摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
综述 | 第8-21页 |
1. 滞绿与滞绿突变体 | 第8-9页 |
·滞绿的概念 | 第8页 |
·滞绿突变体的类型 | 第8-9页 |
·滞绿突变体的应用前景 | 第9页 |
2. 叶绿素降解代谢的关键调控蛋白NYE1 | 第9-10页 |
3. 叶绿素降解 | 第10-13页 |
·叶绿素的降解途径 | 第10-12页 |
·叶绿素降解途径中的酶 | 第12-13页 |
·叶绿素降解的意义 | 第13页 |
4. 植物衰老相关的调控转录因_子 | 第13-14页 |
·植物衰老 | 第13-14页 |
·NAC转录因子与衰老调控转录因子AtNAP | 第14页 |
5. cDNA末端快速扩增技术(RACE) | 第14-19页 |
·3’-RACE的原理 | 第15-16页 |
·5’-RACE的原理 | 第16-19页 |
6. 草坪型高羊茅 | 第19-21页 |
材料和方法 | 第21-53页 |
第一章 高羊茅中AtNYE1同源基因的克隆及其功能研究 | 第21-44页 |
1. 实验材料 | 第21-22页 |
·植物材料与生长条件 | 第21页 |
·菌种 | 第21页 |
·载体 | 第21页 |
·试剂和培养基 | 第21-22页 |
2. 实验方法 | 第22-44页 |
·RNA提取 | 第22页 |
·RNA检测 | 第22-23页 |
·RNA定量 | 第23页 |
·cDNA第一链合成和反转录PCR | 第23-24页 |
·RT-PCR扩增FaNYE1基因保守片断 | 第24页 |
·DNA片段的回收、连接、克隆和测序 | 第24-27页 |
·FaNYE1的3’末端序列的扩增 | 第27-29页 |
·5’RACE法扩增FaNYE15’末端序列 | 第29-32页 |
·FaNYE1全长cDNA序列的获得 | 第32页 |
·FaNYE1基因组序列的获得 | 第32-33页 |
·DNA和蛋白序列生物信息学分析 | 第33页 |
·FaNYE1表达模式分析 | 第33-35页 |
·FaNYE1互补拟南芥突变体nye1-1 | 第35-40页 |
·野生型拟南芥中过表达FaNYE1 | 第40-41页 |
·高羊茅FaNYE1 RNAi | 第41-44页 |
第二章 高羊茅中AtNAP同源基因的克隆及其功能研究 | 第44-53页 |
1. 材料 | 第44页 |
2. 实验方法 | 第44-53页 |
·高羊茅RNA抽提、检测、定量以及第一链cDNA的合成 | 第44页 |
·RT-PCR扩增FaNAP基因保守片断 | 第44页 |
·FaNAP 3’末端序列的扩增 | 第44-46页 |
·FaNAP 5’末端序列的扩增 | 第46-48页 |
·FaNAP全长cDNA序列的获得 | 第48页 |
·FaNYE1基因组序列的获得 | 第48-49页 |
·DNA和蛋白序列生物信息学分析 | 第49页 |
·FaNAP表达模式的分析 | 第49-50页 |
·FaNAP互补拟南芥nap突变体 | 第50-51页 |
·野生型拟南芥中组成型过表达FaNAP | 第51-53页 |
实验结果 | 第53-71页 |
第一章 高羊茅中AtNYE1同源基因的分离及其功能分析 | 第53-63页 |
1. FaNYE1全长cDNA序列的获得 | 第53-54页 |
2. FaNYE1基因组序列的获得 | 第54-55页 |
3. FaNYE1生物信息学分析 | 第55-58页 |
·一级结构序列分析 | 第55页 |
·二级结构预测 | 第55-56页 |
·亚细胞定位预测 | 第56页 |
·FaNYE1与其他物种来源的NYE1蛋白的多重序列比对分析 | 第56-57页 |
·FaNYE1的系统进化树分析 | 第57-58页 |
4. FaNYE1表达模式分析 | 第58-60页 |
5. FaNYE1能够异源互补拟南芥滞绿突变体nye1-1 | 第60-61页 |
6. 组成型过表达FaNYE1能够明显促进叶绿素降解 | 第61-63页 |
第二章 高羊茅中AtNAP同源基因的克隆及其功能研究 | 第63-71页 |
1. FaNAP全长cDNA序列的获得 | 第63-64页 |
2. FaNAP基因组序列的获得 | 第64-65页 |
3. FaNAP生物信息学分析 | 第65-67页 |
·一级结构序列分析 | 第65页 |
·二级结构序列分析 | 第65-66页 |
·多重序列比对 | 第66页 |
·FaNAP的系统进化树分析 | 第66-67页 |
4. FaNAP表达模式的分析 | 第67-68页 |
5. FaNAP能够互补拟南芥nap突变体 | 第68-69页 |
6. 过表达FaNAP能够显著促进植物叶片的衰老进程 | 第69-71页 |
讨论 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-78页 |
致谢 | 第78-79页 |