| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-42页 |
| 1.1 引言 | 第12页 |
| 1.2 国内外悬铃木研究现状 | 第12-13页 |
| 1.3 植物花发育的分子机理 | 第13-31页 |
| 1.3.1 成花诱导 | 第13-23页 |
| 1.3.1.1 光周期途径 | 第14-17页 |
| 1.3.1.2 春化途径 | 第17-19页 |
| 1.3.1.3 自主途径 | 第19-20页 |
| 1.3.1.4 赤霉素途径 | 第20-22页 |
| 1.3.1.5 开花途径的整合 | 第22-23页 |
| 1.3.2 花的发端 | 第23-25页 |
| 1.3.3 花器官的发育 | 第25-31页 |
| 1.3.3.1 植物中的MADS-box家族介绍 | 第25-27页 |
| 1.3.3.2 花发育模型介绍 | 第27-29页 |
| 1.3.3.3 花发育模型中各MADS基因亚家族 | 第29-31页 |
| 1.4 FT、TSF基因研究进展 | 第31-35页 |
| 1.4.1 开花素假说揭秘 | 第31页 |
| 1.4.2 与植物开花相关的PEBP成员 | 第31-33页 |
| 1.4.3 FT/TSF调控网络 | 第33-34页 |
| 1.4.4 植物体内的FT蛋白运输 | 第34-35页 |
| 1.5 选择性剪切 | 第35-37页 |
| 1.6 启动子的应用 | 第37-40页 |
| 1.7 本课题的研究目的与意义 | 第40-42页 |
| 第二章 悬铃木FT/TSF同源基因的克隆,表达分析及功能研究 | 第42-69页 |
| 2.1 前言 | 第42页 |
| 2.2 材料 | 第42-43页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第42页 |
| 2.2.2 菌株和载体 | 第42页 |
| 2.2.3 主要分子生物学试剂 | 第42-43页 |
| 2.2.4 主要仪器设备 | 第43页 |
| 2.3 方法 | 第43-47页 |
| 2.3.1 基因克隆 | 第43-45页 |
| 2.3.1.1 基因组DNA、RNA提取及用于基因克隆的双链cDNA合成 | 第43页 |
| 2.3.1.2 引物设计及扩增 | 第43-45页 |
| 2.3.2 序列分析以及系统进化分析 | 第45页 |
| 2.3.3 时空表达分析 | 第45-46页 |
| 2.3.4 载体构建及模式植物转化 | 第46-47页 |
| 2.4 结果与分析 | 第47-64页 |
| 2.4.1 PaFT的分子克隆与序列分析 | 第47-51页 |
| 2.4.2 PaFT的选择性剪切分析 | 第51-53页 |
| 2.4.3 PaTSF的分子克隆与序列分析 | 第53-55页 |
| 2.4.4 PaFT与PaTSF的系统进化分析 | 第55-56页 |
| 2.4.5 PaFT与PaTSF的时空表达分析 | 第56-59页 |
| 2.4.6 PaFT与PaTSF超量表达载体的构建及异源表达试验分析 | 第59-64页 |
| 2.5 讨论 | 第64-69页 |
| 2.5.1 PaFT为非典型的FT同源基因 | 第64-65页 |
| 2.5.2 PaFT与PaTSF互为姐妹基因,在二球悬铃木中可能具有不同的生物学功能 | 第65-69页 |
| 第三章 二球悬铃木PI,AG同源基因的克隆,表达分析及功能研究 | 第69-93页 |
| 3.1 前言 | 第69页 |
| 3.2 材料 | 第69页 |
| 3.3 方法 | 第69-73页 |
| 3.3.1 基因克隆 | 第69-70页 |
| 3.3.1.1 基因组DNA、RNA提取及用于基因克隆的双链cDNA合成 | 第69页 |
| 3.3.1.2 引物设计及扩增 | 第69-70页 |
| 3.3.2 序列分析以及进化树分析 | 第70-71页 |
| 3.3.3 PaPI时空表达分析 | 第71页 |
| 3.3.4 载体构建及模式植物转化 | 第71-72页 |
| 3.3.5 酵母双杂交试验 | 第72-73页 |
| 3.3.5.1 融合表达载体构建 | 第72页 |
| 3.3.5.2 LiAc介导的酵母共转化法 | 第72-73页 |
| 3.3.5.3 蛋白质互作检测 | 第73页 |
| 3.4 结果与分析 | 第73-87页 |
| 3.4.1 PaPI的分子克隆与序列分析 | 第73-77页 |
| 3.4.2 PaAG的分子克隆与序列分析 | 第77-79页 |
| 3.4.3 PaPI的系统进化分析 | 第79-80页 |
| 3.4.4 PaPI在二球悬铃木中的时空表达分析 | 第80-82页 |
| 3.4.5 在烟草中组成型表达正义与反义PaPI | 第82-84页 |
| 3.4.6 在烟草中组成型表达正义与反义PaAG | 第84-86页 |
| 3.4.7 二球悬铃木B类MADS-box蛋白的互作研究 | 第86-87页 |
| 3.5 讨论 | 第87-93页 |
| 3.5.1 不同PaPI基因拷贝的起源推测 | 第87-89页 |
| 3.5.2 PI同源基因在二球悬铃木中的功能探讨 | 第89-91页 |
| 3.5.3 PaAG在二球悬铃木中的功能探讨 | 第91-93页 |
| 第四章 启动子策略的应用 | 第93-102页 |
| 4.1 前言 | 第93页 |
| 4.2 材料 | 第93页 |
| 4.3 方法 | 第93-95页 |
| 4.3.1 复合载体(pMOG22-PaFT1A-BpFULL1::BARNASE)构建及烟草转化 | 第93页 |
| 4.3.2 PaAG启动子的克隆 | 第93-95页 |
| 4.4 结果与分析 | 第95-99页 |
| 4.4.1 复合载体(pMOG22-PaFT1A-BpFULL1::BARNASE)的构建及转基因烟草的表型观测 | 第95-97页 |
| 4.4.2 PaAG启动子的克隆及序列分析 | 第97-99页 |
| 4.5 讨论 | 第99-102页 |
| 4.5.1 复合载体(pMOG22-PaFT1A-BpFULL1::BARNASE)的应用可能 | 第99-100页 |
| 4.5.2 PaAG启动子在二球悬铃木育种中的应用价值 | 第100-102页 |
| 第五章 讨论与展望 | 第102-104页 |
| 5.1 PaFT与PaTSF在育种中的应用前景 | 第102页 |
| 5.2 PaPI与PaAG在悬铃木育种中的应用前景 | 第102-103页 |
| 5.3 启动子策略在悬铃木育种中的应用前景 | 第103页 |
| 5.4 选择性剪切的研究 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-128页 |
| 附录1 基因组DNA的提取 | 第128-129页 |
| 附录2 碱裂解法提取质粒DNA(小量法) | 第129-130页 |
| 附录3 大肠杆菌热激感受态的制备及热激法转化 | 第130-131页 |
| 附录4 农杆菌电转感受态的制备 | 第131页 |
| 附录5 GENEBANK注册基因登录号 | 第131-132页 |
| 博士在读期间已发表或拟发表文章 | 第132-133页 |
| 致谢 | 第133页 |
