摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
中英文缩略词表 | 第12-14页 |
引言 | 第14-18页 |
主要研究内容 | 第17-18页 |
第1章 miR-146a基因多态性与肺癌相关性研究 | 第18-33页 |
1 前言 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-26页 |
2.1 组织标本 | 第19-20页 |
2.2 主要试剂和溶液 | 第20-21页 |
2.3 主要仪器设备 | 第21-22页 |
2.4 主要用的软件 | 第22页 |
2.5 方法 | 第22-25页 |
2.6 Hardy-weinberg平衡的分析 | 第25页 |
2.7 统计学方法 | 第25-26页 |
3 结果 | 第26-30页 |
3.1 肺部良性组和恶性组间基本特征的比较 | 第26-27页 |
3.2 miR-146a基因多态性测序 | 第27页 |
3.3 miRNA-146a rs2910164基因多态性 | 第27页 |
3.4 miRNA-146a rs2910164基因多态性与肺癌淋巴结转移 | 第27-28页 |
3.5 miRNA-146a rs2910164基因多态性与肺癌分期 | 第28页 |
3.6 miRNA-146a rs2910164基因多态性与肺癌临床特征 | 第28-30页 |
4 讨论 | 第30-32页 |
5 本章小结 | 第32-33页 |
第2章 miR-146a对NSCLC细胞生物学行为的影响 | 第33-52页 |
1 前言 | 第33页 |
2 材料与方法 | 第33-45页 |
2.1 组织标本和细胞系 | 第33-34页 |
2.2 主要试剂及溶液 | 第34-36页 |
2.3 主要仪器设备 | 第36-37页 |
2.4 细胞培养 | 第37-38页 |
2.5 无内毒素质粒大量提取 | 第38-39页 |
2.6 Lipofectamine 3000细胞转染法 | 第39-40页 |
2.7 miRNA的提取 | 第40-41页 |
2.8 逆转录PCR检测miRNA表达量 | 第41-43页 |
2.9 MTT法检测细胞活力 | 第43页 |
2.10 集落形成实验 | 第43-44页 |
2.11 Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡 | 第44-45页 |
3 结果 | 第45-50页 |
3.1 miR-146a在NSCLC肺组织及癌旁肺组织中的表达 | 第45-46页 |
3.2 miR-146a在NSCLC细胞株及正常肺细胞株中的表达 | 第46-47页 |
3.3 miR-146a模拟物对A549细胞活力的影响 | 第47-48页 |
3.4 miR-146a模拟物对A549细胞集落形成能力的影响 | 第48-49页 |
3.5 miR-146a模拟物对A549细胞凋亡的影响 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-51页 |
5 本章小结 | 第51-52页 |
第3章 miR-146a通过调控MIF的表达影响肺癌细胞的生物学特征 | 第52-75页 |
1 前言 | 第52-53页 |
2 材料与方法 | 第53-67页 |
2.1 组织标本和细胞系 | 第53页 |
2.2 主要试剂及溶液 | 第53-57页 |
2.3 主要仪器设备 | 第57-58页 |
2.4 免疫组化 | 第58-59页 |
2.5 细胞培养 | 第59页 |
2.6 无内毒素质粒大量提取 | 第59页 |
2.7 Lipofectamine 3000细胞转染法 | 第59页 |
2.8 总RNA的提取 | 第59-60页 |
2.9 RT-PCR | 第60-62页 |
2.10 蛋白印迹(Western blotting) | 第62-65页 |
2.11 双荧光素酶报告基因 | 第65-67页 |
3 结果 | 第67-72页 |
3.1 MIF在NSCLC肺组织及癌旁肺组织中的表达 | 第67-68页 |
3.2 miR-146a模拟物对A549细胞中mRNA及MIF蛋白表达的影响 | 第68-69页 |
3.3 miR-146a模拟物对A549细胞中Caspase 3 活性的影响 | 第69-70页 |
3.4 miR-146a模拟物对A549细胞中NF-κB信号通路的影响 | 第70-71页 |
3.5 双荧光素酶报告系统检测miR-146a对MIF的调控作用 | 第71-72页 |
4 讨论 | 第72-74页 |
5 本章小结 | 第74-75页 |
第4章 结论与展望 | 第75-76页 |
4.1 结论 | 第75页 |
4.2 展望 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-82页 |
攻读博士学位期间的研究成果 | 第82-83页 |
综述 | 第83-92页 |
参考文献 | 第90-92页 |