中文摘要 | 第5-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
中英文缩略词 | 第9-10页 |
1 前言 | 第10-13页 |
2 材料和方法 | 第13-32页 |
2.1 实验材料 | 第13-16页 |
2.1.1 主要试剂及其配置 | 第13-14页 |
2.1.2 细胞系 | 第14-15页 |
2.1.3 实验设备 | 第15-16页 |
2.2 实验方法 | 第16-32页 |
2.2.1 基因线路示意图及相关序列 | 第16-19页 |
2.2.2 细胞培养 | 第19-21页 |
2.2.3 细胞转染 | 第21-22页 |
2.2.4 实时荧光定量PCR | 第22-25页 |
2.2.5 质粒提取 | 第25-27页 |
2.2.6 双荧光素酶报告实验 | 第27-28页 |
2.2.7 CCK检测细胞增殖法 | 第28页 |
2.2.8 细胞迁移实验 | 第28-29页 |
2.2.9 Transwell细胞侵袭实验 | 第29-30页 |
2.2.10 流式细胞术 | 第30-31页 |
2.2.11 统计学分析 | 第31-32页 |
3 结果 | 第32-43页 |
3.1 增强型hTERT启动子在各细胞系中的启动子活性、GAL4-P65与GAL4-VP64对UAS激活效果的比较 | 第32-33页 |
3.1.1 增强型hTERT启动子在各细胞系中的启动子活性 | 第32页 |
3.1.2 GAL4-P65与GAL4-VP64对UAS激活效果的比较 | 第32-33页 |
3.2 调控元件对HRAS基因的影响 | 第33-35页 |
3.2.1 调控元件对HRAS基因的表达调控 | 第33-34页 |
3.2.2 调控元件对HRAS基因靶位点的剪切作用 | 第34-35页 |
3.3 调控元件对膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响 | 第35-43页 |
3.3.1 调控元件对膀胱癌细胞增殖的影响 | 第35-36页 |
3.3.2 调控元件对膀胱癌细胞迁移的影响 | 第36-38页 |
3.3.3 调控元件对膀胱癌细胞侵袭的影响 | 第38-40页 |
3.3.4 调控元件对膀胱癌细胞凋亡的影响 | 第40-43页 |
4 讨论与结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-50页 |
附录 | 第50-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
综述 CRISPR/Cas9在基因编辑工具开发中的应用 | 第53-63页 |
参考文献 | 第59-63页 |