摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
第一章 综述 | 第10-22页 |
第一节 凋亡诱导因子 | 第10-17页 |
1. 凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factor,AIF) | 第10-12页 |
2. AIF的生理功能 | 第12-16页 |
3. AIF的同源蛋白 | 第16页 |
4. 展望 | 第16-17页 |
第二节 去乙酰化酶Sirt1 | 第17-22页 |
1. Sirt1的结构与分布 | 第17页 |
2. Sirt1的作用机制 | 第17-18页 |
3. Sirt1的活性调控机制 | 第18-20页 |
4. Sirt1的生理作用 | 第20-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-54页 |
第一节 实验材料与仪器 | 第22-25页 |
1. 细胞株与菌株 | 第22页 |
2. 质粒 | 第22-23页 |
3. 载体及引物 | 第23-24页 |
4. 实验试剂、药品及抗体 | 第24-25页 |
5. 实验仪器 | 第25页 |
第二节 实验原理与方法 | 第25-54页 |
1. 质粒的构建 | 第25-33页 |
2. 细胞的传代培养、冻存与复苏 | 第33-34页 |
3. 细胞转染 | 第34-37页 |
4. 慢病毒包装 | 第37-38页 |
5. 稳定表达细胞株的构建 | 第38-40页 |
6. Western Blot | 第40-47页 |
7. 免疫荧光染色 | 第47-50页 |
8. 免疫共沉淀技术 | 第50-52页 |
9. 基因组DNA提取 | 第52-54页 |
第三章 结果与分析 | 第54-65页 |
第一节 Sirt1新的结合蛋白的确定 | 第54-56页 |
第二节 凋亡信号刺激下Sirt1与AIF的结合和共定位 | 第56-59页 |
第三节 AIF乙酰化水平的确定 | 第59-61页 |
第四节 Sirt1对AIF发挥其去乙酰化功能 | 第61-63页 |
第五节 Sirt1对细胞程序性坏死的影响 | 第63-65页 |
第四章 讨论 | 第65-67页 |
肥胖关键因子KLF14对细胞代谢的调控 | 第67-78页 |
第一章 KLF14 | 第67-69页 |
第二章 材料与方法 | 第69-73页 |
第一节 实验材料与仪器 | 第69页 |
第二节 实验方法与原理 | 第69-73页 |
1. 流式细胞术 | 第69-70页 |
2. 反转录PCR(RT-PCR) | 第70-73页 |
第三章 结果与分析 | 第73-78页 |
第一节 KLF14阻滞细胞周期 | 第73-74页 |
第二节 KLF14将细胞周期阻滞在G2/M期 | 第74-76页 |
第三节 KLF14阻滞细胞周期的机制 | 第76页 |
第四节 KLF14与细胞凋亡的关系 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-82页 |
附录Ⅰ | 第82-83页 |
致谢 | 第83页 |