| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 英文缩略词表 | 第11-13页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 第一部分 BAT1真核、原核表达载体的构建 | 第15-25页 |
| ·前言 | 第15-16页 |
| ·材料、试剂与仪器 | 第16-17页 |
| ·菌种、载体来源 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16页 |
| ·主要溶液 | 第16-17页 |
| ·主要仪器 | 第17页 |
| ·方法 | 第17-21页 |
| ·引物设计 | 第17-18页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第18页 |
| ·RT-PCR克隆BAT1全长基因 | 第18-19页 |
| ·回收目的基因片段 | 第19页 |
| ·目的基因片段和载体的双酶切 | 第19页 |
| ·连接反应 | 第19-20页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第20页 |
| ·转化 | 第20页 |
| ·挑取及鉴定克隆 | 第20-21页 |
| ·实验结果 | 第21-24页 |
| ·BAT1全长基因的扩增 | 第21页 |
| ·表达载体的构建及双酶切鉴定 | 第21-22页 |
| ·表达载体的测序鉴定 | 第22-24页 |
| ·讨论 | 第24-25页 |
| 第二部分 BAT1蛋白和Hsf4b相互作用的验证 | 第25-43页 |
| ·前言 | 第25页 |
| ·材料、仪器与试剂 | 第25-32页 |
| ·菌种来源 | 第25页 |
| ·载体、细胞来源 | 第25-26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·主要溶液 | 第26-31页 |
| ·实验仪器 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-38页 |
| ·BAT1体外融合蛋白原核表达 | 第32页 |
| ·大剂量体外BAT1蛋白的样品制备 | 第32页 |
| ·纯化、洗脱、收集蛋白 | 第32-33页 |
| ·蛋白质凝胶电泳及考马斯亮蓝染色 | 第33-34页 |
| ·细胞培养及转染 | 第34页 |
| ·细胞收集并裂解 | 第34-35页 |
| ·BCA法测定各细胞总蛋白浓度 | 第35-36页 |
| ·pull-down assay实验方法 | 第36-37页 |
| ·luciferase assay实验方法 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-41页 |
| ·BAT1体外蛋白的考马斯亮蓝染色及Western blot分析结果 | 第38-39页 |
| ·体内BAT1蛋白的western blot分析 | 第39页 |
| ·pull-down assay实验结果分析 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-46页 |
| 综述 | 第46-57页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |
| 致谢 | 第57-59页 |