| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 中文摘要 | 第11-13页 |
| ABSTRACT | 第13-15页 |
| 第一章 前言 | 第16-22页 |
| 1. 膀胱癌简介 | 第16页 |
| 2. 巴西苏木素及其应用 | 第16页 |
| 3. 细胞凋亡通路简介 | 第16-17页 |
| 4. 数字基因表达谱的原理与应用 | 第17-19页 |
| 5. 研究内容及意义 | 第19-22页 |
| 第二章 巴西苏木素对T24细胞的毒性研究 | 第22-28页 |
| 1. 实验材料 | 第22页 |
| 1.1 细胞株及药物 | 第22页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第22页 |
| 2. 实验方法 | 第22-24页 |
| 2.1 细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.2 MTT法研究巴西苏木素对T24细胞的影响 | 第23-24页 |
| 2.3 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第24页 |
| 2.4 流式细胞仪检测巴西苏木素对细胞周期的影响 | 第24页 |
| 3. 结果与分析 | 第24-27页 |
| 3.1 不同浓度巴西苏木素对T24细胞活性的影响 | 第24页 |
| 3.2 药物处理不同时间对T24细胞活性的影响 | 第24-25页 |
| 3.3 巴西苏木素对T24细胞凋亡及周期的影响 | 第25-27页 |
| 4 讨论 | 第27-28页 |
| 第三章 数字基因表达谱分析差异表达基因 | 第28-38页 |
| 1. 实验材料 | 第28-29页 |
| 1.1 细胞株及药物 | 第28页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第28-29页 |
| 2. 实验方法 | 第29页 |
| 2.1 细胞培养 | 第29页 |
| 2.2 巴西苏木素处理T24细胞 | 第29页 |
| 2.3 总RNA提取及第一链cDNA合成 | 第29页 |
| 2.4 大规模测序 | 第29页 |
| 2.5 测序结果分析 | 第29页 |
| 3. 实验结果 | 第29-36页 |
| 3.1 样品测序质量评估 | 第29-30页 |
| 3.2 测序饱和度分析 | 第30-31页 |
| 3.3 Clean tag拷贝数分布统计 | 第31页 |
| 3.4 Clean tag与参考基因比对分析及基因表达注释 | 第31-33页 |
| 3.5 差异表达基因的筛选 | 第33-34页 |
| 3.6 差异表达基因GO分析 | 第34-35页 |
| 3.7 差异表达基因pathway分析 | 第35-36页 |
| 4. 讨论 | 第36-38页 |
| 第四章 定量PCR技术分析差异表达基因 | 第38-46页 |
| 1. 实验材料 | 第38-39页 |
| 1.1 细胞株及药物 | 第38页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第38-39页 |
| 2. 实验方法 | 第39页 |
| 2.1 细胞培养 | 第39页 |
| 2.2 差异表达基因表达引物的设计 | 第39页 |
| 2.3 T24细胞的药物处理及cDNA模板制备 | 第39页 |
| 2.4 Real-time PCR检测基因mRNA表达水平 | 第39页 |
| 3 结果 | 第39-43页 |
| 3.1 Caspase家族mRNA水平表达情况 | 第39页 |
| 3.2 周期蛋白及周期蛋白激酶家族mRNA水平表达情况 | 第39-41页 |
| 3.3 死亡受体介导的细胞凋亡相关基因mRNA水平表达情况 | 第41页 |
| 3.4 热休克蛋白家族基因mRNA水平表达情况 | 第41-42页 |
| 3.5 原癌基因c-Fos及c-myc mRNA水平表达情况 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-46页 |
| 第五章 c-Fos基因功能研究 | 第46-56页 |
| 1. 实验材料 | 第46页 |
| 1.1 细胞株及药物 | 第46页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第46页 |
| 2. 实验方法 | 第46-52页 |
| 2.1 细胞培养 | 第46-47页 |
| 2.2 利用western blot分析巴西苏木素处理T24细胞后c-Fos蛋白的表达 | 第47-50页 |
| 2.3 重组表达载体的构建 | 第50-51页 |
| 2.4 重组质粒转染T24细胞 | 第51页 |
| 2.5 Real-time PCR检测转染后c-Fos mRNA表达水平 | 第51-52页 |
| 2.6 Western blot检测转染后c-Fos的表达量 | 第52页 |
| 2.7 形态学观察 | 第52页 |
| 2.8 MTT检测转染后细胞活性 | 第52页 |
| 3 结果 | 第52-54页 |
| 3.1 巴西苏木素处理T24细胞后c-Fos蛋白表达 | 第52页 |
| 3.2 重组载体的验证结果 | 第52页 |
| 3.3 转染后c-Fos mRNA及蛋白水平的变化及对细胞活性的影响 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 个人简历 | 第64-66页 |
