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金丝小枣三萜类化合物的提取和鉴定以及抗前列腺癌活性研究

中文摘要第15-17页
ABSTRACT第17-19页
符号说明第20-21页
第一章 绪论第21-36页
    1. 红枣第21-27页
        1.1 红枣中的主要营养成分及生物活性成分第21-26页
            1.1.1 三萜类化合物第22-23页
            1.1.2 多糖类化合物第23-24页
            1.1.3 黄酮类化合物第24页
            1.1.4 多酚类化合物第24-25页
            1.1.5 核苷酸类第25-26页
            1.1.6 其他生物活性成分第26页
        1.2 金丝小枣生物活性物质的研究现状第26-27页
            1.2.1 抑制癌细胞第26页
            1.2.2 增强免疫力第26-27页
            1.2.3 降血脂第27页
            1.2.4 抗氧化第27页
            1.2.5 保肝第27页
            1.2.6 其他作用第27页
    2. 三萜类化合物概述第27-32页
        2.1 三萜的理化性质与结构特征第27-28页
        2.2 三萜的提取方法第28-29页
            2.2.1 溶剂回流提取法第28页
            2.2.2 超声波提取法第28-29页
            2.2.3 微波辅助萃取法第29页
            2.2.4 超临界流体萃取法第29页
        2.3 三萜的分离及纯化第29-30页
            2.3.1 溶剂法第29页
            2.3.2 沉淀法第29-30页
            2.3.3 大孔树脂法第30页
            2.3.4 硅胶柱层析第30页
        2.4 三萜的分析方法第30-32页
            2.4.1 显色反应第30-31页
            2.4.2 溶血现象第31页
            2.4.3 泡沫试验第31页
            2.4.4 薄层色谱第31页
            2.4.5 分光光度法第31页
            2.4.6 高效液相色谱法第31-32页
        2.5 三萜的生物活性第32页
    3. 前列腺癌第32-34页
        3.1 前列腺癌的流行病学第32页
        3.2 前列腺癌的危险因素第32-33页
            3.2.1 不可改变危险因素第32-33页
            3.2.2 可改变危险因素第33页
        3.3 前列腺癌的治疗第33-34页
            3.3.1 激素类药物第33-34页
            3.3.2 细胞毒性类药物第34页
            3.3.3 免疫治疗第34页
            3.3.4 中医药治疗第34页
    4. 本章小结第34-36页
        4.1 本课题的研究意义第34-35页
        4.2 本课题主要研究内容第35-36页
第二章 金丝小枣三萜化合物的提取分离及鉴定第36-52页
    1. 仪器与材料第36-37页
        1.1 实验仪器第36页
        1.2 实验材料第36-37页
    2. 实验方法第37-43页
        2.1 总三萜的定性鉴别第37-38页
            2.1.1 薄层色谱分析第37页
            2.1.2 Salko wsk反应第37-38页
            2.1.3 Lieberman-Burchard反应第38页
        2.2 香草醛冰醋酸显色分光光度法测定总三萜的含量第38-39页
            2.2.1 溶液的配制第38页
            2.2.2 测定方法第38页
            2.2.3 测定波长的选择第38页
            2.2.4 标准曲线的制备第38-39页
            2.2.5 样品测定第39页
        2.3 总三萜提取条件的优化第39-41页
            2.3.1 提取溶剂的影响第39-40页
            2.3.2 乙醇浓度的影响第40页
            2.3.3 料液比的影响第40页
            2.3.4 提取时间的影响第40-41页
        2.4 金丝小枣总三萜的纯化第41-43页
            2.4.1 碱处理对三萜纯化的影响第41-42页
            2.4.2 酸的浓度对纯化的影响第42页
            2.4.3 过硅胶柱纯化总三萜第42页
            2.4.4 MCI柱层析第42-43页
    3. 实验结果第43-51页
        3.1 香草醛冰醋酸显色分光光度法测定总三萜的含量第43-44页
            3.1.1 测定波长的选择第43页
            3.1.2 标准曲线的制备第43-44页
        3.2 总三萜提取条件的优化第44-48页
            3.2.1 提取溶剂的影响第44-45页
            3.2.2 乙醇浓度的影响第45-46页
            3.2.3 料液比的影响第46-47页
            3.2.4 提取时间的影响第47-48页
        3.3 金丝小枣总三萜的纯化第48-50页
            3.3.1 碱处理对三萜纯化的影响第48-49页
            3.3.2 酸的浓度对纯化的影响第49页
            3.3.3 过硅胶柱纯化总三萜第49-50页
            3.3.4 MCI柱层析第50页
        3.4 定性分析检测第50-51页
            3.4.1 Salkowsk反应第50页
            3.4.2 Lieberman-Burchard反应第50-51页
    4. 本章讨论与小结第51-52页
第三章 HPLC/MS鉴定总三萜的组分第52-64页
    1. 仪器与材料第52页
        1.1 实验仪器第52页
        1.2 实验材料第52页
    2. 实验方法第52-55页
        2.1 溶液的配制第52-53页
            2.1.1 对照品溶液的配制第52-53页
            2.1.2 供试品溶液的配制第53页
        2.2 三萜类化合物的定性分析第53页
        2.3 三萜类化合物的定量分析第53-54页
        2.4 HPLC方法学验证第54-55页
            2.4.1 标准曲线及线性范围第54页
            2.4.2 灵敏度第54页
            2.4.3 精密度第54页
            2.4.4 重复性第54页
            2.4.5 稳定性第54-55页
            2.4.6 加标回收率第55页
        2.5 HPLC法测定红枣三萜的含量第55页
    3. 实验结果第55-62页
        3.1 定性分析第55-57页
        3.2 方法学验证第57-60页
            3.2.1 线性范围、检测限和定量限第57-58页
            3.2.2 精密度、重复性和稳定性第58页
            3.2.3 加标回收率第58-60页
        3.3 HPLC法测定金丝小枣三萜提取物的含量第60-62页
    4. 本章讨论与小结第62-64页
第四章 金丝小枣三萜体外抗前列腺癌活性及机制研究第64-83页
    1. 仪器与材料第64-65页
        1.1 实验仪器第64页
        1.2 实验材料第64-65页
        1.3 细胞第65页
        1.4 实验溶液的配制第65页
    2. 实验方法第65-72页
        2.1 细胞的培养及传代第65-66页
        2.2 肿瘤细胞活力测定第66-67页
        2.3 细胞周期检测第67页
        2.4 AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡第67-68页
        2.5 活性氧含量测定第68-69页
        2.6 线粒体膜电位检测第69-70页
        2.7 Caspase3/8/9活性检测第70-72页
            2.7.1 蛋白浓度的测定第70-71页
            2.7.2 Caspase3/8/9的测定第71-72页
        2.8 统计分析第72页
    3. 实验结果第72-81页
        3.1 三萜提取物对前列腺癌PC-3细胞增殖的影响第73-74页
        3.2 三萜提取物对前列腺癌PC-3细胞周期的影响第74-75页
        3.3 三萜提取物对前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响第75-76页
        3.4 三萜提取物对前列腺癌PC3细胞中ROS的影响第76-78页
        3.5 三萜提取物对前列腺癌PC3细胞线粒体膜电位的影响第78-80页
        3.6 三萜提取物对前列腺癌PC3细胞中Caspase的影响第80-81页
    4. 本章讨论与小结第81-83页
全文总结第83-85页
附录 化合物的ESI-MS图谱第85-92页
参考文献第92-103页
致谢第103-104页
攻读学位期间发表的学术论文目录第104-105页
学位论文评阅及答辩情况表第105页

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