| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-21页 |
| 1 隐孢子虫病研究进展 | 第10-17页 |
| ·病原学研究 | 第10-11页 |
| ·生活史 | 第11页 |
| ·流行病学 | 第11-13页 |
| ·传播及致病性 | 第13-14页 |
| ·隐孢子虫病检测与诊断技术的研究 | 第14-17页 |
| ·病原学诊断 | 第14页 |
| ·分子生物学诊断－PCR | 第14-15页 |
| ·免疫学诊断 | 第15-17页 |
| ·酶联免疫吸附试验（ELISA） | 第16页 |
| ·免疫荧光抗体试验（IFAT） | 第16-17页 |
| 2 乳酸菌载体的研究进展 | 第17-21页 |
| ·乳酸菌的基本概况 | 第17页 |
| ·LAB 的外源基因表达系统 | 第17-18页 |
| ·LAB 作为受体菌的应用 | 第18-19页 |
| ·外源基因克隆表达载体的类型 | 第19页 |
| ·非质粒表达系统 | 第19页 |
| ·质粒复制子系统 | 第19页 |
| ·LAB 的食品级表达系统 | 第19-20页 |
| ·干酪乳杆菌来源 | 第20-21页 |
| 第二部分 试验研究 | 第21-42页 |
| 试验一 p23 基因的克隆及大肠杆菌中表达 | 第21-32页 |
| 1 引言 | 第21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-26页 |
| ·试验材料 | 第21-23页 |
| ·质粒和菌种 | 第21-22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·引物设计 | 第22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-26页 |
| ·p23 基因扩增及测序 | 第23页 |
| ·原核表达载体pGEX-p23 的构建 | 第23-25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
| ·扩增片段与pGEX-6p-2 载体的连接 | 第24页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第24页 |
| ·PCR 扩增产物鉴定 | 第24页 |
| ·重组载体的筛选及鉴定 | 第24-25页 |
| ·p23 基因重组质粒的诱导表达 | 第25页 |
| ·诱导表达条件的优化 | 第25-26页 |
| ·不同时间上的诱导表达 | 第26页 |
| ·不同浓度时的诱导表达 | 第26页 |
| ·P23 表达产物纯化及鉴定 | 第26页 |
| 3 结果 | 第26-29页 |
| ·p23 基因 PCR 产物及测序结果 | 第26页 |
| ·重组载体pGEX-p23 的鉴定 | 第26-28页 |
| ·p23 基因原核表达条件的优化 | 第28页 |
| ·P23 表达产物纯化后的 SDS-PAGE 以及 Western blotting 检测 | 第28-29页 |
| 4 讨论 | 第29-32页 |
| 试验二 微小隐孢子虫p23 基因在干酪乳杆菌中的表达及其应用 | 第32-42页 |
| 1 引言 | 第32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-35页 |
| ·试验材料 | 第32-33页 |
| ·菌种及质粒 | 第32-33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·仪器设备 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-35页 |
| ·重组干酪乳杆菌pMG-p23 的构建和鉴定 | 第33-34页 |
| ·重组间接ELISA 方法 | 第34页 |
| ·间接免疫荧光抗体试验（IFAT）方法 | 第34-35页 |
| 3 结果 | 第35-38页 |
| ·重组质粒pMG-p23 的酶切鉴定、序列测序 | 第35页 |
| ·SDS-PAGE 和Western blotting | 第35-36页 |
| ·重组干酪乳杆菌pMG-p23 的IFAT 鉴定 | 第36页 |
| ·重组间接ELISA 试验 | 第36-38页 |
| ·IFAT 实验结果 | 第38页 |
| 4 讨论 | 第38-42页 |
| 主要结论 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-51页 |
| 作者简介 | 第51页 |
