中文摘要 | 第15-17页 |
ABSTRACT | 第17-19页 |
符号说明 | 第20-21页 |
第一章 绪论 | 第21-36页 |
1. 红枣 | 第21-27页 |
1.1 红枣中的主要营养成分及生物活性成分 | 第21-26页 |
1.1.1 三萜类化合物 | 第22-23页 |
1.1.2 多糖类化合物 | 第23-24页 |
1.1.3 黄酮类化合物 | 第24页 |
1.1.4 多酚类化合物 | 第24-25页 |
1.1.5 核苷酸类 | 第25-26页 |
1.1.6 其他生物活性成分 | 第26页 |
1.2 金丝小枣生物活性物质的研究现状 | 第26-27页 |
1.2.1 抑制癌细胞 | 第26页 |
1.2.2 增强免疫力 | 第26-27页 |
1.2.3 降血脂 | 第27页 |
1.2.4 抗氧化 | 第27页 |
1.2.5 保肝 | 第27页 |
1.2.6 其他作用 | 第27页 |
2. 三萜类化合物概述 | 第27-32页 |
2.1 三萜的理化性质与结构特征 | 第27-28页 |
2.2 三萜的提取方法 | 第28-29页 |
2.2.1 溶剂回流提取法 | 第28页 |
2.2.2 超声波提取法 | 第28-29页 |
2.2.3 微波辅助萃取法 | 第29页 |
2.2.4 超临界流体萃取法 | 第29页 |
2.3 三萜的分离及纯化 | 第29-30页 |
2.3.1 溶剂法 | 第29页 |
2.3.2 沉淀法 | 第29-30页 |
2.3.3 大孔树脂法 | 第30页 |
2.3.4 硅胶柱层析 | 第30页 |
2.4 三萜的分析方法 | 第30-32页 |
2.4.1 显色反应 | 第30-31页 |
2.4.2 溶血现象 | 第31页 |
2.4.3 泡沫试验 | 第31页 |
2.4.4 薄层色谱 | 第31页 |
2.4.5 分光光度法 | 第31页 |
2.4.6 高效液相色谱法 | 第31-32页 |
2.5 三萜的生物活性 | 第32页 |
3. 前列腺癌 | 第32-34页 |
3.1 前列腺癌的流行病学 | 第32页 |
3.2 前列腺癌的危险因素 | 第32-33页 |
3.2.1 不可改变危险因素 | 第32-33页 |
3.2.2 可改变危险因素 | 第33页 |
3.3 前列腺癌的治疗 | 第33-34页 |
3.3.1 激素类药物 | 第33-34页 |
3.3.2 细胞毒性类药物 | 第34页 |
3.3.3 免疫治疗 | 第34页 |
3.3.4 中医药治疗 | 第34页 |
4. 本章小结 | 第34-36页 |
4.1 本课题的研究意义 | 第34-35页 |
4.2 本课题主要研究内容 | 第35-36页 |
第二章 金丝小枣三萜化合物的提取分离及鉴定 | 第36-52页 |
1. 仪器与材料 | 第36-37页 |
1.1 实验仪器 | 第36页 |
1.2 实验材料 | 第36-37页 |
2. 实验方法 | 第37-43页 |
2.1 总三萜的定性鉴别 | 第37-38页 |
2.1.1 薄层色谱分析 | 第37页 |
2.1.2 Salko wsk反应 | 第37-38页 |
2.1.3 Lieberman-Burchard反应 | 第38页 |
2.2 香草醛冰醋酸显色分光光度法测定总三萜的含量 | 第38-39页 |
2.2.1 溶液的配制 | 第38页 |
2.2.2 测定方法 | 第38页 |
2.2.3 测定波长的选择 | 第38页 |
2.2.4 标准曲线的制备 | 第38-39页 |
2.2.5 样品测定 | 第39页 |
2.3 总三萜提取条件的优化 | 第39-41页 |
2.3.1 提取溶剂的影响 | 第39-40页 |
2.3.2 乙醇浓度的影响 | 第40页 |
2.3.3 料液比的影响 | 第40页 |
2.3.4 提取时间的影响 | 第40-41页 |
2.4 金丝小枣总三萜的纯化 | 第41-43页 |
2.4.1 碱处理对三萜纯化的影响 | 第41-42页 |
2.4.2 酸的浓度对纯化的影响 | 第42页 |
2.4.3 过硅胶柱纯化总三萜 | 第42页 |
2.4.4 MCI柱层析 | 第42-43页 |
3. 实验结果 | 第43-51页 |
3.1 香草醛冰醋酸显色分光光度法测定总三萜的含量 | 第43-44页 |
3.1.1 测定波长的选择 | 第43页 |
3.1.2 标准曲线的制备 | 第43-44页 |
3.2 总三萜提取条件的优化 | 第44-48页 |
3.2.1 提取溶剂的影响 | 第44-45页 |
3.2.2 乙醇浓度的影响 | 第45-46页 |
3.2.3 料液比的影响 | 第46-47页 |
3.2.4 提取时间的影响 | 第47-48页 |
3.3 金丝小枣总三萜的纯化 | 第48-50页 |
3.3.1 碱处理对三萜纯化的影响 | 第48-49页 |
3.3.2 酸的浓度对纯化的影响 | 第49页 |
3.3.3 过硅胶柱纯化总三萜 | 第49-50页 |
3.3.4 MCI柱层析 | 第50页 |
3.4 定性分析检测 | 第50-51页 |
3.4.1 Salkowsk反应 | 第50页 |
3.4.2 Lieberman-Burchard反应 | 第50-51页 |
4. 本章讨论与小结 | 第51-52页 |
第三章 HPLC/MS鉴定总三萜的组分 | 第52-64页 |
1. 仪器与材料 | 第52页 |
1.1 实验仪器 | 第52页 |
1.2 实验材料 | 第52页 |
2. 实验方法 | 第52-55页 |
2.1 溶液的配制 | 第52-53页 |
2.1.1 对照品溶液的配制 | 第52-53页 |
2.1.2 供试品溶液的配制 | 第53页 |
2.2 三萜类化合物的定性分析 | 第53页 |
2.3 三萜类化合物的定量分析 | 第53-54页 |
2.4 HPLC方法学验证 | 第54-55页 |
2.4.1 标准曲线及线性范围 | 第54页 |
2.4.2 灵敏度 | 第54页 |
2.4.3 精密度 | 第54页 |
2.4.4 重复性 | 第54页 |
2.4.5 稳定性 | 第54-55页 |
2.4.6 加标回收率 | 第55页 |
2.5 HPLC法测定红枣三萜的含量 | 第55页 |
3. 实验结果 | 第55-62页 |
3.1 定性分析 | 第55-57页 |
3.2 方法学验证 | 第57-60页 |
3.2.1 线性范围、检测限和定量限 | 第57-58页 |
3.2.2 精密度、重复性和稳定性 | 第58页 |
3.2.3 加标回收率 | 第58-60页 |
3.3 HPLC法测定金丝小枣三萜提取物的含量 | 第60-62页 |
4. 本章讨论与小结 | 第62-64页 |
第四章 金丝小枣三萜体外抗前列腺癌活性及机制研究 | 第64-83页 |
1. 仪器与材料 | 第64-65页 |
1.1 实验仪器 | 第64页 |
1.2 实验材料 | 第64-65页 |
1.3 细胞 | 第65页 |
1.4 实验溶液的配制 | 第65页 |
2. 实验方法 | 第65-72页 |
2.1 细胞的培养及传代 | 第65-66页 |
2.2 肿瘤细胞活力测定 | 第66-67页 |
2.3 细胞周期检测 | 第67页 |
2.4 AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡 | 第67-68页 |
2.5 活性氧含量测定 | 第68-69页 |
2.6 线粒体膜电位检测 | 第69-70页 |
2.7 Caspase3/8/9活性检测 | 第70-72页 |
2.7.1 蛋白浓度的测定 | 第70-71页 |
2.7.2 Caspase3/8/9的测定 | 第71-72页 |
2.8 统计分析 | 第72页 |
3. 实验结果 | 第72-81页 |
3.1 三萜提取物对前列腺癌PC-3细胞增殖的影响 | 第73-74页 |
3.2 三萜提取物对前列腺癌PC-3细胞周期的影响 | 第74-75页 |
3.3 三萜提取物对前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响 | 第75-76页 |
3.4 三萜提取物对前列腺癌PC3细胞中ROS的影响 | 第76-78页 |
3.5 三萜提取物对前列腺癌PC3细胞线粒体膜电位的影响 | 第78-80页 |
3.6 三萜提取物对前列腺癌PC3细胞中Caspase的影响 | 第80-81页 |
4. 本章讨论与小结 | 第81-83页 |
全文总结 | 第83-85页 |
附录 化合物的ESI-MS图谱 | 第85-92页 |
参考文献 | 第92-103页 |
致谢 | 第103-104页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第104-105页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第105页 |