摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6页 |
第一章 引言 | 第10-19页 |
1.1 糖基转移酶基因家族的发现 | 第10-12页 |
1.2 糖基转移酶基因家族的功能研究 | 第12-16页 |
1.2.1 糖基转移酶涉及植物激素的调控 | 第13页 |
1.2.2 糖基转移酶涉及植物次生代谢物的合成与调控 | 第13-16页 |
1.3 糖苷转移酶的鉴定与分离 | 第16-18页 |
1.4 本研究的基础和意义 | 第18-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-25页 |
2.1 实验材料 | 第19-20页 |
2.1.1 实验材料与种植条件 | 第19页 |
2.1.2 候选目标代谢物材料的分离 | 第19页 |
2.1.3 候选目标代谢物材料的结构解析 | 第19-20页 |
2.1.4 候选目标代谢物材料的糖成分鉴定 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-25页 |
2.2.1 细胞毒性测定 | 第20页 |
2.2.2 黄瓜叶片利用Trizol方法提取RNA | 第20-21页 |
2.2.3 候选基因的表达丰度分析(qRT-PCR) | 第21-22页 |
2.2.4 系统发生树的构建 | 第22页 |
2.2.5 蛋白纯化和体外酶测定 | 第22-23页 |
2.2.6 体外酶促反应产物的UPLC-qTOF-MS分析 | 第23页 |
2.2.7 黄瓜子叶瞬时基因表达测定 | 第23页 |
2.2.8 9930 叶片代谢物的HPLC-QQQ-MS的分析。 | 第23页 |
2.2.9 农杆菌EHA105热激感受态细胞的制备与转化 | 第23-25页 |
第三章 结果与讨论 | 第25-38页 |
3.1 实验结果与分析 | 第25-36页 |
3.1.1 目标代谢物结构是CuC 3-O-β-吡喃葡萄糖苷 | 第25-26页 |
3.1.2 两种代谢物对两种细胞系的细胞毒性的测定 | 第26-27页 |
3.1.3 利用共表达分析的筛选后选基因 | 第27-28页 |
3.1.4 运用转录组与代谢表型相结合方法筛选后选基因 | 第28-30页 |
3.1.5 进化树分析 | 第30-32页 |
3.1.6 候选基因UGT73AM3的酶促测定和子叶瞬时过表达实验 | 第32-33页 |
3.1.7 候选基因的底物选择性 | 第33-36页 |
3.1.8 UGT73AM3对葫芦素C和柚皮素动力学参数 | 第36页 |
3.2 讨论 | 第36-38页 |
3.2.1 高通量测序和代谢组学在候选基因筛选方面的优势 | 第36-37页 |
3.2.2 植物糖基化的作用及优势 | 第37页 |
3.2.3 黄瓜葫芦素C糖基化可能的作用 | 第37-38页 |
第四章 全文结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-45页 |
附录 | 第45-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简历 | 第54页 |