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活性羰基化合物损伤β细胞及其机理研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
1 论文综述第11-24页
    1.1 糖尿病现状与危害第11-12页
    1.2 认识糖尿病的历程第12-16页
    1.3 糖尿病的定义、主要类型和二型糖尿病分期第16-18页
    1.4 活性羰基化合物定义、来源和作用第18-20页
    1.5 4-羟基壬烯醛与甲基乙二醛第20-22页
    1.6 RCS与糖尿病的关系第22-24页
2 实验材料与方法第24-35页
    2.1 细胞复苏、培养与冻存第24-26页
    2.2 MTT细胞增殖及细胞毒性分析第26页
    2.3 BrdU细胞增殖分析第26-27页
    2.4 TUNEL细胞凋亡分析第27-30页
    2.5 荧光定量PCR实验第30-32页
        2.5.1 RNA提取第30-31页
        2.5.2 RNA逆转录第31-32页
        2.5.3 定量PCR反应第32页
    2.6 蛋白免疫印迹实验(Western blot)第32-35页
        2.6.1 蛋白提取与浓度测定第33-34页
        2.6.2 Western Blot实验第34-35页
3 实验结果与结论第35-45页
    3.1 细胞培养与 4-HNE对INS-1E细胞形态功能影响第35-38页
        3.1.1 INS-1E正常培养第35页
        3.1.2 不同浓度 4-HNE处理INS-1E细胞 24h第35-36页
        3.1.3 50μM 4-HNE处理INS-1E细胞不同时长第36-38页
    3.2 4-HNE影响INS-1E细胞活力MTT法检测第38页
    3.3 4-HNE影响细胞增殖BrdU分析第38-40页
    3.4 4-HNE诱导细胞凋亡TUNEL分析第40-41页
    3.5 荧光定量PCR分析第41-42页
    3.6 蛋白免疫印迹实验(Western blot)第42-45页
        3.6.1 不同浓度 4-HNE处理INS-1E细胞Cleaved-caspase 3 蛋白的改变第42-43页
        3.6.2 50μM 4-HNE处理INS-1E细胞不同时间内质网应激相关蛋白水平的改变第43-45页
4 讨论第45-47页
参考文献第47-58页
缩略语第58-59页
胰岛β细胞内质网应激示意图第59-60页
硕士期间已发表文章第60-61页
致谢第61页

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