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非洲鸵鸟BAFF的克隆表达及饮水硼对其表达的影响

摘要第9-12页
ABSTRACT第12-16页
缩略词表(ABBREVIATION)第17-19页
第一章 文献综述第19-30页
    前言第19-20页
    1 BAFF及BAFF-R的结构第20-22页
        1.1 BAFF及其结构第20-21页
        1.2 BAFF-R及其结构第21-22页
    2 BAFF及其受体介导的信号通路第22-23页
    3 BAFF的主要生物学功能第23-24页
        3.1 BAFF对B细胞的作用第23页
        3.2 BAFF对T细胞的作用第23-24页
    4 BAFF与疾病第24-25页
        4.1 BAFF与免疫系统疾病第24页
        4.2 BAFF与感染性疾病第24-25页
    5 硼的生理功能研究进展第25-26页
        5.1 硼对动物的营养作用第25-26页
        5.2 硼对动物的毒性作用第26页
    6 鸵鸟养殖研究进展第26-28页
    7 选题的目的与意义第28-30页
第二章 非洲鸵鸟BAFF基因的克隆与序列分析第30-48页
    前言第30-31页
    1 材料与方法第31-40页
        1.1 材料第31-33页
            1.1.1 试验动物第31页
            1.1.2 主要仪器设备第31-32页
            1.1.3 菌株、载体及试剂第32页
            1.1.4 试剂配制方法第32-33页
        1.2 方法第33-40页
            1.2.1 样品采集第33页
            1.2.2 组织样品总RNA的提取第33-34页
            1.2.3 引物设计第34-35页
            1.2.4 cDNA第一链的合成第35-36页
            1.2.5 PCR扩增第36页
            1.2.6 PCR产物的回收第36-37页
            1.2.7 克隆质粒pMD-BAFF的构建第37-40页
            1.2.8 序列测定与分析第40页
    2 结果与分析第40-46页
        2.1 非洲鸵鸟组织总RNA的提取第40-41页
        2.2 非洲鸵鸟BAFF基因的克隆第41页
        2.3 非洲鸵鸟BAFF基因克隆质粒的构建和鉴定第41-42页
        2.4 非洲鸵鸟BAFF基因碱基序列与同源性分析第42-43页
        2.5 非洲鸵鸟BAFF基因氨基酸序列与同源性分析第43-44页
        2.6 BAFF基因进化树分析第44-46页
    3 讨论第46-48页
        3.1 非洲鸵鸟BAFF基因的克隆第46页
        3.2 非洲鸵鸟BAFF基因氨基酸序列分析第46-47页
        3.3 非洲鸵鸟BAFF基因与其它动物BAFF基因的进化关系第47-48页
第三章 非洲鸵鸟BAFF蛋白的原核表达与纯化第48-66页
    前言第48页
    1 材料与方法第48-57页
        1.1 材料第48-52页
            1.1.1 试验动物第48页
            1.1.2 主要仪器设备第48-49页
            1.1.3 菌株与载体第49页
            1.1.4 主要试剂第49-50页
            1.1.5 试剂配制第50-52页
        1.2 方法第52-57页
            1.2.1 非洲鸵鸟BAFF基因的克隆与测序第52页
            1.2.2 重组表达质粒pET-28a-OsBAFF的构建第52-53页
            1.2.3 连接产物转化第53-54页
            1.2.4 重组蛋白的诱导表达第54页
            1.2.5 重组蛋白的诱导表达的优化第54-55页
            1.2.6 SDS-PAGE蛋白凝胶电泳第55页
            1.2.7 重组蛋白的纯化与复性第55-56页
            1.2.8 Western Blotting分析第56-57页
    2 结果与分析第57-63页
        2.1 非洲鸵鸟BAFF基因重组表达质粒的构建第57-58页
        2.2 非洲鸵鸟BAFF重组蛋白的表达第58-60页
        2.3 重组蛋白OsBAFF可溶性分析第60-61页
        2.4 重组蛋白OsBAFF的纯化第61-62页
        2.5 Western Blotting分析第62-63页
    3 讨论第63-66页
        3.1 非洲鸵鸟BAFF基因的原核表达第63-64页
        3.2 非洲鸵鸟BAFF重组蛋白的纯化第64-65页
        3.3 Western Blotting分析第65-66页
第四章 非洲鸵鸟BAFF基因的组织表达研究第66-76页
    前言第66-67页
    1 材料与方法第67-70页
        1.1 试验材料第67-68页
            1.1.1 试验动物第67页
            1.1.2 主要仪器设备第67页
            1.1.3 主要试剂第67页
            1.1.4 试剂配制方法第67-68页
        1.2 方法第68-70页
            1.2.1 样品采集及处理第68页
            1.2.2 非洲鸵鸟组织总RNA提取第68页
            1.2.3 引物设计第68页
            1.2.4 cDNA第一链的合成第68-69页
            1.2.5 RT-PCR扩增第69-70页
            1.2.6 real time-PCR扩增第70页
    2 结果与分析第70-73页
        2.1 非洲鸵鸟BAFF基因RT-PCR扩增结果第70-71页
        2.2 非洲鸵鸟BAFF基因real time-PCR扩增结果第71-73页
    3 讨论第73-76页
        3.1 非洲鸵鸟BAFF基因mRNA在不同组织中的表达第73-74页
        3.2 非洲鸵鸟BAFF基因mRNA组织表达的影响因素第74页
        3.3 非洲鸵鸟BAFF基因mRNA在免疫器官中的表达第74-76页
第五章 非洲鸵鸟重组蛋白OSBAFF生物学特性研究第76-89页
    前言第76页
    1 材料与方法第76-81页
        1.1 试验材料第76-79页
            1.1.1 试验动物第76-77页
            1.1.2 主要仪器设备第77页
            1.1.3 主要试剂第77页
            1.1.4 试剂配制第77-79页
        1.2 试验方法第79-81页
            1.2.1 样品采集及处理第79页
            1.2.2 非洲鸵鸟法氏囊细胞悬液的制备第79页
            1.2.3 小鼠脾淋巴细胞悬液的制备第79页
            1.2.4 细胞培养及传代第79-80页
            1.2.5 细胞计数第80页
            1.2.6 非洲鸵鸟重组表达蛋白OsBAFF的活性检测第80-81页
            1.2.7 不同浓度的非洲鸵鸟OsBAFF重组融合蛋白对淋巴细胞增殖的影响第81页
            1.2.8 LPS刺激试验第81页
    2 结果与分析第81-86页
        2.1 非洲鸵鸟OsBAFF融合蛋白对非洲鸵鸟B淋巴细胞的促增殖作用第81-83页
        2.2 非洲鸵鸟OsBAFF融合蛋白对小鼠B淋巴细胞的促增殖作用第83-85页
        2.3 LPS刺激后非洲鸵鸟BAFF基因表达情况第85-86页
    3 讨论第86-89页
        3.1 非洲鸵鸟重组融合蛋白OsBAFF对B淋巴细胞的促增殖作用第86-87页
        3.2 LPS刺激对非洲鸵鸟法氏囊组织中BAFF基因m RNA表达的影响第87-89页
第六章 饮水硼对非洲鸵鸟BAFF基因组织表达的影响第89-115页
    前言第89-90页
    1 材料与方法第90-93页
        1.1 试验材料第90-91页
            1.1.1 试验动物第90页
            1.1.2 主要仪器设备第90页
            1.1.3 主要试剂第90-91页
            1.1.4 试剂配制方法第91页
        1.2 试验方法第91-93页
            1.2.1 样品采集及处理第91页
            1.2.2 非洲鸵鸟组织总RNA提取第91页
            1.2.3 引物设计第91-92页
            1.2.4 cDNA第一链的合成第92页
            1.2.5 real time-PCR扩增第92-93页
    2 结果与分析第93-109页
        2.1 饮水硼对非洲鸵鸟骨髓组织中BAFF基因mRNA表达的影响第93-95页
        2.2 饮水硼对非洲鸵鸟法氏囊组织中BAFF基因mRNA表达的影响第95-97页
        2.3 饮水硼对非洲鸵鸟肝组织中BAFF基因m RNA表达的影响第97-99页
        2.4 饮水硼对非洲鸵鸟脾组织中BAFF基因m RNA表达的影响第99-101页
        2.5 饮水硼对非洲鸵鸟胸腺组织中BAFF基因mRNA表达的影响第101-103页
        2.6 饮水硼对非洲鸵鸟肺组织中BAFF基因m RNA表达的影响第103-105页
        2.7 饮水硼对非洲鸵鸟肾组织中BAFF基因m RNA表达的影响第105-107页
        2.8 饮水硼对非洲鸵鸟胃组织中BAFF基因m RNA表达的影响第107-109页
    3 讨论第109-115页
        3.1 饮水硼对非洲鸵鸟法氏囊、胸腺和脾组织中BAFF基因mRNA表达的影响第109-110页
        3.2 饮水硼对非洲鸵鸟骨髓和肝组织中BAFF基因mRNA表达的影响第110-112页
        3.3 饮水硼对非洲鸵鸟肾、肺和胃组织中BAFF基因mRNA表达的影响第112-115页
全文结论第115-117页
本研究的主要创新点第117-118页
下一步研究计划第118-119页
参考文献第119-140页
致谢第140-141页
附录1 个人简介第141-142页
附录2 博士期间发表的论文第142-144页

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