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海南东寨港红树林植物内生放线菌药用资源勘探

创新点第8-9页
摘要第9-10页
Abstract第10页
前言第11-14页
第一章 植物内生放线菌和红树林第14-37页
    1. 植物内生菌研究进展第14-17页
        1.1 植物内生放线菌研究意义第14页
        1.2 植物内生放线菌次级代谢产物研究进展第14-17页
    2. 红树林生态第17-22页
        2.1 红树林环境及植物适应性第17-19页
        2.2 红树林植物种类及分布第19-20页
        2.3 红树林其他生物群落第20-22页
    3. 红树林植物内生放线菌研究现状第22-28页
        3.1 红树林植物内生放线菌多样性第22-25页
        3.2 红树林植物内生放线菌次级代谢产物第25-28页
    4. 中国东南沿海红树林概况第28-32页
        4.1 中国红树植物概况第28-31页
        4.2 海南东寨港红树林自然保护区概况第31-32页
    参考文献第32-37页
第二章 海南东寨港真红树植物内生放线菌多样性第37-65页
    1. 实验材料第37-42页
        1.1 样品第37-39页
        1.2 试剂及耗材第39-40页
        1.3 培养基及抑制剂第40-42页
            1.3.1 分离培养基第40-41页
            1.3.2 菌种纯化和保藏培养基第41页
            1.3.3 大肠杆菌转化培养基第41页
            1.3.4 抑制剂第41页
            1.3.5 配制注意事项第41-42页
    2. 实验方法第42-47页
        2.1 样品处理第42页
        2.2 菌落分离与纯化第42页
        2.3 菌种保藏第42-43页
            2.3.1 斜面保藏第42页
            2.3.2 甘油冷冻保藏第42页
            2.3.3 真空冷冻干燥保藏第42-43页
        2.4 菌株初步鉴定第43页
        2.5 菌株的分子鉴定第43-44页
            2.5.1 菌株总DNA的提取第43页
            2.5.2 16S rRNA基因的PCR扩增第43-44页
            2.5.3 琼脂糖凝胶电泳检测PCR反应结果第44页
            2.5.4 16S rRNA基因序列测定与分析第44页
        2.6 潜在新物种的初步鉴定第44-47页
            2.6.1 潜在新物种16S rRNA基因序列的克隆测定第44-46页
            2.6.2 形态特征第46-47页
    3. 结果与分析第47-62页
        3.1 菌株分离效果第47-48页
        3.2 培养特征观察和分群第48-49页
        3.3 基因组DNA的提取结果第49-50页
        3.4 真红树植物内生放线菌多样性分析第50-53页
        3.5 潜在新物种的初步鉴定结果第53-60页
            3.5.1 菌株S3Af-1序列测定第53-54页
            3.5.2 菌株S3Af-1系统发育分析第54-55页
            3.5.3 菌株S3Af-1的形态观察结果第55页
            3.5.4 菌株S3Cf-2序列测定第55-56页
            3.5.5 菌株S3Cf-2系统发育分析第56-60页
            3.5.6 菌株S3Cf-2的形态观察结果第60页
        3.6 放线菌在不同植物及植物部位的分布第60-62页
            3.6.1 放线菌在不同真红树植物的分布第60-61页
            3.6.2 放线菌在不同真红树植物部位的分布第61-62页
        3.7 放线菌在不同培养基中的分布第62页
    4. 讨论第62-64页
        4.1 放线菌的分离第62-63页
        4.2 放线菌的多样性第63-64页
    参考文献第64-65页
第三章 真红树植物内生放线菌活性研究及PKS、NRPS功能基因初步筛选第65-79页
    1. 实验材料第65-67页
        1.1 供试菌株第65页
        1.2 检定菌第65页
        1.3 试剂及耗材第65-66页
        1.4 实验仪器第66-67页
        1.5 培养基第67页
            1.5.1 放线菌发酵培养基第67页
            1.5.2 检定菌培养基第67页
    2. 实验方法第67-69页
        2.1 抗菌活性筛选第67-68页
            2.1.1 发酵与提取第67-68页
            2.1.2 检定菌培养基的制备第68页
            2.1.3 抗菌活性的筛选第68页
        2.2 PKS Ⅰ、PKS Ⅱ和NRPS功能基因的初步筛选第68-69页
            2.2.1 菌株总DNA提取第68页
            2.2.2 NRPS、PKS Ⅰ和PKS Ⅱ基因PCR扩增第68-69页
    3. 结果与分析第69-74页
        3.1 抗菌活性筛选结果第69-70页
        3.2 潜在新物种S3Cf-2和新种S3Af-1的活性筛选结果第70-71页
        3.3 PKS、NRPS功能基因初步筛选结果第71-74页
    4. 讨论第74-78页
        4.1 抗菌活性筛选第74-76页
        4.2 潜在新物种S3Cf-2活性评价第76-77页
        4.3 PKS、NRPS功能基因筛选第77-78页
    参考文献第78-79页
第四章 小单孢菌科潜在新物种S3Cf-2活性次级代谢产物研究第79-91页
    1. 实验材料第79-80页
        1.1 试剂及耗材第79页
        1.2 实验仪器第79-80页
        1.3 培养基第80页
            1.3.1 菌株培养基第80页
            1.3.2 菌株发酵培养基第80页
            1.3.3 检定菌培养基第80页
        1.4 检定菌第80页
    2. 实验方法第80-83页
        2.1 发酵周期测定第80-81页
            2.1.1 菌株纯化第80页
            2.1.2 一级菌悬液制备第80-81页
            2.1.3 二级发酵周期测定第81页
            2.1.4 活性测定第81页
        2.2 Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱层析及活性追踪第81页
        2.3 HPLC分析第81-83页
            2.3.1 样品预处理第81页
            2.3.2 HPLC分析条件第81-82页
            2.3.3 活性物质的LC-MS分析第82-83页
    3. 结果与分析第83-90页
        3.1 菌株S3Cf-2活性曲线测定结果第83-84页
        3.2 活性物质TLC分析结果第84页
        3.3 HPLC分离及活性检测第84-90页
    4. 讨论第90-91页
论文附录第91-118页
硕士研究生期间收录论文第118-119页
致谢第119-121页

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