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miR-146a对A549细胞增殖的影响及其基因多态性与肺癌的相关性研究

摘要第3-6页
ABSTRACT第6-8页
中英文缩略词表第12-14页
引言第14-18页
    主要研究内容第17-18页
第1章 miR-146a基因多态性与肺癌相关性研究第18-33页
    1 前言第18-19页
    2 材料与方法第19-26页
        2.1 组织标本第19-20页
        2.2 主要试剂和溶液第20-21页
        2.3 主要仪器设备第21-22页
        2.4 主要用的软件第22页
        2.5 方法第22-25页
        2.6 Hardy-weinberg平衡的分析第25页
        2.7 统计学方法第25-26页
    3 结果第26-30页
        3.1 肺部良性组和恶性组间基本特征的比较第26-27页
        3.2 miR-146a基因多态性测序第27页
        3.3 miRNA-146a rs2910164基因多态性第27页
        3.4 miRNA-146a rs2910164基因多态性与肺癌淋巴结转移第27-28页
        3.5 miRNA-146a rs2910164基因多态性与肺癌分期第28页
        3.6 miRNA-146a rs2910164基因多态性与肺癌临床特征第28-30页
    4 讨论第30-32页
    5 本章小结第32-33页
第2章 miR-146a对NSCLC细胞生物学行为的影响第33-52页
    1 前言第33页
    2 材料与方法第33-45页
        2.1 组织标本和细胞系第33-34页
        2.2 主要试剂及溶液第34-36页
        2.3 主要仪器设备第36-37页
        2.4 细胞培养第37-38页
        2.5 无内毒素质粒大量提取第38-39页
        2.6 Lipofectamine 3000细胞转染法第39-40页
        2.7 miRNA的提取第40-41页
        2.8 逆转录PCR检测miRNA表达量第41-43页
        2.9 MTT法检测细胞活力第43页
        2.10 集落形成实验第43-44页
        2.11 Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡第44-45页
    3 结果第45-50页
        3.1 miR-146a在NSCLC肺组织及癌旁肺组织中的表达第45-46页
        3.2 miR-146a在NSCLC细胞株及正常肺细胞株中的表达第46-47页
        3.3 miR-146a模拟物对A549细胞活力的影响第47-48页
        3.4 miR-146a模拟物对A549细胞集落形成能力的影响第48-49页
        3.5 miR-146a模拟物对A549细胞凋亡的影响第49-50页
    4 讨论第50-51页
    5 本章小结第51-52页
第3章 miR-146a通过调控MIF的表达影响肺癌细胞的生物学特征第52-75页
    1 前言第52-53页
    2 材料与方法第53-67页
        2.1 组织标本和细胞系第53页
        2.2 主要试剂及溶液第53-57页
        2.3 主要仪器设备第57-58页
        2.4 免疫组化第58-59页
        2.5 细胞培养第59页
        2.6 无内毒素质粒大量提取第59页
        2.7 Lipofectamine 3000细胞转染法第59页
        2.8 总RNA的提取第59-60页
        2.9 RT-PCR第60-62页
        2.10 蛋白印迹(Western blotting)第62-65页
        2.11 双荧光素酶报告基因第65-67页
    3 结果第67-72页
        3.1 MIF在NSCLC肺组织及癌旁肺组织中的表达第67-68页
        3.2 miR-146a模拟物对A549细胞中mRNA及MIF蛋白表达的影响第68-69页
        3.3 miR-146a模拟物对A549细胞中Caspase 3 活性的影响第69-70页
        3.4 miR-146a模拟物对A549细胞中NF-κB信号通路的影响第70-71页
        3.5 双荧光素酶报告系统检测miR-146a对MIF的调控作用第71-72页
    4 讨论第72-74页
    5 本章小结第74-75页
第4章 结论与展望第75-76页
    4.1 结论第75页
    4.2 展望第75-76页
致谢第76-77页
参考文献第77-82页
攻读博士学位期间的研究成果第82-83页
综述第83-92页
    参考文献第90-92页

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