| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩写表 | 第9-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-20页 |
| 1.1 鸡主要垂直传播细菌疾病 | 第15-16页 |
| 1.1.1 沙门氏菌病 | 第15页 |
| 1.1.2 大肠杆菌病 | 第15页 |
| 1.1.3 奇异变形杆菌病 | 第15-16页 |
| 1.2 病原细菌检测技术 | 第16-19页 |
| 1.2.1 传统的检测方法 | 第16页 |
| 1.2.2 免疫学检测方法 | 第16-17页 |
| 1.2.3 分子生物学技术 | 第17页 |
| 1.2.4 PCR检测技术 | 第17-18页 |
| 1.2.5 核酸等温扩增技术 | 第18-19页 |
| 1.3 研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 沙门氏菌分离鉴定与分子生物学诊断 | 第20-30页 |
| 2.1 试验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 菌株与病料样品 | 第20页 |
| 2.1.2 试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.3 仪器 | 第21页 |
| 2.2 试验方法 | 第21-22页 |
| 2.2.1 沙门氏菌的分离鉴定 | 第21页 |
| 2.2.2 革兰氏染色 | 第21页 |
| 2.2.3 DNA提取 | 第21-22页 |
| 2.3 沙门氏菌的 16S r RNA鉴定 | 第22页 |
| 2.3.1 16S r RNA的PCR扩增 | 第22页 |
| 2.3.2 序列测定分析 | 第22页 |
| 2.4 沙门氏菌SYBR Green I荧光定量PCR检测方法建立与应用 | 第22-23页 |
| 2.4.1 特异引物设计 | 第22页 |
| 2.4.2 引物特异性检测 | 第22-23页 |
| 2.4.3 特异性试验 | 第23页 |
| 2.4.4 线性范围测定和定量标准曲线制作 | 第23页 |
| 2.4.5 敏感性试验 | 第23页 |
| 2.4.6 重复性试验 | 第23页 |
| 2.4.7 组织样本检测 | 第23页 |
| 2.5 结果 | 第23-28页 |
| 2.5.1 沙门氏菌的菌落和菌体形态 | 第23-24页 |
| 2.5.2 沙门氏菌的 16S r RNA鉴定结果 | 第24-25页 |
| 2.5.3 沙门氏菌SYBR Green I荧光定量PCR检测方法建立与应用 | 第25-28页 |
| 2.6 讨论 | 第28-29页 |
| 2.7 小结 | 第29-30页 |
| 第三章 大肠杆菌分离鉴定与分子生物学诊断 | 第30-39页 |
| 3.1 试验材料 | 第30页 |
| 3.1.1 菌株与病料样品 | 第30页 |
| 3.1.2 试剂 | 第30页 |
| 3.1.3 仪器 | 第30页 |
| 3.2 试验方法 | 第30-31页 |
| 3.2.1 大肠杆菌的分离鉴定 | 第30-31页 |
| 3.2.2 革兰氏染色 | 第31页 |
| 3.2.3 DNA提取 | 第31页 |
| 3.3 大肠杆菌的 16S rRNA鉴定 | 第31页 |
| 3.3.1 16S rRNA的PCR扩增 | 第31页 |
| 3.3.2 序列测定分析 | 第31页 |
| 3.4 大肠杆菌SYBR Green I荧光定量PCR检测方法建立与应用 | 第31-32页 |
| 3.4.1 DNA提取 | 第31页 |
| 3.4.2 特异引物设计 | 第31页 |
| 3.4.3 引物特异性检测 | 第31-32页 |
| 3.4.4 特异性试验 | 第32页 |
| 3.4.5 线性范围测定和定量标准曲线制作 | 第32页 |
| 3.4.6 敏感性试验 | 第32页 |
| 3.4.7 重复性试验 | 第32页 |
| 3.4.8 组织样本检测 | 第32页 |
| 3.5 结果 | 第32-37页 |
| 3.5.1 大肠杆菌的菌落和菌体形态 | 第32-33页 |
| 3.5.2 大肠杆菌的 16S rRNA鉴定结果 | 第33-34页 |
| 3.5.3 大肠杆菌SYBR Green I荧光定量PCR检测方法建立与应用 | 第34-37页 |
| 3.6 讨论 | 第37-38页 |
| 3.7 小结 | 第38-39页 |
| 第四章 奇异变形杆菌分离鉴定与分子生物学诊断 | 第39-48页 |
| 4.1 试验材料 | 第39页 |
| 4.1.1 菌株与病料样品 | 第39页 |
| 4.1.2 试剂 | 第39页 |
| 4.1.3 仪器 | 第39页 |
| 4.2 试验方法 | 第39-40页 |
| 4.2.1 奇异变形杆菌的分离鉴定 | 第39-40页 |
| 4.2.2 革兰氏染色 | 第40页 |
| 4.2.3 DNA提取 | 第40页 |
| 4.3 奇异变形杆菌的 16S rRNA鉴定 | 第40页 |
| 4.3.1 16S rRNA的PCR扩增 | 第40页 |
| 4.3.2 序列测定分析 | 第40页 |
| 4.4 奇异变形杆菌SYBR Green I荧光定量PCR检测方法建立与应用 | 第40-41页 |
| 4.4.1 DNA提取 | 第40页 |
| 4.4.2 特异引物设计 | 第40页 |
| 4.4.3 引物特异性检测 | 第40-41页 |
| 4.4.4 特异性试验 | 第41页 |
| 4.4.5 线性范围测定和定量标准曲线制作 | 第41页 |
| 4.4.6 敏感性试验 | 第41页 |
| 4.4.7 重复性试验 | 第41页 |
| 4.4.8 组织样本检测 | 第41页 |
| 4.5 结果 | 第41-46页 |
| 4.5.1 奇异变形杆菌的菌落和菌体形态 | 第41-42页 |
| 4.5.2 鸡奇异变形杆菌的 16S rRNA鉴定结果 | 第42-43页 |
| 4.5.3 奇异变形杆菌SYBR Green I荧光定量PCR检测方法建立与应用 | 第43-46页 |
| 4.6 讨论 | 第46-47页 |
| 4.7 小结 | 第47-48页 |
| 第五章 沙门氏菌、大肠杆菌和奇异变形杆菌的三重SYBR Green I荧光定量PCR检测方法的建立 | 第48-52页 |
| 5.1 试验材料 | 第48页 |
| 5.2 试验方法 | 第48-49页 |
| 5.2.1 三重荧光定量PCR反应体系的建立 | 第48-49页 |
| 5.3 结果 | 第49-51页 |
| 5.3.1 特异性试验结果 | 第49页 |
| 5.3.2 灵敏度试验结果 | 第49页 |
| 5.3.3 重复性试验结果 | 第49-50页 |
| 5.3.4 组织样本检测结果 | 第50-51页 |
| 5.4 讨论 | 第51页 |
| 5.5 小结 | 第51-52页 |
| 第六章 沙门氏菌、大肠杆菌和奇异变形杆菌的三重SYBR Green I荧光定量PCR试剂盒的组装及应用 | 第52-56页 |
| 6.1 材料 | 第52页 |
| 6.2 方法 | 第52-53页 |
| 6.2.1 试剂盒的组装 | 第52页 |
| 6.2.2 试剂盒评价 | 第52-53页 |
| 6.3 结果 | 第53-55页 |
| 6.3.1 特异性试验 | 第53页 |
| 6.3.2 敏感性试验及标准曲线的建立 | 第53-54页 |
| 6.3.3 重复性试验 | 第54页 |
| 6.3.4 试剂盒应用 | 第54-55页 |
| 6.3.5 试剂盒的保存条件与保存期 | 第55页 |
| 6.4 讨论 | 第55页 |
| 6.5 小结 | 第55-56页 |
| 结论 | 第56页 |
| 技术关键及创新点 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
| 发表论文与参加科研项目 | 第63-64页 |
