| 中文摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第9-13页 |
| 第1章 前言 | 第13-25页 |
| 1.1 TRAIL简介 | 第13-19页 |
| 1.1.1 TRAIL的结构 | 第13-14页 |
| 1.1.2 TRAIL的受体 | 第14-16页 |
| 1.1.3 TRAIL诱导细胞凋亡的机制 | 第16-18页 |
| 1.1.4 TRAIL的生物学活性 | 第18-19页 |
| 1.2 TRAIL的研究现状 | 第19-22页 |
| 1.2.1 TRAIL的应用现状 | 第19-21页 |
| 1.2.2 TRAIL在应用中的弊端 | 第21-22页 |
| 1.3 论文设计 | 第22-25页 |
| 1.3.1 立题依据 | 第22-23页 |
| 1.3.2 实验方案 | 第23-25页 |
| 第2章 材料与方法 | 第25-39页 |
| 2.1 实验材料、仪器设备与常用试剂 | 第25-31页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.1.3 常用试剂和缓冲液配制 | 第27-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-39页 |
| 2.2.1 质粒构建 | 第31-32页 |
| 2.2.2 蛋白的表达及纯化 | 第32页 |
| 2.2.3 目的蛋白的鉴定 | 第32-33页 |
| 2.2.4 MTT检测细胞存活率 | 第33页 |
| 2.2.5 Caspase活力检测 | 第33-34页 |
| 2.2.6 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第34-35页 |
| 2.2.7 DAPI染色 | 第35页 |
| 2.2.8 蛋白体外稳定性检测 | 第35页 |
| 2.2.9 体内抗肿瘤活性实验 | 第35-36页 |
| 2.2.10 药代动力学 | 第36-37页 |
| 2.2.11 肝肾毒性评价 | 第37页 |
| 2.2.12 组织分布检测 | 第37-38页 |
| 2.2.13 ELISA | 第38-39页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第39-63页 |
| 3.1 TRAIL与腺病毒fiber融合表达的质粒构建 | 第39-42页 |
| 3.2 重组TRAIL蛋白的表达纯化 | 第42-46页 |
| 3.2.1 目的蛋白的诱导表达 | 第42-43页 |
| 3.2.2 目的蛋白的纯化 | 第43-45页 |
| 3.2.3 重组TRAIL蛋白纯度及三聚体状态的检测 | 第45-46页 |
| 3.3 重组TRAIL蛋白在多种肿瘤细胞中的凋亡活性检测 | 第46-53页 |
| 3.3.1 重组TRAIL蛋白对多种肿瘤细胞杀伤活力的检测 | 第46-48页 |
| 3.3.2 重组TRAIL蛋白对不同肿瘤细胞系的凋亡能力检测 | 第48-49页 |
| 3.3.3 重组TRAIL蛋白引发凋亡途径的检测 | 第49-51页 |
| 3.3.4 重组TRAIL蛋白对乳腺癌细胞杀伤活力的测定 | 第51-52页 |
| 3.3.5 重组TRAIL蛋白对正常细胞系的毒性 | 第52-53页 |
| 3.4 重组TRAIL蛋白体外稳定性评价 | 第53-55页 |
| 3.4.1 重组TRAIL蛋白在PBS缓冲液中的稳定性评价 | 第53-54页 |
| 3.4.2 重组TRAIL蛋白在血浆中的稳定性评价 | 第54页 |
| 3.4.3 重组TRAIL蛋白反复冻融后的稳定性评价 | 第54-55页 |
| 3.5 裸鼠模型上检测重组TRAIL体内抑瘤效果 | 第55-58页 |
| 3.5.1 低剂量重组TRAIL蛋白治疗效果 | 第55-56页 |
| 3.5.2 高剂量重组TRAIL蛋白治疗效果 | 第56-57页 |
| 3.5.3 不同注射方式检测FA1FT的抗肿瘤活性 | 第57-58页 |
| 3.6 重组TRAIL蛋白的药代动力学及组织分布 | 第58-60页 |
| 3.6.1 药代动力学检测 | 第58-59页 |
| 3.6.2 不同时间点重组TRAIL蛋白的组织分布 | 第59-60页 |
| 3.7 重组TRAIL的肝肾毒性检测 | 第60-63页 |
| 3.7.1 H&E染色检测肝肾毒性 | 第60-61页 |
| 3.7.2 检测ALT和AST活性 | 第61-63页 |
| 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-73页 |
| 作者简历 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
