| 前言 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 英文缩写词表 | 第16-17页 |
| 第一篇 文献综述 | 第17-39页 |
| 第一章 抗菌肽研究开发的挑战与新策略 | 第17-31页 |
| 1 抗菌肽的研究应用现状 | 第17-22页 |
| 2 抗菌肽研究开发的新策略和动向 | 第22-26页 |
| 3 提高抗菌肽的稳定性和生物利用度 | 第26-27页 |
| 4 抗菌肽给药模式 | 第27-28页 |
| 5 降低抗菌肽规模化生产成本 | 第28-30页 |
| 6 临床新药监管体制和审批政策对抗菌肽临床应用的影响 | 第30页 |
| 7 展望 | 第30-31页 |
| 第二章 鲎素抗菌肽生物学活性研究进展 | 第31-39页 |
| 1 鲎素的分类及分子结构 | 第31-32页 |
| 2 鲎素的抑菌特性及机制 | 第32-34页 |
| 3 鲎素的抗病毒特性及机制 | 第34-35页 |
| 4 鲎素的抑瘤作用及机制 | 第35-36页 |
| 5 鲎素与其它分子间的协同作用及应用 | 第36-39页 |
| 第二篇 研究内容 | 第39-143页 |
| 第一章 鲎素的组成型酵母真核表达系统的构建 | 第39-57页 |
| 1 材料与方法 | 第40-48页 |
| 1.1 材料 | 第40-43页 |
| 1.2 方法 | 第43-48页 |
| 2 结果 | 第48-53页 |
| 2.1 重组质粒pGAPZαA-TP I的鉴定 | 第48-49页 |
| 2.2 序列测定结果 | 第49页 |
| 2.3 重组酵母菌株X33-GAP-TP I的PCR鉴定 | 第49-51页 |
| 2.4 重组菌株X33-GAP-TP I的分泌表达 | 第51页 |
| 2.5 发酵产物的活性鉴定 | 第51-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 3.1 关于鲎素 | 第53页 |
| 3.2 关于毕赤酵母表达系统pGAP和pAOX1 的比较 | 第53-55页 |
| 4 小结 | 第55-57页 |
| 第二章 鲎素的规模化制备 | 第57-75页 |
| 1 材料与方法 | 第57-60页 |
| 1.1 材料 | 第57-58页 |
| 1.2 方法 | 第58-60页 |
| 2 结果 | 第60-69页 |
| 2.1 响应面法优化重组鲎素酵母菌发酵工艺 | 第60-64页 |
| 2.2 X33-GAP-TP I酵母菌株的高密度发酵结果 | 第64-66页 |
| 2.3 重组鲎素浓缩冻干粉制备 | 第66-67页 |
| 2.4 重组鲎素的ESI-MS定性检测结果 | 第67-68页 |
| 2.5 重组鲎素的高效液相色谱法的定量检测结果 | 第68-69页 |
| 3 讨论 | 第69-74页 |
| 3.1 从摇瓶发酵到发酵罐发酵的放大过程 | 第69-71页 |
| 3.2 发酵过程的优化 | 第71-72页 |
| 3.3 关于小肽的检测 | 第72-74页 |
| 4 小结 | 第74-75页 |
| 第三章 鲎素单克隆抗体的制备 | 第75-83页 |
| 1 材料与方法 | 第75-78页 |
| 1.1 材料 | 第75页 |
| 1.2 方法 | 第75-78页 |
| 2 结果 | 第78-81页 |
| 2.1 鲎素单克隆抗体杂交瘤细胞的筛选及鉴定结果 | 第78页 |
| 2.2 TP I-Mab腹水纯化结果 | 第78-79页 |
| 2.3 单抗特异性鉴定结果 | 第79-80页 |
| 2.4 TP I、TP II及相关对照肽抗原性分析结果 | 第80页 |
| 2.5 重组鲎素毕赤酵母表达上清Western-blot鉴定结果 | 第80-81页 |
| 3 讨论 | 第81-82页 |
| 3.1 关于鲎素TP I单抗 | 第81-82页 |
| 3.2 抗菌肽单抗的制备与用途 | 第82页 |
| 4 小结 | 第82-83页 |
| 第四章 重组鲎素体外抑菌活性及对小鼠感染模型的治疗效果 | 第83-99页 |
| 1 材料与方法 | 第83-88页 |
| 1.1 材料 | 第83-86页 |
| 1.2 方法 | 第86-88页 |
| 2 结果 | 第88-95页 |
| 2.1 重组鲎素抑菌活性鉴定结果 | 第88-89页 |
| 2.2 重组鲎素的MIC测定结果 | 第89-91页 |
| 2.3 重组鲎素对耐药性金黄色葡萄球菌的抑菌效果 | 第91-92页 |
| 2.4 重组鲎素对金黄色葡萄球菌作用效果的扫描电镜观察结果 | 第92-93页 |
| 2.5 重组鲎素对小鼠表皮金葡菌感染模型治疗效果 | 第93-95页 |
| 3 讨论 | 第95-97页 |
| 3.1 关于重组鲎素的抑菌活性 | 第95-96页 |
| 3.2 关于重组鲎素对小鼠表皮金黄色葡萄球菌感染模型的治疗效果 | 第96-97页 |
| 4 小结 | 第97-99页 |
| 第五章 重组鲎素抗新城疫病毒活性及其作用机制 | 第99-121页 |
| 1 材料与方法 | 第99-107页 |
| 1.1 材料 | 第99-100页 |
| 1.2 方法 | 第100-107页 |
| 2 结果 | 第107-115页 |
| 2.1 重组鲎素对新城疫病毒不同复制阶段蚀斑形成的影响结果 | 第107-108页 |
| 2.2 荧光定量RT-PCR法考察重组鲎素对新城疫病毒不同复制阶段病毒载量的影响结果 | 第108-111页 |
| 2.3 重组鲎素对新城疫病毒吸附靶细胞膜过程中细胞膜电位变化的影响结果 | 第111-113页 |
| 2.4 重组鲎素对新城疫病毒吸附靶细胞膜过程中细胞膜流动性的影响结果 | 第113-115页 |
| 3 讨论 | 第115-119页 |
| 3.1 关于抗菌肽抗病毒的研究方法 | 第115页 |
| 3.2 关于病毒感染靶细胞后细胞的生理和病理变化 | 第115-118页 |
| 3.3 关于细胞膜电位的测量 | 第118-119页 |
| 4 小结 | 第119-121页 |
| 第六章 重组鲎素饲料添加剂改善麻鸡生产性状的作用机制 | 第121-143页 |
| 1 材料与方法 | 第121-129页 |
| 1.1 材料 | 第121-125页 |
| 1.2 方法 | 第125-129页 |
| 2 结果 | 第129-138页 |
| 2.1 重组鲎素饲料添加剂对麻鸡生产性状的影响 | 第129页 |
| 2.2 重组鲎素饲料添加剂对麻鸡免疫器官指数的影响 | 第129-130页 |
| 2.3 重组鲎素饲料添加剂对麻鸡肠道绒毛结构的影响 | 第130-131页 |
| 2.4 重组鲎素饲料添加剂在麻鸡肠道内免疫组织化学定位 | 第131-132页 |
| 2.5 细菌基因组16s rRNA基因PCR-DHPLC检测方法的建立 | 第132-134页 |
| 2.6 重组鲎素饲料添加剂对麻鸡消化道菌群结构变化的解析 | 第134-138页 |
| 3 讨论 | 第138-142页 |
| 3.1 关于消化道菌群结构和多样性解析技术 | 第138-139页 |
| 3.2 关于WAVE核苷酸片段分析系统 | 第139-140页 |
| 3.3 DHPLC法分析消化道菌群的实验过程设计及优化 | 第140-142页 |
| 4 小结 | 第142-143页 |
| 结论 | 第143-145页 |
| 参考文献 | 第145-155页 |
| 导师简介 | 第155-156页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第156-157页 |
| 致谢 | 第157页 |
