摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
第1章 HMGN5综述 | 第18-33页 |
1.1 HMG家族蛋白 | 第18-22页 |
1.1.1 HMGA蛋白概述 | 第19-20页 |
1.1.2 HMGB蛋白概述 | 第20-21页 |
1.1.3 HMGN蛋白概述 | 第21-22页 |
1.2 HMGN5的结构和相关生物学功能 | 第22-25页 |
1.2.1 HMGN5基因的定位 | 第22页 |
1.2.2 HMGN5基因的结构 | 第22-23页 |
1.2.3 HMGN5蛋白结构 | 第23页 |
1.2.4 HMGN5蛋白与核小体的结合方式 | 第23-24页 |
1.2.5 HMGN5蛋白中特异性C端结构对其生物作用的影响 | 第24-25页 |
1.3 HMGN5在组织发育过程中的表达 | 第25-26页 |
1.4 HMGN5折叠染色体,影响基因转录的机制 | 第26-28页 |
1.4.1 HMGN5调节基因转录的可能机制 | 第26-27页 |
1.4.2 HMGN5与H1竞争性结合染色体的模式 | 第27-28页 |
1.5 HMGN5在生理和病理方面的作用 | 第28-29页 |
1.6 HMGN5在肿瘤中的最新研究进展 | 第29-31页 |
1.7 小结和展望 | 第31-33页 |
第2章 引言 | 第33-41页 |
2.1 基因治疗的概述 | 第33-35页 |
2.1.1 基因转移技术 | 第33-34页 |
2.1.2 基因治疗策略 | 第34-35页 |
2.1.3 基因治疗优点 | 第35页 |
2.2 RNAi概述 | 第35-36页 |
2.2.1 RNAi技术分子机制 | 第35-36页 |
2.2.2 RNAi技术发展 | 第36页 |
2.3 RNA干扰技术在肺癌中的研究进展 | 第36-39页 |
2.3.1 肺癌基因研究的主要策略 | 第36-37页 |
2.3.2 RNA干扰技术在肺癌的主要研究进展 | 第37-38页 |
2.3.3 RNA干扰技术在肺癌中的研究成果 | 第38-39页 |
2.4 HMGN5基因概述 | 第39-40页 |
2.4.1 HMGN5基因的发现 | 第39页 |
2.4.2 HMGN5基因的结构 | 第39页 |
2.4.3 HMGN5基因的研究进展及现状 | 第39-40页 |
2.5 HMGN5在肺癌中的研究 | 第40-41页 |
第3章 HMGN5在肺癌中表达与临床意义 | 第41-51页 |
3.1 前言 | 第41页 |
3.2 材料和方法 | 第41-45页 |
3.2.1 标本来源 | 第41-42页 |
3.2.2 主要试剂 | 第42页 |
3.2.3 主要仪器设备 | 第42页 |
3.2.4 实验方法 | 第42-44页 |
3.2.5 统计学分析 | 第44-45页 |
3.3 结果 | 第45-47页 |
3.3.1 HMGN5表达与肺癌组织临床病理特征的关系 | 第45-46页 |
3.3.2 肺癌与癌旁组织中HMGN5 mRNA的表达 | 第46-47页 |
3.4 讨论 | 第47-51页 |
第4章 慢病毒介导HMGN5 ShRNA载体的构建 | 第51-70页 |
4.1 前言 | 第51页 |
4.2 材料与方法 | 第51-63页 |
4.2.1 细胞株、菌株及载体系统 | 第51-52页 |
4.2.2 主要试剂 | 第52-53页 |
4.2.3 主要仪器设备 | 第53-54页 |
4.2.4 实验方法 | 第54-63页 |
4.2.5 统计学处理 | 第63页 |
4.3 结果 | 第63-68页 |
4.3.1 重组慢病毒LentiLox 3.7-shRNA-HMGN5的PCR鉴定 | 第63页 |
4.3.2 LentiLox 3.7-siRNA-HMGN5慢病毒载体的测序鉴定 | 第63-64页 |
4.3.3 慢病毒质粒共转染293T细胞 | 第64页 |
4.3.4 慢病毒滴度测定 | 第64-65页 |
4.3.5 LentiLox 3.7-siRNA-HMGN5慢病毒载体感染肺癌细胞 | 第65-66页 |
4.3.6 siRNA有效靶点的筛选 | 第66-67页 |
4.3.7 有效沉默HMGN5基因的siRNA靶点验证 | 第67-68页 |
4.4 讨论 | 第68-70页 |
第5章 沉默HMGN5表达对肺癌细胞株的生物学影响 | 第70-84页 |
5.1 前言 | 第70页 |
5.2 材料与方法 | 第70-75页 |
5.2.1 细胞株 | 第70-71页 |
5.2.2 试剂及试剂盒 | 第71页 |
5.2.3 主要仪器 | 第71页 |
5.2.4 试剂的配置 | 第71-73页 |
5.2.5 实验方法 | 第73-75页 |
5.2.6 实验统计处理 | 第75页 |
5.3 结果 | 第75-81页 |
5.3.1 细胞培养与病毒感染 | 第75-76页 |
5.3.2 MTT生长曲线测定结果 | 第76-77页 |
5.3.3 Brdu细胞增殖实验 | 第77-78页 |
5.3.4 克隆形成实验 | 第78-80页 |
5.3.5 流式细胞检测细胞周期的结果 | 第80-81页 |
5.4 讨论 | 第81-84页 |
第6章 裸鼠成瘤动物模型验证HMGN5对肺癌成瘤能力的影响 | 第84-91页 |
6.1 前言 | 第84页 |
6.2 材料和方法 | 第84-85页 |
6.2.1 细胞株、裸鼠 | 第84页 |
6.2.2 主要试剂 | 第84页 |
6.2.3 主要仪器设备 | 第84-85页 |
6.2.4 实验方法 | 第85页 |
6.2.5 统计学分析 | 第85页 |
6.3 结果 | 第85-87页 |
6.3.1 细胞病毒感染 | 第85-86页 |
6.3.2 HMGN5对裸鼠成瘤动物模型成瘤能力的影响 | 第86-87页 |
6.4 讨论 | 第87-91页 |
第7章 结论 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-103页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第103-105页 |
致谢 | 第105页 |