| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-27页 |
| 引言 | 第12页 |
| 1.1 伏马菌素性质及危害 | 第12-19页 |
| 1.1.1 伏马菌素的理化性 | 第12-14页 |
| 1.1.2 伏马菌素产生菌 | 第14-15页 |
| 1.1.3 伏马菌素的毒性 | 第15-17页 |
| 1.1.4 伏马菌素的污染现状 | 第17-19页 |
| 1.2 伏马菌素的检测方法 | 第19-21页 |
| 1.2.1 薄层层析法(TLC) | 第19页 |
| 1.2.2 气相色谱法(GC) | 第19-20页 |
| 1.2.3 高效液相色谱法(HPLC) | 第20页 |
| 1.2.4 液相色谱质朴联用法(LC-MS/MS) | 第20页 |
| 1.2.5 酶联免疫分析法(ELISA) | 第20-21页 |
| 1.2.6 其他检测方法 | 第21页 |
| 1.3 单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)的研究背景 | 第21-25页 |
| 1.3.1 单克隆抗体技术原理 | 第21-24页 |
| 1.3.2 单克隆抗体的应用 | 第24-25页 |
| 1.4 小结 | 第25-27页 |
| 第二章 伏马菌素当克隆抗体的制备和鉴定 | 第27-44页 |
| 引言 | 第27页 |
| 2.1 材料 | 第27-30页 |
| 2.1.1 主要试剂与药品 | 第27-28页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第28页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第28-29页 |
| 2.1.4 培养液及配置试剂 | 第29-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-35页 |
| 2.2.1 杂交瘤细胞的复苏 | 第30页 |
| 2.2.2 杂交瘤细胞的筛选 | 第30-31页 |
| 2.2.3 阳性细胞的克隆化 | 第31页 |
| 2.2.4 杂交瘤细胞的冻存 | 第31-32页 |
| 2.2.5 单克隆抗体的制备 | 第32页 |
| 2.2.6 单克隆抗体的纯化与浓度的测定 | 第32-33页 |
| 2.2.7 透析袋的处理 | 第33页 |
| 2.2.8 抗FB_1单克隆抗体效价的测定 | 第33-34页 |
| 2.2.9 单克隆抗体SDS-PAGE凝胶电泳检测 | 第34页 |
| 2.2.10 单克隆抗体亚类鉴定 | 第34页 |
| 2.2.11 单克隆抗体亲和力测定 | 第34-35页 |
| 2.2.12 单克隆抗体特异性的检测 | 第35页 |
| 2.3 结果 | 第35-40页 |
| 2.3.1 单克隆抗体细胞株筛选结果 | 第35-36页 |
| 2.3.2 腹水纯化及蛋白浓度测定 | 第36-37页 |
| 2.3.3 腹水效价测定 | 第37-38页 |
| 2.3.4 单抗亚类鉴定 | 第38页 |
| 2.3.5 单克隆抗体亲和力测定 | 第38-39页 |
| 2.3.6 单抗特异性测定 | 第39-40页 |
| 2.4 讨论 | 第40-42页 |
| 2.4.1 杂交瘤细胞筛选及克隆化 | 第40-41页 |
| 2.4.2 单克隆抗体的纯化 | 第41-42页 |
| 2.4.3 单克隆抗体特异性检测 | 第42页 |
| 2.5 小结 | 第42-44页 |
| 第三章 FB_1间接竞争ELISA检测方法的建立 | 第44-60页 |
| 引言 | 第44页 |
| 3.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第44-45页 |
| 3.1.2 仪器耗材 | 第45页 |
| 3.1.3 试剂配置 | 第45页 |
| 3.2 实验方法 | 第45-48页 |
| 3.2.1 间接竞争ELISA最佳工作条件的确定 | 第45-46页 |
| 3.2.2 ELISA检测标准曲线的建立 | 第46-47页 |
| 3.2.3 ELISA检测方法的特异性评价 | 第47页 |
| 3.2.4 加标回收 | 第47页 |
| 3.2.5 实际样品检测 | 第47页 |
| 3.2.6 ELISA检测试剂盒的组装与使用 | 第47-48页 |
| 3.3 实验结果 | 第48-56页 |
| 3.3.1 最佳包被模式的确定 | 第48-49页 |
| 3.3.2 最佳封闭液及封闭条件的确定 | 第49-50页 |
| 3.3.3 最佳酶标二抗浓度及作用时间的确定 | 第50-51页 |
| 3.3.4 最佳底物作用时间的确定 | 第51页 |
| 3.3.5 竞争标准曲线的建立 | 第51-53页 |
| 3.3.6 ELISA检测方法的特异性检测 | 第53-54页 |
| 3.3.7 加标回收检测 | 第54-55页 |
| 3.3.8 实际样品检测 | 第55-56页 |
| 3.3.9 ELISA检测试剂盒的组装 | 第56页 |
| 3.4 讨论 | 第56-59页 |
| 3.4.1 FB_1的ELISA检测分析 | 第56-57页 |
| 3.4.2 间接竞争ELISA检测特异性分析 | 第57-58页 |
| 3.4.3 间接竞争ELISA检测灵敏度分析 | 第58页 |
| 3.4.4 模拟样品检测分析 | 第58页 |
| 3.4.5 实际样品检测分析 | 第58-59页 |
| 3.5 小结 | 第59-60页 |
| 全文结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
