| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-20页 |
| 第一章 文献综述 | 第20-33页 |
| 1 甲壳动物免疫的研究进展 | 第20-30页 |
| ·甲壳动物的免疫机制 | 第20-25页 |
| ·细胞免疫 | 第20-22页 |
| ·体液免疫 | 第22-25页 |
| ·甲壳动物免疫相关基因 | 第25-28页 |
| ·模式识别蛋白 | 第25-26页 |
| ·酚氧化酶原激活系统 | 第26-27页 |
| ·免疫防御因子 | 第27-28页 |
| ·甲壳动物在环境胁迫下免疫响应的研究进展 | 第28-30页 |
| ·理化因子 | 第28-29页 |
| ·养殖自污染物 | 第29-30页 |
| 2 甲壳动物在氨氮胁迫下解毒代谢的研究进展 | 第30-32页 |
| ·养殖环境中氨氮的来源和危害 | 第30-31页 |
| ·氨氮在甲壳动物体内的代谢过程 | 第31页 |
| ·甲壳动物对氨氮的解毒代谢机制 | 第31-32页 |
| 3 结语 | 第32-33页 |
| 第二章 三疣梭子蟹免疫相关基因的克隆与表达分析 | 第33-85页 |
| 第一节 三疣梭子蟹抗菌肽crustin基因的克隆与表达分析 | 第33-51页 |
| 1 材料与方法 | 第33-43页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·实验动物 | 第33-34页 |
| ·引物 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-43页 |
| ·注射实验 | 第34-35页 |
| ·总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第35-37页 |
| ·crustin片段的克隆 | 第37-40页 |
| ·3'RACE | 第40页 |
| ·5'RACE | 第40-41页 |
| ·crustin基因序列的生物信息学分析 | 第41-42页 |
| ·实时定量PCR检测crustin基因的表达 | 第42-43页 |
| 2 结果 | 第43-48页 |
| ·Ptcrustin全长cDNA的克隆 | 第43页 |
| ·Ptcrustin全长cDNA的序列分析 | 第43-44页 |
| ·Ptcrustin基因的同源性分析 | 第44-46页 |
| ·Ptcrustin氨基酸序列的进化树分析 | 第46-47页 |
| ·Ptcrustin mRNA的组织特异性 | 第47页 |
| ·注射溶藻弧菌后Ptcrustin mRNA的表达变化 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-51页 |
| 第二节 三疣梭子蟹抗脂多糖因子(ALF)基因的克隆与表达分析 | 第51-61页 |
| 1 材料与方法 | 第51-52页 |
| ·实验材料 | 第51-52页 |
| ·实验动物 | 第52页 |
| ·引物 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52页 |
| 2 结果 | 第52-58页 |
| ·PtALF全长cDNA的克隆 | 第52-53页 |
| ·PtALF全长cDNA的序列分析 | 第53-54页 |
| ·PtALF基因的同源性分析 | 第54-56页 |
| ·PtALF氨基酸序列的进化树分析 | 第56-57页 |
| ·PtALF mRNA的组织特异性 | 第57页 |
| ·注射溶藻弧菌后PtALF mRNA的表达变化 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-61页 |
| 第三节 三疣梭子蟹C-型溶菌酶(c-type lysozyme)基因的克隆与表达分析 | 第61-73页 |
| 1 材料与方法 | 第62-63页 |
| ·实验材料 | 第62页 |
| ·实验动物 | 第62页 |
| ·引物 | 第62页 |
| ·实验方法 | 第62-63页 |
| 2 结果 | 第63-69页 |
| ·C-型溶菌酶全长cDNA的克隆 | 第63页 |
| ·C-型溶菌酶全长cDNA的序列分析 | 第63-64页 |
| ·C-型溶菌酶基因的同源性分析 | 第64-67页 |
| ·C-型溶菌酶氨基酸序列的进化树分析 | 第67-68页 |
| ·C-型溶菌酶mRNA的组织特异性 | 第68-69页 |
| ·注射溶藻弧菌后C-型溶菌酶mRNA的表达变化 | 第69页 |
| 3 讨论 | 第69-73页 |
| 第四节 三疣梭子蟹酚氧化酶原基因(proPO)片段的克隆与序列分析 | 第73-78页 |
| 1 材料与方法 | 第73-74页 |
| ·实验材料 | 第73-74页 |
| ·实验动物 | 第73页 |
| ·引物 | 第73-74页 |
| ·实验方法 | 第74页 |
| 2 结果与讨论 | 第74-78页 |
| ·酚氧化酶原cDNA片段的克隆 | 第74页 |
| ·酚氧化酶原基因的序列和同源性分析 | 第74-76页 |
| ·酚氧化酶原氨基酸序列的进化树分析 | 第76-78页 |
| 第五节 三疣梭子蟹类α_2-巨球蛋白基因片段的克隆与序列分析 | 第78-85页 |
| 1 材料与方法 | 第78-79页 |
| ·实验材料 | 第78-79页 |
| ·实验动物 | 第78页 |
| ·引物 | 第78-79页 |
| ·实验方法 | 第79页 |
| 2 结果与讨论 | 第79-85页 |
| ·类α_2-巨球蛋白cDNA片段的克隆 | 第79页 |
| ·类α_2-巨球蛋白基因的序列和同源性分析 | 第79-83页 |
| ·类α_2-巨球蛋白氨基酸序列的进化树分析 | 第83-85页 |
| 第三章 氨氮胁迫对三疣梭子蟹免疫机能评价指标的影响 | 第85-103页 |
| 第一节 氨氮胁迫对三疣梭子蟹血淋巴多巴胺含量、血细胞数量和吞噬率的影响 | 第85-92页 |
| 1 材料与方法 | 第85-88页 |
| ·实验材料 | 第85-86页 |
| ·实验方法 | 第86-88页 |
| ·实验梯度设置 | 第86页 |
| ·样品采集与制备 | 第86页 |
| ·实验指标的测定 | 第86-87页 |
| ·数据处理与分析 | 第87-88页 |
| 2 结果 | 第88-90页 |
| ·氨氮胁迫对三疣梭子蟹血淋巴多巴胺含量的影响 | 第88页 |
| ·氨氮胁迫对三疣梭子蟹血淋巴血细胞数量的影响 | 第88-90页 |
| ·氨氮胁迫对三疣梭子蟹血细胞吞噬率的影响 | 第90页 |
| 3 讨论 | 第90-92页 |
| 第二节 氨氮胁迫对三疣梭子蟹免疫相关酶活力及其mRNA表达的影响 | 第92-103页 |
| 1 材料与方法 | 第92-96页 |
| ·实验材料 | 第92-93页 |
| ·实验方法 | 第93-96页 |
| ·实验梯度设置 | 第93页 |
| ·样品采集与制备 | 第93页 |
| ·免疫相关酶活力的测定 | 第93-94页 |
| ·免疫相关基因mRNA表达的测定 | 第94-95页 |
| ·数据处理与分析 | 第95-96页 |
| 2 结果 | 第96-100页 |
| ·氨氮胁迫对三疣梭子蟹免疫相关酶活力的影响 | 第96-98页 |
| ·氨氮胁迫对三疣梭子蟹免疫相关基因mRNA表达的影响 | 第98-100页 |
| 3 讨论 | 第100-103页 |
| ·三疣梭子蟹在氨氮胁迫下酚氧化酶原激活系统的免疫响应 | 第100-101页 |
| ·三疣梭子蟹在氨氮胁迫下抗菌、溶菌活性的免疫调控机制 | 第101-103页 |
| 第四章 氨氮胁迫对三疣梭子蟹解毒代谢指标的影响 | 第103-114页 |
| 1 材料与方法 | 第103-106页 |
| ·实验材料 | 第103页 |
| ·实验方法 | 第103-106页 |
| ·实验梯度设置 | 第103页 |
| ·样品采集与制备 | 第103-104页 |
| ·氨氮解毒代谢指标的测定 | 第104-106页 |
| ·数据处理与分析 | 第106页 |
| 2 结果 | 第106-112页 |
| ·氨氮胁迫对三疣梭子蟹精氨酸酶活力及尿素含量的影响 | 第106-109页 |
| ·氨氮胁迫对三疣梭子蟹谷氨酰胺合成酶活力及谷氨酰胺含量的影响 | 第109-112页 |
| 3 讨论 | 第112-114页 |
| ·氨氮胁迫对三疣梭子蟹解毒代谢指标的影响 | 第112页 |
| ·三疣梭子蟹在氨氮胁迫下的解毒代谢机制 | 第112-114页 |
| 结论 | 第114-115页 |
| 参考文献 | 第115-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
| 发表学术论文 | 第137页 |
