摘要 | 第9-12页 |
ABSTRACT | 第12-16页 |
缩略词表(ABBREVIATION) | 第17-19页 |
第一章 文献综述 | 第19-30页 |
前言 | 第19-20页 |
1 BAFF及BAFF-R的结构 | 第20-22页 |
1.1 BAFF及其结构 | 第20-21页 |
1.2 BAFF-R及其结构 | 第21-22页 |
2 BAFF及其受体介导的信号通路 | 第22-23页 |
3 BAFF的主要生物学功能 | 第23-24页 |
3.1 BAFF对B细胞的作用 | 第23页 |
3.2 BAFF对T细胞的作用 | 第23-24页 |
4 BAFF与疾病 | 第24-25页 |
4.1 BAFF与免疫系统疾病 | 第24页 |
4.2 BAFF与感染性疾病 | 第24-25页 |
5 硼的生理功能研究进展 | 第25-26页 |
5.1 硼对动物的营养作用 | 第25-26页 |
5.2 硼对动物的毒性作用 | 第26页 |
6 鸵鸟养殖研究进展 | 第26-28页 |
7 选题的目的与意义 | 第28-30页 |
第二章 非洲鸵鸟BAFF基因的克隆与序列分析 | 第30-48页 |
前言 | 第30-31页 |
1 材料与方法 | 第31-40页 |
1.1 材料 | 第31-33页 |
1.1.1 试验动物 | 第31页 |
1.1.2 主要仪器设备 | 第31-32页 |
1.1.3 菌株、载体及试剂 | 第32页 |
1.1.4 试剂配制方法 | 第32-33页 |
1.2 方法 | 第33-40页 |
1.2.1 样品采集 | 第33页 |
1.2.2 组织样品总RNA的提取 | 第33-34页 |
1.2.3 引物设计 | 第34-35页 |
1.2.4 cDNA第一链的合成 | 第35-36页 |
1.2.5 PCR扩增 | 第36页 |
1.2.6 PCR产物的回收 | 第36-37页 |
1.2.7 克隆质粒pMD-BAFF的构建 | 第37-40页 |
1.2.8 序列测定与分析 | 第40页 |
2 结果与分析 | 第40-46页 |
2.1 非洲鸵鸟组织总RNA的提取 | 第40-41页 |
2.2 非洲鸵鸟BAFF基因的克隆 | 第41页 |
2.3 非洲鸵鸟BAFF基因克隆质粒的构建和鉴定 | 第41-42页 |
2.4 非洲鸵鸟BAFF基因碱基序列与同源性分析 | 第42-43页 |
2.5 非洲鸵鸟BAFF基因氨基酸序列与同源性分析 | 第43-44页 |
2.6 BAFF基因进化树分析 | 第44-46页 |
3 讨论 | 第46-48页 |
3.1 非洲鸵鸟BAFF基因的克隆 | 第46页 |
3.2 非洲鸵鸟BAFF基因氨基酸序列分析 | 第46-47页 |
3.3 非洲鸵鸟BAFF基因与其它动物BAFF基因的进化关系 | 第47-48页 |
第三章 非洲鸵鸟BAFF蛋白的原核表达与纯化 | 第48-66页 |
前言 | 第48页 |
1 材料与方法 | 第48-57页 |
1.1 材料 | 第48-52页 |
1.1.1 试验动物 | 第48页 |
1.1.2 主要仪器设备 | 第48-49页 |
1.1.3 菌株与载体 | 第49页 |
1.1.4 主要试剂 | 第49-50页 |
1.1.5 试剂配制 | 第50-52页 |
1.2 方法 | 第52-57页 |
1.2.1 非洲鸵鸟BAFF基因的克隆与测序 | 第52页 |
1.2.2 重组表达质粒pET-28a-OsBAFF的构建 | 第52-53页 |
1.2.3 连接产物转化 | 第53-54页 |
1.2.4 重组蛋白的诱导表达 | 第54页 |
1.2.5 重组蛋白的诱导表达的优化 | 第54-55页 |
1.2.6 SDS-PAGE蛋白凝胶电泳 | 第55页 |
1.2.7 重组蛋白的纯化与复性 | 第55-56页 |
1.2.8 Western Blotting分析 | 第56-57页 |
2 结果与分析 | 第57-63页 |
2.1 非洲鸵鸟BAFF基因重组表达质粒的构建 | 第57-58页 |
2.2 非洲鸵鸟BAFF重组蛋白的表达 | 第58-60页 |
2.3 重组蛋白OsBAFF可溶性分析 | 第60-61页 |
2.4 重组蛋白OsBAFF的纯化 | 第61-62页 |
2.5 Western Blotting分析 | 第62-63页 |
3 讨论 | 第63-66页 |
3.1 非洲鸵鸟BAFF基因的原核表达 | 第63-64页 |
3.2 非洲鸵鸟BAFF重组蛋白的纯化 | 第64-65页 |
3.3 Western Blotting分析 | 第65-66页 |
第四章 非洲鸵鸟BAFF基因的组织表达研究 | 第66-76页 |
前言 | 第66-67页 |
1 材料与方法 | 第67-70页 |
1.1 试验材料 | 第67-68页 |
1.1.1 试验动物 | 第67页 |
1.1.2 主要仪器设备 | 第67页 |
1.1.3 主要试剂 | 第67页 |
1.1.4 试剂配制方法 | 第67-68页 |
1.2 方法 | 第68-70页 |
1.2.1 样品采集及处理 | 第68页 |
1.2.2 非洲鸵鸟组织总RNA提取 | 第68页 |
1.2.3 引物设计 | 第68页 |
1.2.4 cDNA第一链的合成 | 第68-69页 |
1.2.5 RT-PCR扩增 | 第69-70页 |
1.2.6 real time-PCR扩增 | 第70页 |
2 结果与分析 | 第70-73页 |
2.1 非洲鸵鸟BAFF基因RT-PCR扩增结果 | 第70-71页 |
2.2 非洲鸵鸟BAFF基因real time-PCR扩增结果 | 第71-73页 |
3 讨论 | 第73-76页 |
3.1 非洲鸵鸟BAFF基因mRNA在不同组织中的表达 | 第73-74页 |
3.2 非洲鸵鸟BAFF基因mRNA组织表达的影响因素 | 第74页 |
3.3 非洲鸵鸟BAFF基因mRNA在免疫器官中的表达 | 第74-76页 |
第五章 非洲鸵鸟重组蛋白OSBAFF生物学特性研究 | 第76-89页 |
前言 | 第76页 |
1 材料与方法 | 第76-81页 |
1.1 试验材料 | 第76-79页 |
1.1.1 试验动物 | 第76-77页 |
1.1.2 主要仪器设备 | 第77页 |
1.1.3 主要试剂 | 第77页 |
1.1.4 试剂配制 | 第77-79页 |
1.2 试验方法 | 第79-81页 |
1.2.1 样品采集及处理 | 第79页 |
1.2.2 非洲鸵鸟法氏囊细胞悬液的制备 | 第79页 |
1.2.3 小鼠脾淋巴细胞悬液的制备 | 第79页 |
1.2.4 细胞培养及传代 | 第79-80页 |
1.2.5 细胞计数 | 第80页 |
1.2.6 非洲鸵鸟重组表达蛋白OsBAFF的活性检测 | 第80-81页 |
1.2.7 不同浓度的非洲鸵鸟OsBAFF重组融合蛋白对淋巴细胞增殖的影响 | 第81页 |
1.2.8 LPS刺激试验 | 第81页 |
2 结果与分析 | 第81-86页 |
2.1 非洲鸵鸟OsBAFF融合蛋白对非洲鸵鸟B淋巴细胞的促增殖作用 | 第81-83页 |
2.2 非洲鸵鸟OsBAFF融合蛋白对小鼠B淋巴细胞的促增殖作用 | 第83-85页 |
2.3 LPS刺激后非洲鸵鸟BAFF基因表达情况 | 第85-86页 |
3 讨论 | 第86-89页 |
3.1 非洲鸵鸟重组融合蛋白OsBAFF对B淋巴细胞的促增殖作用 | 第86-87页 |
3.2 LPS刺激对非洲鸵鸟法氏囊组织中BAFF基因m RNA表达的影响 | 第87-89页 |
第六章 饮水硼对非洲鸵鸟BAFF基因组织表达的影响 | 第89-115页 |
前言 | 第89-90页 |
1 材料与方法 | 第90-93页 |
1.1 试验材料 | 第90-91页 |
1.1.1 试验动物 | 第90页 |
1.1.2 主要仪器设备 | 第90页 |
1.1.3 主要试剂 | 第90-91页 |
1.1.4 试剂配制方法 | 第91页 |
1.2 试验方法 | 第91-93页 |
1.2.1 样品采集及处理 | 第91页 |
1.2.2 非洲鸵鸟组织总RNA提取 | 第91页 |
1.2.3 引物设计 | 第91-92页 |
1.2.4 cDNA第一链的合成 | 第92页 |
1.2.5 real time-PCR扩增 | 第92-93页 |
2 结果与分析 | 第93-109页 |
2.1 饮水硼对非洲鸵鸟骨髓组织中BAFF基因mRNA表达的影响 | 第93-95页 |
2.2 饮水硼对非洲鸵鸟法氏囊组织中BAFF基因mRNA表达的影响 | 第95-97页 |
2.3 饮水硼对非洲鸵鸟肝组织中BAFF基因m RNA表达的影响 | 第97-99页 |
2.4 饮水硼对非洲鸵鸟脾组织中BAFF基因m RNA表达的影响 | 第99-101页 |
2.5 饮水硼对非洲鸵鸟胸腺组织中BAFF基因mRNA表达的影响 | 第101-103页 |
2.6 饮水硼对非洲鸵鸟肺组织中BAFF基因m RNA表达的影响 | 第103-105页 |
2.7 饮水硼对非洲鸵鸟肾组织中BAFF基因m RNA表达的影响 | 第105-107页 |
2.8 饮水硼对非洲鸵鸟胃组织中BAFF基因m RNA表达的影响 | 第107-109页 |
3 讨论 | 第109-115页 |
3.1 饮水硼对非洲鸵鸟法氏囊、胸腺和脾组织中BAFF基因mRNA表达的影响 | 第109-110页 |
3.2 饮水硼对非洲鸵鸟骨髓和肝组织中BAFF基因mRNA表达的影响 | 第110-112页 |
3.3 饮水硼对非洲鸵鸟肾、肺和胃组织中BAFF基因mRNA表达的影响 | 第112-115页 |
全文结论 | 第115-117页 |
本研究的主要创新点 | 第117-118页 |
下一步研究计划 | 第118-119页 |
参考文献 | 第119-140页 |
致谢 | 第140-141页 |
附录1 个人简介 | 第141-142页 |
附录2 博士期间发表的论文 | 第142-144页 |