| 缩略语表 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 文献回顾 | 第13-26页 |
| 第一部分 细胞分化与重编程 | 第13-15页 |
| 1 细胞分化与重编程的概念 | 第13页 |
| 2 重编程的基本方法 | 第13-15页 |
| 2.1 核移植 | 第13-14页 |
| 2.2 细胞融合 | 第14页 |
| 2.3 细胞抽提物诱导重编程 | 第14页 |
| 2.4 转录因子诱导的直接重编程 | 第14-15页 |
| 第二部分 诱导多能干细胞及其应用 | 第15-26页 |
| 1 诱导多能干细胞的研究概况 | 第15-19页 |
| 1.1 重编程动物体细胞 | 第15-16页 |
| 1.2 重编程人类体细胞 | 第16页 |
| 1.3 慢病毒介导的转录因子的异位表达 | 第16-17页 |
| 1.4 其他方法介导的转录因子的异位表达 | 第17-19页 |
| 2 转录因子诱导细胞重编程的分子机制 | 第19-21页 |
| 2.1 转录因子基因表达及功能 | 第19-20页 |
| 2.2 表观遗传谱 | 第20-21页 |
| 3 诱导多能干细胞的应用与挑战 | 第21-23页 |
| 3.1 细胞替代治疗 | 第21-22页 |
| 3.2 疾病药物筛选模型的建立 | 第22-23页 |
| 3.3 药理学和药物毒理学研究 | 第23页 |
| 4 诱导多能干细胞与肿瘤 | 第23-26页 |
| 4.1 iPS 细胞与肿瘤细胞的共性与差别 | 第23-24页 |
| 4.2 iPS 细胞在肿瘤研究中的应用 | 第24-26页 |
| 第一部分 Yamanaka 因子慢病毒载体构建 | 第26-35页 |
| 1 材料 | 第26-27页 |
| 1.1 质粒和细胞系 | 第26页 |
| 1.2 主要试剂 | 第26-27页 |
| 1.3 主要仪器 | 第27页 |
| 2 方法 | 第27-31页 |
| 2.1 质粒 DNA 的制备 | 第27-28页 |
| 2.2 转录因子编码片段和入门载体片段的获得 | 第28-30页 |
| 2.3 入门克隆的构建 | 第30页 |
| 2.4 表达克隆的构建 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 第二部分 慢病毒包装及病毒滴度值测定 | 第35-41页 |
| 1 材料 | 第35-36页 |
| 1.1 细胞系 | 第35页 |
| 1.2 主要试剂 | 第35-36页 |
| 1.3 主要仪器 | 第36页 |
| 2 方法 | 第36-37页 |
| 2.1 慢病毒包装 | 第36页 |
| 2.2 病毒滴度值测定 | 第36-37页 |
| 2.3 细胞免疫荧光检测过表达效率 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-40页 |
| 4 讨论 | 第40-41页 |
| 第三部分 肝癌细胞 Yamanaka 因子表达检测及 iPS 样克隆的诱导 | 第41-50页 |
| 1 材料 | 第41-42页 |
| 1.1 细胞系 | 第41页 |
| 1.2 主要试剂 | 第41-42页 |
| 1.3 主要仪器 | 第42页 |
| 2 方法 | 第42-46页 |
| 2.1 RT-PCR 分析 | 第42-44页 |
| 2.2 Western blot 检测 | 第44-45页 |
| 2.3 BD MatrigelTM包被培养板 | 第45-46页 |
| 2.4 病毒感染 Huh7 细胞及 TRA-1-60 染色 | 第46页 |
| 3 结果 | 第46-48页 |
| 3.1 肝癌细胞系中 Yamanaka 因子 mRNA 水平检测结果 | 第46页 |
| 3.2 Yamanaka 因子的蛋白水平检测结果 | 第46-47页 |
| 3.3 iPS 样克隆的诱导 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 小结 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 个人简历和研究成果 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
