| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 主要符号说明 | 第8-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-19页 |
| 1.1 BMPs简介 | 第11-14页 |
| 1.1.1 BMPs成员 | 第11页 |
| 1.1.2 BMPs信号通路 | 第11-12页 |
| 1.1.3 BMPs在卵泡生长发育中的作用 | 第12-14页 |
| 1.2 BMP4与卵泡生长发育 | 第14-18页 |
| 1.2.1 BMP4对卵泡生长发育的影响 | 第14-15页 |
| 1.2.2 BMP4对颗粒细胞凋亡的影响 | 第15-18页 |
| 1.3 研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与试剂 | 第19-33页 |
| 2.1 试验材料 | 第19页 |
| 2.2 试验器材、试剂及使用软件 | 第19-22页 |
| 2.2.1 主要仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.2.2 试剂 | 第20-22页 |
| 2.2.3 应用的生物学软件 | 第22页 |
| 2.3 试验方法 | 第22-33页 |
| 2.3.1 BMP4序列扩增 | 第22-26页 |
| 2.3.2 BMP4在颗粒细胞与膜细胞的相对表达 | 第26-28页 |
| 2.3.3 BMP4基因转染载体构建 | 第28-29页 |
| 2.3.4 等级前卵泡颗粒细胞培养 | 第29-30页 |
| 2.3.5 BMP4基因转染等级前卵泡颗粒细胞 | 第30-31页 |
| 2.3.6 CCK法检测转染后颗粒细胞数目变化 | 第31页 |
| 2.3.7 BrdU检测转染后颗粒细胞增殖 | 第31页 |
| 2.3.8 TUNEL检测转染后颗粒细胞凋亡 | 第31-32页 |
| 2.3.9 转染后BCL2、caspase-3基因mRNA水平检测 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-44页 |
| 3.1 鹅卵巢总RNA提取结果 | 第33页 |
| 3.2 鹅BMP4基因CDS区克隆 | 第33-34页 |
| 3.3 鹅BMP4基因生物信息学预测 | 第34-40页 |
| 3.3.1 BMP4基因CDS区序列变异 | 第34-37页 |
| 3.3.2 不同物种BMP4基因进化树 | 第37页 |
| 3.3.3 鹅BMP4氨基酸水平相关预测 | 第37-40页 |
| 3.4 BMP4在鹅卵泡颗粒细胞与膜细胞的表达特性 | 第40-41页 |
| 3.5 转染载体构建结果 | 第41-42页 |
| 3.6 转染后颗粒细胞活细胞数目变化 | 第42页 |
| 3.7 转染BMP4后颗粒细胞增殖与凋亡情况 | 第42-44页 |
| 3.7.1 转染BMP4后颗粒细胞增殖情况 | 第42-43页 |
| 3.7.2 转染BMP4后等颗粒细胞凋亡情况 | 第43页 |
| 3.7.3 转染后BCL2、caspase-3基因mRNA水平表达量变化 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-48页 |
| 4.1 BMP4基因序列变异特点 | 第44-45页 |
| 4.2 BMP4氨基酸序列特点 | 第45-46页 |
| 4.3 BMP4基因在颗粒细胞与膜细胞中的发育性表达变化规律 | 第46页 |
| 4.4 BMP4基因转染颗粒细胞后对颗粒细胞凋亡的抑制作用 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 攻读硕士学位期间论文发表情况 | 第55页 |
