中英文缩略词对照 | 第9-11页 |
中文摘要 | 第11-14页 |
Abstract | 第14-16页 |
1 前言 | 第17-19页 |
2 实验材料 | 第19-23页 |
2.1 实验动物 | 第19页 |
2.2 药品与试剂 | 第19-21页 |
2.2.1 抗体 | 第19页 |
2.2.2 主要药品与试剂 | 第19-21页 |
2.3 仪器与设备 | 第21-22页 |
2.4 图象分析软件 | 第22-23页 |
3 实验方法 | 第23-32页 |
3.1 实验动物的处理和小鼠急性肝损伤模型的建立 | 第23页 |
3.2 肝组织病理学检查 | 第23页 |
3.3 血清学指标 | 第23-24页 |
3.4 ELISA法检测小鼠血清和细胞上清液中IL-6,IL-10的含量 | 第24页 |
3.4.1 标本处理 | 第24页 |
3.4.2 实验检测步骤 | 第24页 |
3.5 肝脏灌流与KCs的分离和培养 | 第24-25页 |
3.6 细胞培养 | 第25页 |
3.7 Real time-PCR法检测小鼠肝脏组织与RAW264.7细胞、THP-1细胞中相关基因的mRNA动态表达 | 第25-28页 |
3.7.1 总RNA的提取和逆转录 | 第25-26页 |
3.7.2 PCR扩增实验 | 第26-28页 |
3.8. Western Blot法检测小鼠肝脏组织与RAW264.7细胞中相关基因的蛋白动态表达 | 第28-30页 |
3.8.1 蛋白样品的制备 | 第28页 |
3.8.2. SDS-PAGE电泳 | 第28-29页 |
3.8.3 转膜 | 第29页 |
3.8.4 抗体封闭 | 第29页 |
3.8.5 ECL显色 | 第29页 |
3.8.6 图像处理 | 第29-30页 |
3.9 细胞转染实验 | 第30-31页 |
3.9.1 siRNA的转染实验 | 第30页 |
3.9.2 PICK1质粒的构建 | 第30-31页 |
3.10 流式细胞术检测巨噬细胞表型变化 | 第31页 |
3.11 数据处理 | 第31-32页 |
4 实验结果 | 第32-48页 |
4.1 LPS诱导的小鼠急性肝损伤模型中各时间点的确定和肝组织中PICK1的动态表达情况 | 第32-33页 |
4.2 PICK1抑制剂FSC-231预处理后,小鼠急性肝损伤组织中炎性相关物质和PICK1的表达情况 | 第33-35页 |
4.2.1 各组肝脏的病理学检测 | 第33页 |
4.2.2 各组的小鼠血清中ALT酶,AST酶,IL-6因子的含量检测 | 第33-34页 |
4.2.3 各组的小鼠肝组织中炎性相关物质和PICK1的表达变化 | 第34页 |
4.2.4 各组的小鼠肝组织灌流的KCs中炎性相关物质和PICK1的表达变化 | 第34-35页 |
4.3 PICK1在体外LPS诱导和M1/M2型巨噬细胞中的动态表达情况 | 第35-37页 |
4.3.1 LPS诱导的RAW264.7细胞中TNF-α、IL-6和PICK1的动态表达 | 第36页 |
4.3.2 LPS诱导的THP-1细胞中TNF-α、IL-6和PICK1的动态表达 | 第36页 |
4.3.3 LPS和IFN-γ诱导的M1型和IL-4诱导的M2型巨噬细胞中极化标志物和PICK1的动态表达 | 第36-37页 |
4.4 PICK1对LPS+IFN-γ刺激诱导的M1型巨噬细胞极化的影响 | 第37-42页 |
4.4.1 过表达PICK1对LPS+IFN-γ刺激诱导的M1型巨噬细胞极化的影响 | 第37-39页 |
4.4.2 沉默PICK1对LPS+IFN-γ刺激诱导的M1巨噬细胞极化的影响 | 第39-42页 |
4.5 PICK1对IL-4刺激诱导的M2型巨噬细胞极化的影响 | 第42-43页 |
4.5.1 沉默或过表达PICK1后,M2巨噬细胞中PICK1的表达 | 第42页 |
4.5.2 沉默或过表达PICK1后,M2巨噬细胞中M2样标志物的表达 | 第42页 |
4.5.3 沉默或过表达PICK1后,M2巨噬细胞中Arg-1+细胞所占比例的变化 | 第42-43页 |
4.6 PICK1抑制剂FSC-231预处理LPS+IFN-γ刺激诱导的M1/IL-4刺激诱导的M2型RAW264.7细胞后,M1/M2巨噬细胞极化的变化情况 | 第43-45页 |
4.6.1 FSC-231预处理M1巨噬细胞后,M1巨噬细胞极化的变化情况 | 第43-44页 |
4.6.2 FSC-231预处理M2巨噬细胞后,M2巨噬细胞极化的变化情况 | 第44-45页 |
4.7 PICK1调控LPS+IFN-γ刺激诱导的M1/IL-4刺激诱导的M2巨噬细胞极化可能涉及的部分机制 | 第45-48页 |
4.7.1 PICK1抑制LPS+IFN-γ刺激诱导的M1巨噬细胞极化的下游NF-κB信号通路活性的研究 | 第45-46页 |
4.7.2. PICK1通过影响IL-4刺激诱导的M2型巨噬细胞中caveolin-1的表达而促进M2巨噬细胞极化 | 第46-48页 |
5 讨论 | 第48-52页 |
6 小结 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
附录 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
综述 | 第60-71页 |
参考文献 | 第66-71页 |