| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 目录 | 第13-17页 |
| 1 绪论 | 第17-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-37页 |
| 2.1 主要实验材料 | 第20-25页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.3 主要耗材 | 第21-22页 |
| 2.1.4 主要仪器和设备 | 第22页 |
| 2.1.5 主要试剂的配制 | 第22-25页 |
| 2.1.6 数据库搜索、生物信息学及图像分析软件 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-36页 |
| 2.2.1 技术路线 | 第25-26页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第26-27页 |
| 2.2.3 细胞总蛋白的提取和浓度测定 | 第27页 |
| 2.2.4 iTRAQ试剂标记蛋白 | 第27-29页 |
| 2.2.5 2DLC-MS/MS | 第29-30页 |
| 2.2.6 蛋白数据库搜索 | 第30页 |
| 2.2.7 生物信息学分析 | 第30-31页 |
| 2.2.8 qRT-PCR验证部分差异蛋白在5-8F和6-10B中mRNA水平的表达差异 | 第31-32页 |
| 2.2.9 Western blotting验证RAN、TRIM29、ANXA5、SQSTM1在5-8F和6-10B中蛋白水平的表达差异 | 第32-34页 |
| 2.2.10 免疫组织化学检测RAN、TRIM29、ANXA5、SQSTM1在鼻咽癌组织中的表达 | 第34-36页 |
| 2.3 统计学分析 | 第36-37页 |
| 3 结果 | 第37-59页 |
| 3.1 蛋白浓度测定结果 | 第37-38页 |
| 3.2 iTRAQ串联2DLC-MS/MS检测并且通过ProteinPilotTM 4.2软件进行Swissprot蛋白数据库搜索及鉴定 | 第38-39页 |
| 3.2.1 ProteinPilotT~(TM)4.2展示的蛋白搜索结果 | 第38页 |
| 3.2.2 蛋白定量匹配肽段 | 第38-39页 |
| 3.2.3 匹配肽段质谱图 | 第39页 |
| 3.3 两次质谱鉴定的结果 | 第39-41页 |
| 3.3.1 两次质谱鉴定结果 | 第39-40页 |
| 3.3.2 两次质谱结果分析 | 第40-41页 |
| 3.4 筛选与鼻咽癌转移相关差异表达蛋白 | 第41-46页 |
| 3.5 生物信息学分析 | 第46-50页 |
| 3.5.1 转移相关差异蛋白GO分析 | 第46-48页 |
| 3.5.2 转移相关差异蛋白KEGG信号通路分析 | 第48-49页 |
| 3.5.3 转移相关蛋白的PPI相互作用网络图 | 第49-50页 |
| 3.6 qRT-PCR检测23个基因在5-8F和6-10B中mRNA表达水平 | 第50-55页 |
| 3.7 蛋白浓度测定结果 | 第55-56页 |
| 3.8 Western blotting验证差异蛋白在两株细胞中的表达 | 第56-57页 |
| 3.9 免疫组织化学验证差异蛋白在发生转移的鼻咽癌组织和未发生转移的鼻咽癌组织中的表达差异 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59-65页 |
| 5 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 综述 | 第73-90页 |
| 参考文献 | 第83-90页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
