页 |
| 2.2.10 测序分析 | 第25页 |
| 2.2.11 生物信息学分析 | 第25-26页 |
| 2.2.12 实时荧光定量PCR | 第26页 |
| 2.2.13 RNAi载体构建 | 第26-28页 |
| 3 实验结果与分析 | 第28-52页 |
| 3.1 高油酸甘蓝型油菜基因组DNA和总RNA的提取 | 第28-30页 |
| 3.2 Bnfad2基因克隆 | 第30-33页 |
| 3.2.1 基因扩增与产物回收 | 第30页 |
| 3.2.2 Bnfad2基因片段序列同源性分析 | 第30-33页 |
| 3.3 BnFAD2蛋白预测序列分析 | 第33-36页 |
| 3.3.1 BnFAD2蛋白跨膜结构域分析及亚细胞定位 | 第33页 |
| 3.3.2 FAD2蛋白功能结构域分析 | 第33-35页 |
| 3.3.3 FAD2蛋白序列多重比对 | 第35-36页 |
| 3.4 Bnfad2基因表达和载体构建 | 第36-42页 |
| 3.4.1 Bnfad2在不同组织中的表达 | 第36-39页 |
| 3.4.2 Bnfad2 RNAi载体构建 | 第39-42页 |
| 3.5 BnaLCR78基因克隆 | 第42-46页 |
| 3.5.1 BnaLCR78基因组序列克隆 | 第42-43页 |
| 3.5.2 BnaLCR78基因的cDNA序列克隆 | 第43-45页 |
| 3.5.3 BnaLCR78基因同源性分析 | 第45-46页 |
| 3.6 BnaLCR78蛋白预测序列分析 | 第46-48页 |
| 3.6.1 BnaLCR78蛋白预测序列同源性 | 第46-48页 |
| 3.6.2 BnaLCR78蛋白结构预测 | 第48页 |
| 3.7 BnaLCR78基因的表达和载体构建 | 第48-52页 |
| 3.7.1 BnaLCR78在不同组织中的表达 | 第48-50页 |
| 3.7.2 RNAi载体构建 | 第50-52页 |
| 4 讨论与结论 | 第52-60页 |
| 4.1 Bnfad2基因的结果讨论 | 第52-55页 |
| 4.1.1 Bnfad2基因克隆 | 第52页 |
| 4.1.2 BnFAD2蛋白预测 | 第52-53页 |
| 4.1.3 Bnfad2表达模式分析 | 第53-54页 |
| 4.1.4 Bnfad2 RNAi载体构建 | 第54-55页 |
| 4.2 BnaLCR78基因的结果讨论 | 第55-58页 |
| 4.2.1 BnaLCR78基因克隆和蛋白预测 | 第55-56页 |
| 4.2.2 BnaLCR78基因表达模式分析 | 第56-57页 |
| 4.2.3 BnaLCR78 RNAi载体构建 | 第57-58页 |
| 4.3 结论 | 第58-60页 |
| 附录 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
