| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-13页 |
| 缩略词 | 第14-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-41页 |
| 1.1 核糖体参与的蛋白质翻译过程 | 第15-25页 |
| 1.1.1 核糖体的结构 | 第15-19页 |
| 1.1.2 蛋白质的翻译过程 | 第19-25页 |
| 1.2 参与翻译过程的相关因子 | 第25-33页 |
| 1.2.1 起始因子IF1 | 第25-26页 |
| 1.2.2 起始因子IF2 | 第26-27页 |
| 1.2.3 延伸因子EF-TU | 第27-29页 |
| 1.2.4 延伸因子EF-G | 第29-31页 |
| 1.2.5 核糖体保护蛋白Tet(O) | 第31-33页 |
| 1.3 mRNA-(tRNA)_2的转位 | 第33-40页 |
| 1.3.1 EF-G介导的转位过程 | 第33-34页 |
| 1.3.2 tRNA的杂交状态 | 第34-35页 |
| 1.3.3 EF-G的构象变化 | 第35-36页 |
| 1.3.4 杂交状态对EF-G催化的转位过程的影响 | 第36页 |
| 1.3.5 转位过程中小亚基的头部旋转 | 第36-38页 |
| 1.3.6 mRNA-(tRNA)_2复合物的转位模型 | 第38-40页 |
| 1.4 本课题研究的内容及意义 | 第40-41页 |
| 第二章 保守GTP酶EF-G的构建表达及纯化 | 第41-59页 |
| 2.1 实验材料及仪器 | 第41页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第41页 |
| 2.1.2 试剂 | 第41页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-51页 |
| 2.2.1 蛋白质的序列和结构比对 | 第41页 |
| 2.2.2 基因克隆 | 第41-45页 |
| 2.2.3 重组表达载体的构建 | 第45-49页 |
| 2.2.4 重组蛋白在大肠杆菌中的试表达 | 第49-50页 |
| 2.2.5 EF-G蛋白及其突变体的纯化 | 第50-51页 |
| 2.3 实验结果 | 第51-59页 |
| 2.3.1 蛋白质序列和结构比对 | 第51-52页 |
| 2.3.2 EF-G嵌合体的构建及基因克隆 | 第52-55页 |
| 2.3.3 EF-G及其突变体蛋白的试表达 | 第55-56页 |
| 2.3.4 EF-G及其突变体蛋白的纯化 | 第56-59页 |
| 第三章 保守GTP酶EF-G的功能研究 | 第59-69页 |
| 3.1 实验材料及仪器 | 第59页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第59页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第59页 |
| 3.2 实验方法 | 第59-62页 |
| 3.2.1 EF-G嵌合体在大肠杆菌中的过表达 | 第59页 |
| 3.2.2 免疫印迹法检测EF-G突变体的表达量 | 第59-60页 |
| 3.2.3 GTPase活性检测 | 第60-61页 |
| 3.2.4 Poly(U)指导的多聚苯丙氨酸的合成 | 第61页 |
| 3.2.5 多聚核糖体的解聚检测 | 第61-62页 |
| 3.3 实验结果 | 第62-69页 |
| 3.3.1 EF-G嵌合体的过表达对菌体生长的影响 | 第62-63页 |
| 3.3.2 免疫印迹法检测突变体蛋白的表达量 | 第63-64页 |
| 3.3.3 GTPase活性检测 | 第64-65页 |
| 3.3.4 Poly(U)指导的多聚苯丙氨酸的合成分析 | 第65-67页 |
| 3.3.5 EF-G嵌合体对多聚核糖体解聚的影响 | 第67-69页 |
| 第四章 讨论 | 第69-71页 |
| 4.1 EF-G突变体对mRNA-(tRNA)_2转位过程的影响 | 第69-70页 |
| 4.2 EF-G突变体对核糖体再循环的影响 | 第70-71页 |
| 第五章 总结及展望 | 第71-72页 |
| 5.1 总结 | 第71页 |
| 5.2 展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 硕士期间发表论文 | 第81-82页 |
| 附件 | 第82页 |
